Эффективность оценки степени метилирования генов APC, GSTP1 и RASSF1A как маркеров рака предстательной железы
Автор: Абоян И.А., Федотова Е.Н., Максимов А.Ю., Комарова Е.Ф.
Журнал: Ульяновский медико-биологический журнал @medbio-ulsu
Рубрика: Клиническая медицина
Статья в выпуске: 3, 2022 года.
Бесплатный доступ
Рак предстательной железы (РПЖ) представляет собой одно из наиболее распространенных онкозаболеваний, занимающее четвертое место в мировой структуре смертности. В связи с отсутствием клинических проявлений на ранних стадиях, а также низкой специфичностью существующих методов дифференциальной лабораторной диагностики актуальным остается поиск чувствительных малоинвазивных маркеров рака предстательной железы. Целью настоящего исследования стал анализ уровней метилирования генов APC, GSTP1 и RASSF1A в биологическом материале при патологиях предстательной железы и эффективности их применения для выявления РПЖ. Материалы и методы. Для молекулярно-генетического исследования уровня метилирования APC, GSTP1 и RASFF1А методом МС-ПЦР использовали геномную ДНК, выделенную из образцов постмассажной мочи, плазмы крови и биопсийного материала пациентов с РПЖ (n=34) и доброкачественной гиперплазией предстательной железы (ДГПЖ) (n=27). Контрольную группу составили 20 мужчин без выявленной патологии. Анализ продуктов МС-ПЦР осуществляли путем проведения электрофореза в 2 % агарозном геле. Результаты. Наиболее часто во всех изученных типах биологического материала отмечается средняя степень метилирования APC, GSTP1 и RASFF1А. Имеются статистически значимые различия между группами с патологиями ПЖ с учетом биологического материала. Оценка отношения шансов выявления РПЖ показала, что наличие гиперметилированного APC в постмассажной моче, гена GSTP1 в плазме крови и гена RASFF1А в биопсийном материале увеличивает вероятность обнаружения РПЖ в 2,5, 12,1 и 4,1 раза соответственно. Показана низкая чувствительность (55,3 %) и высокая специфичность (87 %) диагностики РПЖ по уровню метилирования гена APC в образцах постмассажной мочи, гена GSTP1 в плазме крови, а также гена RASFF1А в биопсийном материале. При сочетанном использовании статуса метилирования изученных генов чувствительность составила 65,2 %, а специфичность - 82,4 %, а при добавлении в панель значения общего простатспецифического антигена (ПСА) - 79,1 и 82, 9 % соответственно. Выводы. Уровни метилирования APC в образцах постмассажной мочи, GSTP1 в плазме крови и RASSF1A в биопсийном материале могут быть рассмотрены в качестве высокоспецифичных диагностических маркеров РПЖ. Совместное применение данных показателей увеличивает специфичность диагностики в сравнении с определением уровня инициального ПСА, а при включении в панель последнего увеличивает также чувствительность панели для выявления РПЖ.
Рак предстательной железы, apc, gstp1, rassf1a, метилирование, постмассажная моча
Короткий адрес: https://sciup.org/14125359
IDR: 14125359 | УДК: 616.65-006.6 | DOI: 10.34014/2227-1848-2022-3-73-85
Effectiveness of evaluation of APC, GSTP1 and RASSF1A methylation level as a prostate cancer marker
Prostate cancer (PC) is one of the most common oncological diseases, ranking fourth in the global mortality structure. Due to the absence of clinical manifestations in the early stages, and poor methods of differential laboratory diagnostics, the search for sensitive minimally invasive prostate cancer (PC) markers remains relevant. The aim of the study was to analyze APC, GSTP1 and RASSF1A methylation levels in biological material in prostate pathologies and their effectiveness in PC detection. Materials and Methods. For molecular genetic study of APC, GSTP1 and RASFF1A methylation levels by molecular-specific PCR test, the authors used genomic DNA isolated from samples of post-massage urine, blood plasma and biopsy material from patients with PC (n=34) and benign prostatic hyperplasia (BPH) (n=27). The control group consisted of 20 men without any identified pathology. Analysis of molecular-specific PCR products was carried out by 2 % agarose gel electrophoresis. Results. The average APC, GSTP1, and RASFF1A methylation level was mainly noted in all types of biological material. There were statistically significant differences between groups with pancreatic pathologies, taking into account biological material. The evaluation of the odds ratio of PC detection showed that the hypermethylated APC in post-massage urine, GSTP1 in blood plasma, and RASFF1A in biopsy material increased the probability of PC detection by 2.5, 12.1, and 4.1 times, respectively. Low sensitivity (55.3 %) and high specificity (87 %) of PC diagnostics in terms of APC methylation in post-massage urine, GSTP1 in blood plasma, and RASFF1A in biopsy material were shown. With the combined use of the methylation gene status, the sensitivity was 65.2 %, and the specificity was 82.4 %. When the total prostate-specific antigen (PSA) value was added to the panel, the indices were 79.1 % and 82.9 %, respectively. Conclusion. APC methylation levels in post-massage urine, GSTP1 in blood plasma, and RASSF1A in biopsy can be considered as highly specific diagnostic PC markers. The combined use of these indicators increases the specificity of diagnosis in comparison with the initial PSA level. When included in the panel, the latter also increases the panel sensitivity for PC detection.
