Эритроцитарные параметры крови крупного рогатого скота Якутии

За последние годы автоматические гематологические анализаторы широко используются в исследованиях крови животных [1,3]. По сравнению с мануальными методами автоматический подсчет является точным , высокопроизводительным и более стандартизированным [2, 4].

Одним из распространенных и наиболее востребованных методов автоматического подсчета , как для фундаментальных исследований , так и для клинической практики , является метод проточной цитометрии . На российском рынке расширилась приборная база , тем самым увеличились возможности анализа клеток крови , позволяющие охарактеризовать не только качественные и количественные параметры основных популяций клеток , но и их более широкий субпопуляционный состав . Используя различные методологические подходы и новую реагентную базу , при помощи проточной цитометрии стало возможным оценивать функциональные свойства популяций и субпопуляций клеток крови .

Цель работы - определить эритроцитарные параметры крови крупного рогатого скота холмогорской и симментальской пород , разводимых в условиях Якутии , в возрастной динамике , используя современные методы измерения .

Материалы и методы . Мы исследовали наиболее распространенные в Якутии симментальский и холмогорский породы крупного рогатого скота . Основной массив разводимого скота Якутии получен длительной адаптацией привозного скота - холмогорской породы с 1927 года и симментальской - с 1937 года . Симментальская порода районирована в заречных , вилюйских и северных группах улусов , а холмогорская - вблизи городов и густонаселенных приленских и некоторых промышленных северных улусах Республики .

Группы животных сформировали в количестве по 45 голов в каждой возрастной группе , а в возрастной группе старше 13- ти лет по 25 голов . Обследованием подбирали клинически здоровых животных в хозяйствах Амгинского , Верхоянского , Верхневилюйского , Вилюйского , Мегино - Кангаласского , Нюрбинского , Оймяконского , Сунтарского , Чурапчинского , Якутского улусов ( районов ).

Исследовали периферическую кровь крупного рогатого скота в количестве 680 проб по следующим параметрам : количество эритроцитов (RBS), гематокрит (HT), содержание гемоглобина (Hb), средний корпускулярный объем эритроцитов (MCV), среднее содержание гемоглобина в эритроците (MCH), средняя концентрация гемоглобина в эритроците (MCHC) и ширина распределения эритроцитов по объему (RDW).

Кровь для исследований отбирали до утреннего кормления из яремной вены в специальные контейнеры с распыленным консервантом ( ЭДТА ). Доставка проб осуществлялась в течение одних суток .

Измерения проводили автоматическим гематологическим анализатором Cobas Minos Stex ( проточный цитометр ). Производительность анализатора 80 анализов в 1 час , объем исследуемой пробы 12 мкл . Данный анализатор считает клетки путем пропускания их через апертуру малого размера ( микроотверстие ) и определения изменений импеданса ( сопротивления тока в цепи ), вызванных прохождением клетки . В измерительной камере по обе стороны от апертуры находятся электроды , через которые проходит постоянный электрический ток и в тот момент , когда клетка проходит через апертуру , сопротивление в электрической цепи резко возрастает . Пропуская через апертуру строго определенное количество клеток ( не менее 10⁴) и регистрируя амплитуду импульсов осуществляли подсчет количества клеток в 1 мкл крови и оценивали размер каждой клетки .

Доставленные пробы , тщательно перемешав , помещаем под иглу анализатора и нажатием ключа измерительного цикла производим измерения пробы крови . По окончании измерительного цикла анализатор выдает результаты виде протокола с распечаткой данных количества эритроцитов в млн / мкл , гематокрита в %, содержание гемоглобина в г / л , среднего корпускулярного объема эритроцитов в мкм ³, среднее содержание гемоглобина в эритроците в пикограммах , среднюю концентрацию гемоглобина в эритроците в г / л , а результаты эритроцитометрии оформляет в виде гистограммы ( рис .1). Гистограмма графически отражает частоту встречаемости эритроцитов разного объема .

Статистическая обработка полученных результатов проводилась с использованием стандартного пакета прикладной программы Office Excel 2007. Средние показатели получили выведением средних арифметических значений , а пределы колебаний - по стандартному отклонению .

Результаты и обсуждение . Показатели эритроцитов , гемоглобина и гематокрита выше у новорожденных животных (6,95 млн / мкл , 112,5 г / л и 36,1%) ( таблица 1), что объясняется так называемой плацентарной трансфузией и гемоконцентрацией [2].

