Энтеробиоценоз поросят с симптомокомплексом диареи
Автор: Лоренгель Т.И., Шабанова Е.О.
Журнал: Вестник Омского государственного аграрного университета @vestnik-omgau
Рубрика: Ветеринария и зоотехния
Статья в выпуске: 2 (46), 2022 года.
Бесплатный доступ
Цель исследований - изучение энтеробиоценоза желудочно-кишечного тракта поросят с симптомокомплексом диареи и определение чувствительности выделенной микрофлоры к антибактериальным препаратам. Объектом исследования являлись поросята (возраст от рождения до двух месяцев) крупной белой породы и ландрас с диарейным симптомокомплексом. Материалом для исследований служили пробы фекалий, полученные стерильным тупфером из прямой кишки. Исследования проводились общепринятыми микробиологическими методами. В результате установлено, что ведущая роль в энтеробиоценозе желудочно-кишечного тракта поросят с диарейным симптомокомплексом принадлежит энтеробактериям. Микробные ассоциации микроорганизмов выделены из 38 проб (76%) фекалий, полученных от больных поросят. Среди выделенных культур преобладали Escherichia coli (О26, О8, О33) и Proteus vulgaris как в монокультуре, так и в различных сочетаниях с другими условно-патогенными микроорганизмами. Ассоциации микроорганизмов были представлены: Escherichia coli + Proteus vulgaris (28,9%), Escherichia coli + Enterobacter aerogenes (23,7%), Escherichia coli + Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis + Enterococcus fecalis и Klebsiella pneumoniae + Citrobacter freundii (10,5% каждая) и Escherichia coli + Enterococcus fecalis (7,9%). Реже изолировали сочетания, представленные тремя видами условно-патогенных микроорганизмов: Proteus mirabilis + Klebsiella pneumonia + Citrobacter freundii и Escherichia coli + Proteus vulgaris + Enterococcus fecalis 5,3% и 2,6% соответственно. В монокультуре преобладала Escherichia coli среди других видов микроорганизмов, частота ее выделения - 41,7%. Кроме кишечной палочки, в монокультуре изолировали Proteus vulgaris (25%), Klebsiella pneumoniae (25%) и Citrobacter freundii (8,3%). Большинство изолированных микроорганизмов проявили высокую чувствительность к антибактериальным препаратам из групп цефалоспоринов и фторхинолонов.
Энтеробиоценоз, желудочно-кишечный тракт, поросята, симптомокомплекс диареи
Короткий адрес: https://sciup.org/142234729
IDR: 142234729 | DOI: 10.48136/2222-0364_2022_2_115
Текст научной статьи Энтеробиоценоз поросят с симптомокомплексом диареи
Массовые желудочно-кишечные заболевания поросят, проявляющиеся диарей-ным симптомокомплексом, – значительная проблема, причиняющая большой экономический ущерб крупным промышленным свиноводческим комплексам. Основная гибель поросят приходится на первые две-три недели жизни и 15–20 дней после отъема [1]. Смертность молодняка от заболеваний, проявляющихся диареей, варьирует от 41,3 до 81,9% [2]. От условий кормления и содержания животных зависит возникновение кишечных патологий, особую роль играют молозивный период и состояние здоровья свиноматки, а также воздействие патогенных агентов, циркулирующих в популяции животных [3].
Этиологическая структура возбудителей желудочно-кишечных болезней поросят представлена условно-патогенными микроорганизмами, все чаще встречающимися в виде различных и весьма разнообразных ассоциаций. Повышение роли условнопатогенной микрофлоры обусловлено влиянием различных факторов, в результате она приобретает агрессивность и способность, проникая в организм животного, вызывать патологические изменения в органах и тканях [4; 5]. Наиболее частые сочлены энтеробиоценоза – представители энтеробактерий, энтерококков и стафилококков [6]. Они широко распространены в окружающей среде и представляют нормофлору тела животного [7].
Сложная этиологическая структура желудочно-кишечных болезней поросят с симптомокомплексом диареи, быстрое распространение и массовый характер затрудняют раннюю диагностику этой патологии [8; 9]. Для обеспечения высокого лечебного эффекта и предотвращения циркуляции в свиноводческих хозяйствах антибиотикорезистентных штаммов микроорганизмов необходимо не только своевременное выделение возбудителя и подтверждение его патогенности, но и установление спектра чувствительности к антибактериальным препаратам [10].
В связи с вышеизложенным цель исследования – изучение энтеробиоценоза желудочно-кишечного тракта поросят с симптомокомплексом диареи и определение чувствительности выделенной микрофлоры к антибактериальным препаратам.