Текст научной статьи Эффективность оценки степени метилирования генов APC, GSTP1 и RASSF1A как маркеров рака предстательной железы
Введение. Рак предстательной железы (РПЖ) является одним из наиболее часто диагностируемых злокачественных образований, занимающим четвертое место в мировой структуре смертности мужского населения [1]. Использование простатспецифического антигена (ПСА) в качестве диагностического маркера позволило увеличить частоту обнару-
жения РПЖ на ранних стадиях, что привело к увеличению прижизненной постановки диагноза до 16 % [2]. Однако данный метод обладает низкими специфичностью и чувствительностью, что нередко приводит к гипертерапии ложноположительных пациентов и проведению необязательной биопсии [3]. До 30 % случаев РПЖ могут быть диагностированы в диа-
Таблица 1
Table 1
Inclusion and exclusion criteria
|
Критерии включения Inclusion criteria |
возраст <75 лет age <75 |
|
первично обратившиеся пациенты, отсутствие лечения newly-admitted patients, no treatment |
|
|
ПСА 2,5–10 нг/мл PSA 2,5–10 ng/ml |
|
|
Критерии исключения Exclusion criteria |
ПСА >10 нг/мл; PSA >10 ng/ml |
|
декомпенсированная сопутствующая соматическая патология decompensated concomitant somatic pathology |
|
|
признаки острого или обостренного хронического простатита на момент обследования signs of acute or exacerbate chronic prostatitis at the moment of examination |
|
|
лабораторные или клинические признаки острого воспаления мочевых путей laboratory and clinical signs of acute inflammation of the urinary tract |
|
|
наличие хронической болезни почек chronic kidney disease |
Таблица 2
Table 2
APC methylation level and frequency in the studied groups
|
Степень метилирования APC APC methylation level |
Вид биологического материала Type of biological material |
χ2 (р) |
||
|
Биоптат Biopsy |
Моча Urine |
Плазма Plasma |
||
|
Больные РПЖ (n=34) Patients with prostate cancer (PC) (n=34) |
||||
|
Высокая High |
0 |
4 (11,8 %) |
0 |
9,818 (0,049) |
|
Степень метилирования APC APC methylation level |
Вид биологического материала Type of biological material |
χ2 (р) |
||
|
Биоптат Biopsy |
Моча Urine |
Плазма Plasma |
||
|
Средняя Medium |
0 |
1 (2,9 %) |
0 |
|
|
Низкая Low |
34 (100 %) |
29 (85,3 %) |
34 (100 %) |
|
|
Отсутствие No methylation |
0 |
0 |
0 |
|
|
χ2 (р) РПЖ/контроль – 6,154 (0,047) χ2 (р) PC/control – 6,154 (0,047) |
||||
|
Пациенты с ДГПЖ (n=27) Patients with benign prostatic hyperplasia (BPH) |
||||
|
Высокая High |
0 |
0 |
0 |
4,308 (0,366) |
|
Средняя Medium |
0 |
3 (11,1 %) |
0 |
|
|
Низкая Low |
27 (100 %) |
24 (88,9 %) |
27 (100 %) |
|
|
Отсутствие No methylation |
0 |
0 |
0 |
|
|
χ2 (р) ДГПЖ/контроль – 5,231 (0,039) χ2 (р) BPH/control – 5,231 (0,039) |
||||
|
χ2 РПЖ/ДГПЖ – 16,532 (р=0,001) χ2 PC/BPH – 16,532 (р=0,001) |
||||
|
Контрольная группа (n=20) Control group (n=20) |
||||
|
Высокая High |
- |
0 |
0 |
5,154 (0,421) |
|
Средняя Medium |
- |
0 |
1 (4 %) |
|
|
Низкая Low |
- |
20 (100 %) |
19 (96 %) |
|
|
Отсутствие No methylation |
- |
0 |
0 |
|
Примечание. Здесь и далее приведены только статистически значимые межгрупповые различия, определенные с помощью критерия χ2 Пирсона.
