Экстракт из листьев Astilbe rubra: фитохимический состав и влияние на активность пищеварительных ферментов in vitro

Резюме: Astilbe rubra Hook. f. & Thomson - это многолетнее травянистое растение семейства Saxifragaceae . Его ареал расположен на территории восточной Азии. В России естественные популяции произрастают на юге Дальнего Востока. A. rubra представляет интерес не только как декоративное растение, но и как лекарственное, пищевое и медоносное. В странах восточной Азии корневище используется как традиционное средство при различных заболеваниях, а листья и стебли в пищевых целях. Однако их фитохимический состав и биологическая активность изучены недостаточно. Ранее был показан ингибирующий потенциал водного и метанольного экстрактов A. rubra в отношении a-амилазы и липазы, который позволяет предположить комплексное воздействие на ключевые ферменты, дисфункционирующие при ряде метаболических нарушений у человека, ассоциированных с ожирением и диабетом. В настоящей работе впервые установлен подробный состав фенольных соединений, содержащихся в листьях A. rubra . Выявлено присутствие не только флавоноидов, но и фенольных кислот и проантоцианидинов типа А и B. Получены новые данные о содержании фенольных соединений и о воздействии экстракта на α-амилазу и липазу. Нашей целью было изучение состава и содержания фенольных соединений в экстракте из листьев Astilbe rubra , а также его действия на пищеварительные ферменты - липазу и α-амилазу, полученные из поджелудочной железы свиньи. Растения A. rubra были интродуцированы и произрастали на территории Ботанического сада лекарственных растений ФГБНУ ВИЛАР. Отбор образцов листьев проводили в период массового цветения растений (I декада июля) в 2023 году. Собранные листья замораживали и лиофильно высушивали. Проводили 3-кратную экстракцию 80 % ацетоном. Для изучения состава фенольных соединений использовали ультра-эффективную жидкостную хроматографическую систему (УЭЖХ, Acquity UPLC® 2.9.0, «Waters Corporation», США), которая включала фотодиодный детектор (190-500 нм) и тройной квадрупольный масс-спектрометр Xevo TQ («Waters Corporation», США) (УЭЖХ-ДД-МС). Полученные МС-данные анализировали с применением программы DataAnalysis 4.0 («Bruker Daltonik GmbH», Германия). Идентификацию фенольных соединений проводили с учетом анализа УФ- и МС-спектров, сравнивая полученные результаты с опубликованными данными. Общее содержание фенольных соединений определяли методом Фолина-Чокальтеу, содержание флавоноидов - методом, основанным на реакции комплексообразования флавоноидов с хлоридом алюминия. Влияние метаболитов экстракта из листьев A. rubra на активность a-амилазы, выделенной из поджелудочной железы свиньи («Nordmark Pharma GmbH», Германия), измеряли прямым колориметрическим методом. Активность липазы, выделенной из поджелудочной железы свиньи («Nordmark Pharma GmbH», Германия), оценивали прямым колориметрическим методом на основе модифицированного протокола, разработанного ранее. В результате проведенного анализа в экстракте из листьев A. rubra были идентифицированы 27 фенольных соединений: 10 олигомеров процианидина типа А и B со степенью полимеризации до 4, 12 флавоноидов (производные кверцетина, кемпферола и хризоэриола, катехин и эпикатехин) и 5 фенольных кислот (изомеры кофеоилтреоновой и кофеоилхинной кислот, кумароилхинная кислота). Общее содержание фенольных соединений составило 276,8±9,2 мг-экв. галловой кислоты/г сухой массы, флавоноидов - 46,7±6,08 мг-экв. кверцетина/г сухой массы. Исследованный экстракт не обладал ингибирующим эффектом в отношении амилазы, но умерено ингибировал активность панкреатической липазы. Полученные результаты расширяют знания в области биологически активных веществ из листьев A. rubra и их применения, показывая потенциальную возможность использования не только корневищ, но и листьев.