Эндогенный потенциал тромбина и тромбоцитопения у детей с кровотечением

Венозную кровь стабилизировали 3,8 %-ным раствором цитрата натрия в соотношении 9:1. Стабилизированную цитратную кровь при температуре 20–22оС центрифугировали минут 200g, после чего тромбоцитарную плазму переносили в пластиковую посуду. Подсчет тромбоцитов в периферической крови для каждого образца осуществляли на гематологическом анализаторе XN-3000 (производства SysmexGmbH, Japan) импедансным методом, используя оригинальные реагенты (SysmexGmbH). Эндогенный потенциал тромбина (ЭПТ)в тромбоцитарной плазме пациентов определяли методом Hemker на флюороскане Fluoroskanascent производства ThermoElectronсorporation (Maastricht, Netherlands), с использованием наборов реагентов фирмы ThrombinoscopeBV. На 96 луночном планшете ThrombinoscopeBV (Maastricht,

Netherlands) в каждые 4 лунки вносили по 80 мкл исследуемой тромбоцитарной плазмы. В первые 2 лунки добавляли 20 мкл реагента РRР (кат № TS42.00) содержащего смесь 0, рМ раствора тканевого фактора и фосфолипидов. Во вторые 2 лунки добавляли калибратор тромбина (кат № TS20.00). Реакцию инициировали после автоматического добавления на борту Fluoroskanascent 20 мкл смеси 2, мМ флуо-субстрата в 0,1 М растворе кальция хлорида (Набор FluCa, кат № TS 0.00). Все манипуляции выполняли в соответствии с инструкцией к наборам реагентов и инструкцией по работе на Fluoroskanascent. Исследование свертывания включало: регистрацию турбидиметрическим методом хронометрических показателей и содержания плазменного фибриногена методом Сlaus автоматическим коагулометром ACL-9000 фирмы Instrumentation Laboratory (IL) с использованием оригинальных диагностических наборов фирмы IL.

Результаты исследования . Показатели свертывания крови у пациентов с кровотечением отличались от соответствующих значений контроля. У пациентов с кровотечением, несмотря на гипокоагуляционную направленность изменений, по сравнению с контролем, показатели плазменного звена свертывания не могли быть самостоятельной причиной кровотечения. Среди обследованных пациентов выявлена тесная корреляционная (коэффициент корреляции Cпирмена — R) зависимость между увеличением R(АПТВ) до 1,1 (0,8 –1,6) (R = 0,44; p = 0,001), тромбоцитопенией 28,0 (11,0– 2,0)·10⁹/л (R = –0,49; p = 0,0001), снижением эндогенного потенциала тромбина тромбоцитарной плазмы до 133,0 (22,0–424,0) нМ/л·мин (R = –0,78; p = 0,000001), с одной стороны, и фактом кровотечения с другой стороны.У пациентов с кровотечением медиана содержания тромбоцитов в периферической крови составила 28,0·10⁹/л, максимальное значение доверительного интервала (0,9 ДИ) — 37·10⁹/л, а максимум достигал

·109/л.У пациентов с кровотечением медиана ЭПТ тромбоцитарной плазмы составила 133,0

2-я научно-практическая онлайн-конференция с международным участием

«АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ПАТОЛОГИИ ГЕМОСТАЗА»

Санкт-Петербург

11 декабря 2020 г.

нМ/л∙мин,а максимальное значение доверительного интервала (0,9 ДИ) достигало 2 0,0 нМ/л∙мин. Между содержанием тромбоцитов (Тр 109/л) периферической крови и ЭПТ тромбоцитарной плазмы выявлена зависимость, которую отражает уравнение регрессии:у = 19,4411 + (0,0447∙x)+(2,918 ∙10– )∙x2(1), где у — содержание тромбоцитов периферической крови (109/л), а х — ЭПТ нМ/л∙мин. Зная минимальное пороговое значение ЭПТ, обеспечивающее гемостаз 2 0 нМ/л∙мин можно рассчитать необходимое минимальное содер- жание тромбоцитов в крови пациентов с ССВО. Например, минимальное содержание тромбоцитов в крови (у), обеспечивающее защиту от кровотечения составит: y = 19,4411 + (0,0447∙ 2 0) +0,000002918 ∙ 2 02 = 32,44∙109/л.

Выводы. В случае наличия признаков ССВО во время химиотерапии для защиты от кровотечения трансфузию тромбоцитов следует предусмотреть при снижении содержания тромбоцитов в крови менее 30∙10⁹/л, а в случае тромбоза отменить гепарин.