Note. Here and below, only statistically significant intergroup differences are given. Pearson's χ2 test is used.
При изучении метилирования гена GSTP1 в группе пациентов с РПЖ с наибольшей частотой средняя степень метилирования наблюдалась в образцах постмассажной мочи, а
наибольшая частота низкой степени метилирования была зарегистрирована в образцах плазмы крови (табл. 3).
Таблица 3
Table 3
GSTP1 methylation level and frequency in the studied groups
|
Степень метилирования GSTP1 GSTP1 methylation level |
Вид биологического материала Type of biological material |
χ2 (р) |
||
|
Биоптат Biopsy |
Моча Urine |
Плазма Plasma |
||
|
Больные РПЖ (n=34) Patients with PC (n=34) |
||||
|
Высокая High |
5 (14,7 %) |
0 |
3 (8,8 %) |
15,872 (<0,01) |
|
Средняя Medium |
21 (61,7 %) |
28 (82,4 %) |
18 (52,9 %) |
|
|
Низкая Low |
8 (23,6 %) |
6 (17,6 %) |
13 (38,2 %) |
|
|
Отсутствие No methylation |
0 |
0 |
0 |
|
|
χ2 (р) РПЖ/контроль – 23,442 (р<0,01) χ2 (р) PC/control – 23,442 (р<0,01) |
χ2 (р) РПЖ/контроль – 15,524 (р=0,002) χ2 (р) PC/control – 15,524 (р=0,002) |
|||
|
Пациенты с ДГПЖ (n=27) Patients with BPH (n=27) |
||||
|
Высокая High |
0 |
0 |
3 (11,1 %) |
5,461 (0,244) |
|
Средняя Medium |
16 (59,2 %) |
15 (55,6 %) |
16 (59,3 %) |
|
|
Низкая Low |
11 (40,7 %) |
12 (44,4 %) |
8 (29,6 %) |
|
|
Отсутствие No methylation |
0 |
0 |
0 |
|
|
χ2 (р) ДГПЖ/контроль – 13,863 (р<0,001) χ2 (р) BPH/control – 13,863 (р<0,001) |
χ2 (р) ДГПЖ/контроль – 17,910 (р<0,001) χ2 (р) BPH/control – 17,910 (р<0,001) |
|||
|
χ2 (р) РПЖ/ДГПЖ – 3,987 (р=0,046) χ2 (р) PC/BPH – 3,987 (р=0,046) |
||||
|
Контрольная группа (n=20) Control group (n=20) |
||||
|
Высокая High |
- |
0 |
0 |
4,257 (0,538) |
|
Средняя Medium |
- |
0 |
0 |
|
|
Низкая Low |
- |
16 (80 %) |
14 (70 %) |
|
|
Отсутствие No methylation |
4 (20 %) |
6 (30 %) |
||
В группе пациентов с ДГПЖ высокая степень метилирования промотора гена GSTP1 наблюдалась только в образцах плазмы крови (табл. 3). В образцах плазмы крови и постмассажной мочи условно здоровых мужчин наблюдалась низкая степень метилирования гена GSTP1 в 70 % и 80 % случаев соответственно, а в остальных случаях зафиксировано отсутствие метилирования (табл. 3).
При сравнении степени метилирования гена GSTP1 при различных состояниях ПЖ в образцах постмассажной мочи были выявлены статистически значимые различия как между пациентами с патологией предстательной железы и условно здоровыми, так и между больными РПЖ и пациентами с ДГПЖ (табл. 3). В образцах плазмы крови также обнаружены
различия между группой обследуемых с патологией ПЖ и группой контроля, однако в группах пациентов с РПЖ и ДГПЖ статистически значимые различия по степени метилирования данного гена отсутствовали (табл. 3).
При оценке метилирования гена RASFF1А обнаружено, что в группе больных РПЖ высокая степень метилирования наблюдалась только в одном образце постмассажной мочи, в биопсийном материале преобладала средняя степень метилирования (82,3 %), а в моче и плазме – низкая (55,9 % и 61,8 % соответственно) (табл. 4). В группе пациентов с ДГПЖ в образцах биоптатов и постмассажной мочи преобладала низкая степень метилирования, в то время как в образцах плазмы крови – средняя (табл. 4).
