Экспериментальное исследование подострой токсичности препарата LP на крысах

В статье представлены результаты изучения подострой токсичности комплексного антимикробного препарата LP, разработанного в форме пенного аэрозоля для лечения гнойно-воспалительных заболеваний половых органов сельскохозяйственных животных.

Практически каждое химиотерапевтическое средство оказывает позитивное или негативное влияние на органы и ткани организма. Поэтому при разработке новых лекарств, предназначенных для лечения гнойновоспалительных заболеваний половых органов сельскохозяйственных животных, главное внимание должно уделяться не только их эффективности, но и проблеме безопасности (1). В фармако-токсикологических исследованиях изучение подострой токсичности является важным разделом, от которого зависит целесообразность проведения дальнейших исследований препарата и его использования в ветеринарном акушерстве. С целью выявления избирательного влияния лекарственного средства при его длительном введении на функциональное состояние отдельных органов, тканей и систем, а также для оценки степени обратимости вызываемых им повреждений, проводят изучение подострой токсичности (5).

Материалы и методы исследований. Опыты проводили на 64 самках белых крыс с массой тела 170-200 г, которые были разделены по принципу парных аналогов на 4 группы. Подопытным животным препарат LP вводили подкожно в течение 21 дня в следующих дозах: первой группе - 758,9 мг/кг, второй - 1897,2 мг/кг и третьей - 3794,5 мг/кг массы тела. Животные четвертой группы служили контролем, им подкожно вводили стерильное растительное масло.

Общетоксическое действие препарата оценивали по динамике массы тела животных при взвешивании 1 раз в неделю. По 8 грызунов из каждой группы подвергали эвтаназии по окончании курса инъекций и через 10 дней восстановительного периода (после отмены препарата). Учитывали относительную массу внутренних органов (печени, почек, сердца, легких, тимуса, надпочечников, селезенки), проводили гематологический и биохимический анализ крови (3, 4).

Клеточный состав периферической крови определяли, используя стандартные методики подсчета клеток в камере Горяева (2). Фракции белка определяли электрофорезом в агарозном геле, концентрацию общего белка, гемоглобина, липидов и триглицеридов наборами фирмы «Витал», глюкозу, холестерол, креатинин, мочевину, кальций, фосфор, активность аспартатаминотрасферазы, аланинаминотрасферазы, щелочной фосфатазы и γ-глутамилтрансферазы - на биохимическом анализаторе «Hitachi-902», молочную кислоту (лактат) по реакции с параоксидифенилом и пировиноградную кислоту (пируват) по модифицированному методу Фреедмана и Хаугена.

Результаты исследований. В результате проведенных исследований установлено, что многократное подкожное введение препарата LP во всех испытанных дозах не вызывает существенных изменений в клиническом состоянии подопытных крыс, как в период применения препарата, так и в течение 10 дней восстановительного периода. Гибели животных в ходе опыта не было.

Существенной разницы в привесах крыс первой и второй опытных групп (дозы 758,9 и 1897,2 мг/кг) по сравнению с контролем в течение опыта не было отмечено. В третьей группе (доза 3794,5 мг/кг) наблюдалось снижение привесов животных по сравнению с крысами контрольной группы в первую неделю опыта в среднем в 2,9 раза, во вторую – в 3,6 раза. В последнюю неделю введения препарата привесы крыс опытных и контрольных групп практически сравнялись, а через 10 дней восстановительного периода привесы у крыс опытных групп были выше контроля в 1,3-1,5 раза.

Препарат LP при введении подкожно в дозах 758,9, 1897,2 и 3794,5 мг/кг массы тела в течение 21 дня не оказывал существенного влияния на относительную массу практически всех внутренних органов крыс, кроме почек. Было отмечено увеличение относительной массы почек у животных, которым вводили LP в дозе 1897,2 мг/кг массы тела на 13,0% (P<0,05), а 3794,5 мг/кг массы тела - на 14,4% (P<0,05). Однако изменения носили обратимый характер, так как через 10 дней восстановительного периода относительные массы внутренних органов у животных всех опытных групп не отличались от контроля.

При длительном применении препарата LP у крыс второй и третьей опытных групп были выявлены изменения некоторых показателей крови.