Материалы и методы
Объектом исследования являлись поросята (n = 50) в возрасте от рождения до двух месяцев крупной белой породы и ландрас с диарейным симптомокомплексом. Материалом для исследований служили пробы фекалий, полученные стерильным тупфе-ром из прямой кишки. Пробы помещали в транспортную среду и в сумке-холодильнике доставляли в лабораторию.
Выделение и идентификацию изолированных культур микроорганизмов проводили в соответствии с методическими указаниями: «Выделение и идентификация бактерий желудочно-кишечного тракта животных» (Минсельхоз России № 13-5-02/1043 2004 г.); «Методические указания по бактериологической диагностике смешанной кишечной инфекции молодняка животных, вызываемой патогенными энтеробактериями», (Минсельхозпрод России № 13-7-2/1759, 1999 г.) и «Методические указания по бактериологической диагностике колибактериоза (эшерихиоза) животных» (Минсельхоз России № 13-7-2/2117, 2000 г.).
Vestnik of Omsk SAU, 2022, no. 2(46) VETERINARY AND ZOOTECHNY
Серотипировали выделенные культуры E. coli согласно «Наставлению по применению агглютинирующих О-коли-сывороток» (1980 г.).
Патогенность выделенных культур микроорганизмов определяли при посеве на кровяной агар и постановке биопробы на лабораторных животных, которым внутрибрюшинно вводили 0,5 мл бактериальной суспензии в концентрации 0,5×109 м.т./мл. Культуру считали патогенной при гибели двух и более лабораторных животных в течение трех суток после заражения. Контрольным животным вводили 0,5 мл стерильного 0,9%-ного физиологического раствора, срок наблюдения – 5 сут.
Определение чувствительности выделенных микроорганизмов к химиотерапевтическим препаратам проводили диско-диффузионным методом с использованием агара Гивенталя-Ведьминой (АГВ) и стандартных бумажных дисков, пропитанных антимикробными препаратами, руководствуясь клиническими рекомендациями по определению чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам (Москва, 2015) и в соответствии с МУК 4.2.1890-04 «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам».
Результаты исследований
У поросят с симптомокомплексом диареи клинические признаки варьировали. У большинства больных животных (82%) температура была в пределах физиологической нормы (38,5–39,5°С). Отмечали усиление перистальтики кишечника, сопровождалось это частой дефекацией, фекалии были желтого или желтовато-белого цвета, жидкой консистенции с пузырьками газа или без них. У некоторых поросят (18%) регистрировали более тяжелое течение: угнетение, отказ от корма, повышение температуры (40,5– 41°С); фекалии желтого цвета, пенистые, с комочками свернувшегося молока.
В результате проведенных бактериологических исследований установлено: ассоциации микроорганизмов, представленные двумя, тремя видами, превалируют над монокультурой. Микробные ассоциации выделены из 38 проб (76%) фекалий, полученных от больных поросят. Всего выделено восемь разных сочетаний микроорганизмов. Так, ассоциация микроорганизмов Escherichia coli + Proteus vulgaris изолирована из 11 проб фекалий (28,9%), Escherichia coli + Enterobacter aerogenes – из 9 (23,7%), такие ассоциации, как Escherichia coli + Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis + Enterococcus fecalis и Klebsiella pneumoniae + Citrobacter freundii, выделены из четырех проб каждая (10,5%) и Escherichia coli + Enterococcus fecalis – из трех (7,9%). Реже всего изолировали сочетания, представленные тремя видами условно-патогенных микроорганизмов: Proteus mirabilis + Klebsiella pneumonia + Citrobacter freundii и Escherichia coli + Proteus vulgaris + Enterococcus fecalis 5,3% и 2,6% соответственно (табл. 1).
Таблица 1
Ассоциации микроорганизмов, выделенные из фекалий поросят с симптомокомплексом диареи
№ п/п |
Ассоциация микроорганизмов |
Количество изолированных ассоциаций микроорганизмов |
Частота выделения, % |
1 |
Escherichia coli + Proteus vulgaris |
11 |
28,9 |
2 |
Escherichia coli + Enterobacter aerogenes |
9 |
23,7 |
3 |
Escherichia coli + Klebsiella pneumoniae |
4 |
10,5 |
4 |
Proteus mirabilis + Enterococcus fecalis |
4 |
10,5 |
5 |
Klebsiella pneumoniae + Citrobacter freundii |
4 |
10,5 |
6 |
Escherichia coli + Enterococcus fecalis |
3 |
7,9 |
7 |
Proteus mirabilis + Klebsiella pneumonia + Citrobacter freundii |
2 |
5,3 |
8 |
Escherichia coli + Proteus vulgaris + Enterococcus fecalis |
1 |
2,6 |
Vestnik of Omsk SAU, 2022, no. 2(46)
VETERINARY AND ZOOTECHNY
В монокультуре преобладала Escherichia coli среди других видов микроорганизмов, частота ее выделения – 41,7%. Кроме кишечной палочки, основные этиологические факторы диареи у поросят – Proteus vulgaris (25%), Klebsiella pneumoniae (25%) и Citrobacter freundii (8,3%) (табл. 2).