Таблица 4
Table 4
Степень и частота метилирования гена RASFF1А в исследуемых группах
RASFF1А methylation level and frequency in the studied groups
|
Степень метилирования RASFF1А RASFF1А methylation level |
Вид биологического материала Type of biological material |
χ2 (р) |
||
|
Биоптат Biopsy |
Моча Urine |
Плазма Plasma |
||
|
Больные РПЖ (n=34) Patients with PC (n=34) |
||||
|
Высокая High |
0 |
1 (2,9 %) |
0 |
13,326 (0,012) |
|
Средняя Medium |
27 (82,3 %) |
14 (41,2 %) |
13 (38,2 %) |
|
|
Низкая Low |
7 (18,6 %) |
19 (55,9 %) |
21 (61,8 %) |
|
|
Отсутствие No methylation |
0 |
0 |
0 |
|
|
Пациенты с ДГПЖ (n=27) Patients with BPH (n=27) |
||||
|
Высокая High |
0 |
0 |
0 |
3,762 (0,315) |
|
Средняя Medium |
6 (21 %) |
11 (41 %) |
16 (59 %) |
|
|
Низкая Low |
21 (79 %) |
16 (59 %) |
11 (41 %) |
|
|
Отсутствие No methylation |
0 |
0 |
0 |
|
|
χ2 (р) РПЖ/ДГПЖ – 4,259 (p=0,004) χ2 (р) PC/BPH – 4,259 (p=0,004) |
||||
|
Степень метилирования RASFF1А RASFF1А methylation level |
Вид биологического материала Type of biological material |
χ2 (р) |
||
|
Биоптат Biopsy |
Моча Urine |
Плазма Plasma |
||
|
Контрольная группа (n=20) Control group (n=20) |
||||
|
Высокая High |
- |
0 |
0 |
5,154 (0,421) |
|
Средняя Medium |
- |
0 |
0 |
|
|
Низкая Low |
- |
14 (70 %) |
15 (75 %) |
|
|
Отсутствие No methylation |
- |
6 (30 %) |
5 (25 %) |
|
Таблица 5
Table 5
Расчет величин отношения шансов выявления РПЖ с 95 % доверительным интервалом по показателям метилирования генов APC , GSTP1 , RASFF1А в группах с патологиями предстательной железы
Odd ratio of prostate cancer detection with a 95 % confidence interval according to APC, GSTP1, RASFF1A methylation in patients with prostate pathologies
|
APC , моча APC , urine |
GSTP1 , плазма GSTP1 , plasma |
RASFF1А , биоптат RASFF1А , biopsy |
|
|
Отношение шансов (OR) Odd ratio (OR) |
2,529 |
12,115 |
4,137 |
|
Стандартная ошибка отношения шансов (S) Root-mean-square error of odd ratio |
0,768 |
0,789 |
0,692 |
|
Нижняя граница 95 % ДИ (CI) Lower limit 95 % CI |
0,561 |
2,580 |
1,468 |
|
Верхняя граница 95 % ДИ (CI) Upper limit 95 % CI |
11,403 |
56,88 |
9,034 |
Примечание. ДИ – доверительный интервал.
Note. CI – confidence interval.
Таблица 6
Table 6
Чувствительность и специфичность методики выявления РПЖ по показателям метилирования генов APC , GSTP1 , RASFF1А и ПСА
Sensitivity and specificity of prostate cancer detection according to APC , GSTP1 , RASFF1A methylation and PSA
Была проведена оценка чувствительности и специфичности изученных ДНК-маркеров для того типа биологического материла, в котором были показаны статистически значимые различия между РПЖ и ДГПЖ, для каждого маркера отдельно и в комбинации (табл. 6). Анализ продемонстрировал низкую чувствительность и высокую специфичность неинвазивной диагностики РПЖ по уровню метилирования гена APC в образцах постмассажной мочи и гена GSTP1 в плазме крови. При этом определение степени метилирования гена RASFF1А в биопсийном материале может использоваться для отличия злокачественных и доброкачественных дисплазий ПЖ с 55,3 % чувствительностью и 87 % специфичностью. При сочетанном использовании статуса метилирования изученных генов чувствительность составила 65,2 %, специфичность – 82,4 %, а при добавлении в панель значения ПСА – 79,1 и 82,9 % соответственно (табл. 6).