Так, отмечено увеличение количества лейкоцитов на 18,6% и 44,0% (P<0,01) соответственно, в основном за счет повышения палочкоядерных нейтрофилов в 1,8 раза, при снижении лимфоцитов на 16,9% (P<0,05) и 16,1% (P<0,05) соответственно. При этом наблюдалось уменьшение уровня гемоглобина на 5,2% (P<0,05) и на 5,8% (P<0,05) соответственно. Тем не менее, колебания значений данных показателей находились в пределах физиологической нормы для данного вида животных и через 10 дней восстановительного периода не отличались от контроля.

Также у всех подопытных крыс было отмечено увеличение концентрации глюкозы на 13,7-19,3% (P<0,05). В первой группе было отмечено увеличение уровня лактата на 9,1% (P<0,05), во второй пирувата - на 16,3% (P<0,005), а в третьей лактата - на 8,8% (P<0,05) и пирувата - на 16,3% (P<0,05). Кроме того, у крыс третьей группы регистрировали увеличение содержания мочевины на 33,7% (P<0,005) и активности аспартатаминотрасферазы на 12,3% (P<0,05). Остальные гематологические и биохимические показатели крови подопытных животных не отличались от группы контроля. Все вышеперечисленные изменения свидетельствуют о возросшей нагрузке на почки и печень крыс (6). Однако при исследовании крови животных через 10 дней восстановительного периода не отмечено достоверных изменений в биохимических показателях подопытных крыс по сравнению с контрольной группой, что свидетельствует об обратимости вызванных изменений.

Выводы. Таким образом, на основании результатов проведенных исследований можно сделать вывод, что изучаемый нами комплексный антимикробный препарат LP при подкожном введении в течение длительного времени отрицательно не влияет на общее состояние животных. Анализируя изменения привесов и относительной массы внутренних органов, а также морфологических и биохимических показателей крови белых крыс по сравнению с контролем, можно сделать вывод, что при длительном подкожном применении препарат LP в изученных дозах (758,9, 1897,2 и 3794,5 мг/кг массы тела) вызывал дозозависимые изменения, которые были в пределах нормы для данного вида животных и в то же время носили обратимый характер. Следовательно, препарат LP можно рекомендовать для клинических испытаний на сельскохозяйственных животных.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Козлов, С.Н. Современная антимикробная химиотерапия: Руководство для врачей / С.Н. Козлов, Л.С. Страчунский. – М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2009. – 448 с. 2. Кондрахин, И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: Справочник / Под ред. И.П. Кондрахина. – М.: КолосС, 2004. – 520 с.: ил. 3. Ноздрачев, А.Д. Анатомия крысы (Лабораторные животные) / А.Д. Ноздрачев, Е.Л. Поляков; Под ред. Академика А.Д. Ноздрачева. – СПб.: Издательство «Лань», 2001. – 464 с., ил. 4. Трахтенберг, И.М.

Проблема нормы в токсикологии (современные представления и методические подходы, основные параметры и константы) / И.М. Трахтенберг, Р.Е. Сова, В.О. Шефтель, Оникиенко Ф.А.; Под ред. И.М. Трахтенберга. – М.: Медицина, 1991. – 208 с. 5. Хабриев, Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией члена-корреспондента РАМН, профессора Р.У. Хабриева. – 2-изд., перераб. и доп. – М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. – 832 с.: ил. 6. Kandeel M., Abdelaziz I., Elhabashy N., Hegazy H., Tolba Y. Nephrotoxicity and oxidative stress of single large dose or two divided doses of gentamicin in rats // Pak. J. Biol. Sci. – 2011. - Jun 1; 14(11):627-33.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПОДОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ ПРЕПАРАТА LP НА КРЫСАХ

Ческидова Л.В.

Резюме

Комплексный антимикробный препарат LP при подкожном введении в течение 21 дня в дозах 758,9, 1897,2 и 3794,5 мг/кг массы тела отрицательно не влияет на организм белых крыс. Изменения привесов и относительной массы внутренних органов, а также гематологические и биохимические показатели крови подопытных животных по сравнению с группой контроля были в пределах нормы, а установленные изменения носили обратимый характер, так, через 10 дней восстановительного периода отличия между подопытными и контрольными крысами отсутствуют. Таким образом, препарат LP можно рекомендовать для дальнейших испытаний на сельскохозяйственных животных.

EXPERIMENTAL RESEARCH OF SUBACUTE TOXICITY OF THE PREPARATION LP IN RATS

Cheskidova L.V.