Таблица 2
Микроорганизмы, выделенные из фекалий поросят с симптомокомплексом диареи, в монокультуре
№ п/п |
Микроорганизмы |
Количество изолированных микроорганизмов |
Частота выделения, % |
1 |
Escherichia coli |
5 |
41,7 |
2 |
Proteus vulgaris |
3 |
25 |
3 |
Klebsiella pneumoniae |
3 |
25 |
4 |
Citrobacter freundii |
1 |
8,3 |
Анализируя полученные данные можно сделать вывод: в энтеробиоценозе желудочно-кишечного тракта поросят с симптомокомплексом диареи ведущая роль принадлежит кишечной палочке и протею как в монокультуре, так и в ассоциации с другими условно-патогенными микроорганизмами. В большинстве случаев от поросят выделяли ассоциации микроорганизмов, представленные двумя видами; три ассоциации включали по три вида микроорганизмов. Такие микроорганизмы, как Enterobacter aerogenes, Enterococcus fecalis и Proteus mirabilis, выделены у поросят реже остальных и только в виде ассоциаций с другими энтеробактериями (табл. 3).
Таблица 3
Энтеробиоценоз желудочно-кишечного тракта поросят с симптомокомплексом диареи
Вид микроорганизма |
Кол-во выделенных культур |
Частота выделения, % |
Всего микроорганизмов |
|||
в монокультуре |
в ассоциации |
|||||
кол-во |
% |
кол-во |
% |
|||
Escherichia coli |
33 |
36,3 |
5 |
15,1 |
28 |
84,9 |
Proteus vulgaris |
15 |
16,5 |
3 |
20,0 |
12 |
80,0 |
Klebsiella pneumoniae |
13 |
14,3 |
3 |
23,0 |
10 |
67,0 |
Enterobacter aerogenes |
9 |
9,9 |
– |
– |
9 |
100,0 |
Enterococcus fecalis |
8 |
8,8 |
– |
– |
8 |
100,0 |
Citrobacter freundii |
7 |
7,7 |
1 |
14,3 |
6 |
85,7 |
Proteus mirabilis |
6 |
6,5 |
– |
– |
6 |
100,0 |
Всего |
91 |
– |
12 |
– |
79 |
Энтеропатогенные культуры кишечной палочки серотипированы и по своей антигенной структуре представлены серовариантами: О26 (15 культур), О8 (11 культур) и О33 (7 культур).
Для изучения патогенных свойств отобраны семь культур микроорганизмов: Escherichia coli, Proteus vulgaris, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter aerogenes, Enterococcus fecalis, Citrobacter freundii и Proteus mirabilis.
При патолого-анатомическом вскрытии трупов мышей, зараженных культурой E. coli, обнаружены кровоизлияния в подкожной клетчатке и кишечнике, увеличение печени и селезенки, острое расширение сердца, абсцессы в месте введения суспензии и в паренхиматозных органах.
У погибших лабораторных мышей, зараженных Proteus vulgaris и Proteus mirabilis, отмечены кровоизлияния в подкожной клетчатке и кишечнике, наличие крови в брюшной полости, увеличение селезенки, единичные абсцессы в кишечнике и почках.
Vestnik of Omsk SAU, 2022, no. 2(46) VETERINARY AND ZOOTECHNY
При вскрытии трупов мышей, зараженных культурой Klebsiella pneumoniae, в печени, легких и кишечнике обнаружены единичные абсцессы. Также отмечены расширение сердца, увеличение селезенки и дистрофия печени.
У мышей, зараженных Enterobacter aerogenes, при вскрытии выявлены кровоизлияния в подкожной клетчатке и под эпикардом, абсцессы в стенке кишечника, печени, в легких и селезенке.
При патолого-анатомическом вскрытии трупов мышей, зараженных культурой Enterococcus fecalis, обнаружены серозный перитонит, дистрофия печени, увеличение селезенки и почек.
У лабораторных животных, зараженных Citrobacter freundii, регистрировали кровоизлияния в кишечнике в месте введения суспензии, в стенке кишечника и печени – абсцессы.