Обсуждение. Анализ статуса метилирования промоторов генов APC, GSTP1 и RASFF1А показал, что наиболее часто во всех изученных типах биологического материала отмечается
средняя степень метилирования. По результатам проведенного исследования по статусу метилирования генов обнаружены статистически значимые групповые различия как между группами с патологиями ПЖ, так и в сравнении с контрольной группой практически здоровых людей. Причем для каждого из изученных генов-супрессоров был выявлен тот тип биологического материала, определение метилирования в котором повышает вероятность обнаружения РПЖ. Так, для гена APC таким биологическим материалом служит постмассажная моча, для гена GSTP1 – плазма крови, для гена RASFF1А – биоптаты опухоли ПЖ. Эти результаты имеют практическую значимость, поскольку обширная внутриопухолевая клональная гетерогенность локализованного и метастатического РПЖ создает проблему отбора образцов в процессе биопсии. Поэтому актуальным является поиск доступных неинвазивных источников материала для проведения молекулярно-генетических исследований при РПЖ. В исследовании Y. Nakai et al. (2014) было продемонстрировано содержание разрушающихся клеток и внеклеточной ДНК из разных участ-
В результате проведенного исследования показана наибольшая чувствительность и специфичность определения гена RASSF1A в образцах биоптатов, что подтверждает выводы А.В. Сивкова и соавт. [17]. При этом авторами была продемонстрирована целесообразность сочетанного использования молекулярно-генетических маркеров и ПСА в связи с гетерогенностью РПЖ. При использовании нами комбинации изученных генов с учетом типа биоматериала также обнаружена высокая чувствительность и специфичность, что свидетельствует о больших предикторных возможностях панели генов для выявления РПЖ в сравнении с определением статуса метилирования отдельных генов. Сочетанное использование степени метилирования генов и показа-
теля общего ПСА повысило обе диагностические характеристики панели относительно оценки статуса метилирования каждого гена отдельно, а также их комбинации. Такие же закономерности были обнаружены в исследовании А. Bakavicius et al. (2019), где было показано увеличение чувствительности и специфичности диагностики РПЖ в образцах постмассажной мочи при сочетанном использовании уровня метилирования генов GSTP1 , RARB , RASSF1 и показателя ПСА [18].
Заключение. Выявленные в проведенном исследовании закономерности позволяют рассматривать повышение уровней метилирования гена APC в образцах постмассажной мочи, GSTP1 в плазме крови и RASSF1A в биопсийном материале в качестве высокоспецифичных диагностических маркеров для выявления рака ПЖ. Совместное применение данных показателей увеличивает специфичность в сравнении с определением уровня инициального ПСА, а при включении в панель последнего увеличивает также чувствительность панели для выявления РПЖ в сравнении с оценкой метилирования генов в отдельности, что позволит оптимизировать диагностику РПЖ и сократить число биопсий.
Список литературы Эффективность оценки степени метилирования генов APC, GSTP1 и RASSF1A как маркеров рака предстательной железы
- Jain M.A., Sapra A. Cancer Prostate Screening. In: StatPearls. Treasure Island (FL): StatPearls Publishing; 2021.
- Strand S.H., Orntoft T.F., Sorensen K.D. Prognostic DNA methylation markers for prostate cancer. Int. J. Mol. Sci. 2014; 15 (9): 16544-16576. DOI: 10.3390/ijms150916544.
- Tkac J., Gajdosova V., Hroncekova S., Bertok T., Hires M., Jane E., Lorencova L., Kasak P. Prostate-specific antigen glycoprofiling as diagnostic and prognostic biomarker of prostate cancer. Interface Focus. 2019; 9 (2): 20180077. DOI: 10.1098/rsfs.2018.0077.
- Hoogland A.M., Kweldam C.F., van Leenders G.J. Prognostic histopathological and molecular markers on prostate cancer needle-biopsies: a review. Biomed. Res. Int. 2014; 2014: 341324. DOI: 10.1155/2014/341324.
- Miyake H., Muramaki M., Kurahashi T., Takenaka A., Fujisawa M. Expression of potential molecular markers in prostate cancer: correlation with clinicopathological outcomes in patients undergoing radical prostatectomy. Urol. Oncol. 2010; 28 (2): 145-151. DOI: 10.1016/j.urolonc.2008.08.001.