• 1.    Возрастные нормы эритроцитарных параметров у крупного рогатого скота Якутии

  Груп пы	Возраст	Эритроциты , млн / мкл		Гемоглобин , г / л		Гематокрит , %
  		Среднее значение	Пределы колебаний	Среднее значение	Пределы колебаний	Среднее значение	Пределы колебаний
  1.	Новорож денные	6,95	6,25 7,65	112,5	104,6 120,4	36,1	32,0 40,2
  2.	1 мес	6,39	5,697,09	107,1	96,6 117,6	33,7	30,437,0
  3.	3 мес	6,32	5,97 7,17	100,9	94,4 107,4	33,1	30,0 36,2
  4.	6 мес	6,23	5,53 6,92	102,8	94,3 111,3	32,3	29,7 34,9
  5.	1 год	5,70	5,1 6,3	100,5	89,9 111,1	30,8	28,633,0
  6.	3 года	5,24	4,74 5,74	98,5	90,9 106,1	28,7	26,3 31,1
  7.	8 лет	5,0	4,2 5,8	103,3	95,2 111,4	28,3	25,0 30,6
  8.	старше 13 лет	4,83	4,035,63	88,1	79,7 96,5	27,0	21,033,0
  В среднем :		5,89	4,94 6,84	102,5		92,1112,9	27,2 35,7

• 2.    Возрастные нормы эритроцитарных индексов у крупного рогатого скота Якутии

  Груп пы	Возраст	МС V, мкм 3	MCH, пг			MCHC, г / л
  		Среднее значе ние	Пределы колебаний	Среднее значе ние	Пределы колебаний	Средне е значе ние	Пределы колебаний
  1.	Новорож денные	52,0	48,3 55,7	16,3	14,7 17,9	314,3	285,0-343,6
  2.	1 мес	52,9	48,2 57,6	16,9	14,819,0	319,3	292,8-345,8
  3.	3 мес	52,5	48,5 56,5	16,1	14,218,0	307,6	276,4-338,8
  4.	6 мес	52,2	47,5 56,9	16,6	15,1 18,1	319,1	294,3-343,9
  5.	1 год	54,5	48,6 60,4	17,8	15,4 20,2	328,0	289,4-366,6
  6.	3 года	55,1	50,0 60,2	19,0	16,5 21,5	345,5	308,8-382,2
  7.	8 лет	57,4	51,3 63,5	21,2	17,1 25,3	367,8	320,3-415,3
  8.	старше 13 лет	56,1	47,5 64,7	18,8	15,2 22,4	341,7	259,1-424,3
  В среднем :		54,0	48,4 -59,6	17,8	14,7 20,9	329,8	285,8-373,8

В таблице 2 приведены данные эритроцитарных индексов , выводимых анализатором расчетным путем . Результаты измерения среднего корпускулярного объема эритроцита показывают стабильное увеличение объема до 13 лет , отмечая незначительное снижение объема до 52,2 мкм ³ в возрасте 3 и 6 месяцев . Аналогичная тенденция сохраняется в параметрах среднего содержания гемоглобина в эритроците и средней концентрации гемоглобина в эритроците .

Анализ гистограмм и объемов эритроцитов позволяет выявить степень физиологического анизоцитоза .

По литературным данным [2] у новорожденных наблюдается отчетливый макроцитоз , а полученные нами результаты показывают , что самый низкий параметр объема эритроцитов у новорожденных и процент микроцитов составляет 15%, нормацитов 75%, а макроцитов 10%.

Таким образом , все полученные результаты эритроцитарных параметров лежат в пределах физиологических норм и являются нормативными для крупного рогатого скота , разводимого в условиях Якутии .

ЛИТЕРАТУРА : 1. Бажибина Е . Б ., Коробов А . В ., Середа С . В ., Сапрыкин В . П . Методологические основы оценки клинико морфологических показателей крови домашних животных . – М .: ООО « Аквариум - Принт », 2007. – 128 с . 2. Исследование системы крови в клинической практике ( Под редакцией Г . И . Козинца и В . А . Макарова ). – М : Триада - Х , 1997. – 480 с . 3. Уиллард М . Д , Твенден Гарольд , Торнвальд Грант Г . Лабораторная диагностика в клинике мелких домашних животных / Под ред . д . б . н . В . В . Макарова . – ООО « АКВАРИУМ БУК », 2004. – 432 с . 4. Хайдуков С . В . Многоцветный анализ в проточной цитометрии для медико биологических исследований : Автореф . … д - ра биол . наук . – СПб , 2008 – 52 с .

ЭРИТРОЦИТАРНЫЕ ПАРАМЕТРЫ КРОВИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ЯКУТИИ

Дыдаева Л . Г . Резюме

Приведены результаты анализа эритроцитарных параметров крови крупного рогатого скота симментальский и холмогорский пород , разводимого в условиях Якутии . Установлено , что они лежат в пределах физиологических норм и являются нормативными .

ERITROTSITARNYE PARAMETERS OF BLOOD OF LARGE CATTLE OF YAKUTIA

Dydaeva L.G. Summary

Results of the analysis of eritrotsitarnye parameters of blood of large cattle of Simmental and К holmogor breeds, cultivated in conditions of Yakutia are resulted. It is established, that they lay within the limits of physiological norms and are normative for them in conditions of Yakutia.