Все изолированные культуры Escherichia coli, Enterobacter aerogenes и Klebsiella pneumoniae при посеве на кровяной агар вызывали гемолиз эритроцитов. Proteus vulgaris и Citrobacter freundii, выделенные в монокультуре, также обладали гемолитической активностью.
Определяли чувствительность изолированных микроорганизмов к антибактериальным препаратам, принадлежащим восьми различным фармакологическим группам: цефалоспорины (цефазолин), фторхинолоны (энрофлоксацин), нитрофураны (фуразо-лидон), аминогликозиды (стрептомицин), тетрациклины (доксициклин), сульфаниламиды (сульфадимезин), макролиды (тилозин) и препараты пенициллинового ряда (амоксициллин).
В результате проведенных исследований установлено: большинство (98,9%) выделенных культур энтеробактерий чувствительны к энрофлоксацину и цефазолину. Высокую активность показали и препараты пенициллинового ряда (амоксициллин) и нитрофураны (фуразолидон), чувствительность изолированных культур микроорганизмов к ним составила 72,4% и 78,2% соответственно.
Все изоляты (100%) Proteus vulgaris и Proteus mirabilis проявили устойчивость к тилозину, большинство выделенных энтерококков (69,9%) резистентны к тетрациклину, а Citrobacter freundii – к стрептомицину (71%). Также выявлена высокая устойчивость (80%) у большинства представителей семейства Enterobacteriacea к сульфадимезину.
Заключение
По проведенным исследованииям установлена ведущая роль энтеробактерий в энтеробиоценозе желудочно-кишечного тракта поросят с диарейным симптомокомплек-сом. Среди выделенных культур микроорганизмов преобладают Escherichia coli (О26, О8, О33) и Proteus vulgaris, как в монокультуре, так и в различных сочетаниях с другими условно-патогенными микроорганизмами. Кроме того, микробные ассоциации превалируют над монокультурами. Большинство изолированных микроорганизмов проявляли высокую чувствительность к антибактериальным препаратам из групп цефалоспоринов и фторхинолонов.
Список литературы Энтеробиоценоз поросят с симптомокомплексом диареи
- Субботин В.В. Желудочно-кишечные болезни поросят с симптомокомплексом диареи: причины, профилактика и терапия // Ветеринария и кормление. 2005. № 3. С. 12-13.
- Савельева Л.Н., Куделко А.А., Бондарчук М.Л. К вопросу о желудочно-кишечных расстройствах у поросят и ущербе, наносимом свиноводству Забайкальского края // Международный научно-исследовательский журнал. 2016. № 11-2(53). С. 161-165.
- Дансарунова О.С. Роль микрофлоры желудочно-кишечного тракта животных в возникновении эндогенных бактериальных инфекций и их коррекция : специальность 06.02.02 «Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» : дис. на соискание ученой степени канд. вет. наук / Дансарунова Ольга Сергеевна ; Бурятская государственная сельскохозяйственная академия. Улан-Удэ. 2017. 175 с.
- Плешакова В.И., Налепова М.Ю. Микрофлора желудочно-кишечного тракта свиней в норме и с клиническими признаками диареи // Свинина : материалы Всерос. науч.-практ. конф. и XIII Межвузовского координац. совета. Пос. Персиановский: Донской ГАУ. 2004. С. 137-140.
- Денисов А.В., Степанов А.А. Этиологические особенности желудочно-кишечных болезней молодняка свиней в условиях промышленного комплекса // Инновации в АПК: проблемы и перспективы. 2016. № 1(9). С. 92-96.
- Zholdasbekova A.Y., Biyashev K.V., Biyashev B.K Prevalence of enteric infection pathogens in young cattle in Kazakhstan // Modern science. 2018. С. 20-21.
- Сиплевич Т.Г., Плешакова В.И. Микрофлора желудочно-кишечного тракта поросят при применении кормовых добавок // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2017. № 2. С. 66-71.
- Шабанова Е.О., Лоренгель Т.И. Новые подходы к лечению и профилактике диарейного симптомокомплекса поросят // Актуальные проблемы ветеринарной науки и практики : материалы нац. науч.-практ. онлайн-конф. факультета ветеринарной медицины ИВМиБ ФГБОУ ВО Омский ГАУ. Омск. 2020. С. 106-109.
- Шабанова Е.О., Лоренгель Т.И., Плешакова В.И. Применение пробиотических препаратов «Фенерджик-про» и «Пиг протектор» для профилактики желудочно-кишечных болезней поросят // Пермский аграрный вестник. 2019. № 4(28). С. 146-152.
- Щепеткина С.В. Решение проблемы антибиотикорезистентности в условиях производства // Сельскохозяйственные вести. 2016. № 2. С. 55-57.