- Fiano V., Zugna D., Grasso C., Trevisan M., Delsedime L., Molinaro L., Gillio-Tos A., Merletti F., Richi-ardi L. LINE-1 methylation status in prostate cancer and non-neoplastic tissue adjacent to tumor in association with mortality. Epigenetics. 2017; 12 (1): 11-18. DOI: 10.1080/15592294.2016.1261786.
- Skorodumova L.O., Babalyan K.A., SultanovR., VasilievA.O., GovorovA.V., Pushkar D.Y., Sharova E.I. The methylation status of GSTP1, APC, and RASSF1 genes in human prostate cancer samples: Comparative analysis of diagnostic informativeness of MS-HRM and hybridization on the Illumina Infinium Hu-manMethylation450 BeadChip. Biochemistry (Moscow), Supplement Series B: Biomedical Chemistry. 2017; 11 (2): 194-201.
- Cui J., Li G., Yin J., Li L., Tan Y., Wei H., Liu B., Deng L., Tang J., Chen Y., Yi L. GSTP1 and cancer: Expression, methylation, polymorphisms and signaling (Review). Int. J. Oncol. 2020; 56 (4): 867-878. DOI: 10.3892/ijo.2020.4979.
- Patel P.G., Wessel T., Kawashima A., Okello J.B.A., Jamaspishvili T., Guerard K.P., Lee L., Lee A.Y., How N.E., Dion D., Scarlata E., Jackson C.L., Boursalie S., Sack T., Dunn R., Moussa M. A three-gene DNA methylation biomarker accurately classifies early stage prostate cancer. Prostate. 2019; 79 (14): 1705-1714. DOI: 10.1002/pros.23895.
- Kaminska K., Biaikowska A., Kowalewski J., Huang S., LewandowskaM.A. Differential gene methylation patterns in cancerous and non-cancerous cells. Oncol. Rep. 2019; 42 (1): 43-54. DOI: 10.3892/or.2019.7159.
- ГригорьеваМ.В., Михайленко Д.С., ЕфремовГ.Д., СивковА.В. Диагностическая значимость PCA3 в моче, в зависимости от уровня сывороточного ПСА у обследуемых пациентов. Вестник современных исследований. 2017; 12-1: 25-26.
- Nakai Y., Anai S., Kuwada M., Miyake M., Chihara Y., Tanaka N., Hirayama A., Yoshida K., Hirao Y., Fujimoto K. Photodynamic diagnosis of shed prostate cancer cells in voided urine treated with 5-ami-nolevulinic acid. BMC Urol. 2014; 14: 59. DOI: 10.1186/1471-2490-14-59.
- Malpeli G., Innamorati G., Decimo I., Bencivenga M., Nwabo Kamdje A.H., Perris R., Bassi C. Methylation Dynamics of RASSF1A and Its Impact on Cancer. Cancers (Basel). 2019; 11 (7): 959. DOI: 10.3390/cancers11070959.
- Li M., Wang C., Yu B., Zhang X., Shi F., Liu X. Diagnostic value of RASSF1A methylation for breast cancer: a meta-analysis. Biosci Rep. 2019; 39 (6): BSR20190923. DOI: 10.1042/BSR20190923.
- Litovkin K., Van Eynde A., Joniau S., Lerut E., Laenen A., Gevaert T., Gevaert O., Spahn M., Kneitz B., Gramme P., Helleputte T., Isebaert S., Haustermans K., Bollen M. DNA Methylation-Guided Prediction of Clinical Failure in High-Risk Prostate Cancer. PLoS One. 2015; 10 (6): e0130651. DOI: 10.1371/journal.pone.0130651.
- Li D., Xu Z., Liu J., PuX., Luo Y., ZhengX. Restriction landmark genomic scanning for screening aberrant CpG methylations in prostate cancer. Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. 2016; 36 (1): 103-108.
- Сивков А.В., Кешишев Н.Г., Меринова О.В., Северин С.Е., Савватеева М.В., Кузнецова Е.М., Ка-прин А.Д., Сивков А.В. Маркеры GSTnl, RARB2 и RASSF1A в диагностике рака предстательной железы: результаты исследования. Экспериментальная и клиническая урология. 2016; 4: 38-43.
- Bakavicius A., Daniunaite K., Zukauskaite K., Barisiene M., Jarmalaite S., Jankevicius F. Urinary DNA methylation biomarkers for prediction of prostate cancer upgrading and upstaging. Clinical Epigenetics. 2019; 11 (1): 1-10. DOI: 10.1186/s13148-019-0716-z.
