Кариометрия гепатоцитов при экспериментальной гиперхолестеринемии и их обратимости при коррекциии хедерагенином

Актуальность: Изменение, возникающее при экспериментальной гиперхолестеринении у животных, по многим параметром сходны с таковым у больных атеросклерозом (1,2,3).

Цель работы: В связи с этим в настоящее работе проведен морфометрический анализ состояния гепатоцитов печени кроликов при избыточном поступлении в организме холестерина и при коррекции его гиполипидемическими препаратом (хедерагенином) и после прекращения их введения.

Методика исследования: работы выполнена на 30 взрослых кроликах, разделенных на 3 группы:1-я кролики получавшие в течение 30 сут. холестерин в дозе 300мг/кг, забитые через 1сут. после последнего даче препарата (10), 2-я кролики получавшие в течение 30 сут. холестерин в дозе 300мг/кг и хедерагенин (агликон ладыгинозида) в дозе 10мг/кг, забитые через 1 сут. после последнего даче препаратов (10). Интактными служили 10 кроликов содержанных в одинаковых условия вивария. Для суждения о размерах гепатоцитов на препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином, подсчитывали их число в 5 стандартных полях зрения в центральной и периферической части долек печени. В дольках печени в центральной и периферической зонах, определяли число двуядерных клеток. Диаметр ядер гепатоцитов измеряли с помощью окуляр-микрометром (МОВ-15), по формуле Якоби, вычисляли объем ядер и по логарифмическому принципу (разница логарифма равен на 0,4) делили на следующие 7 классы: 1й -67,0мкм³, 2й-142,3мкм³, 3й-

195,2мкм3,     4й-259,8мкм3,     5й-

337,3мкм3,    6й-428,8мкм3,       7й-

658,8мкм3.           Количественные соотношения классов объема ядер выражали в %. Полученные результаты           обрабатывали статистически.

Результаты исследования: введения холестерина кроликам   практически вызывало значительные    отклонение    от кариометрических      показателей, принятых за норму. У животных, забитых через 1 сут. после последнего введения холестерина, в центральных зонах долек печени наблюдалось достоверное уменьшении % мелких и увеличение % крупных ядер.

На   диаграмме    №1-2

отчетливо виден кривых отражающих % содержание ядер по классам в печени кроликов опытной группы, вправо от контрольных показателей. Произошло достоверное снижение в этих зонах % ядер 1, 2 и 3го классов (Р -  0,01). С максимальной частотой выявлялись ядра с площадью сечения 51,4мкм2, тогда как в норме с площадью 40,8 мкм2. Встречались ядро диаметром 65,3, 73,1 и 82,1мкм2, в периферической зоне долек печени сдвиг кривой вправо был менее демонстративным.       Отмечалось значительное снижение % ядер 1-го класса (р-0,01) и появление крупных ядер, относящиеся к 7-му классу. Подсчет двуядерных клеток показал, что как у интактных животных, так и у кроликов, получавших холестерин (1-я и 2-я группы), их максимальное количество      наблюдалось      в периферической части печеночных долек, минимальное в центральной.

0,77   0,81   0,85   0,89   0,93   0,97   1,01 Lg

Диаграмма №1. Распределение объёма ядер гепатоцитов в центральной части долек печени

В печени кроликов 2й группы при этом имелось тенденция к уменьшению количество 2х ядерных гепатоцитов в центральной, средней зонах и к его увеличению в периферической зоне долек. Однако эти отклонения от нормы не были статистически значительными (р -

0,05). У животных 2й группы, но % мелких и крупных ядер отличается от такового у интактных кроликов (см.рис.). так, в центральных зонах долек печени последних ядра 7го класса, составляли 2,8+0,2%, 2го класса 16+4,74%.

Диаграмма №2

Распределение объёма ядер гепатоцитов в

0,77   0,81   0,85   0,89   0,93   0,97   1,01Lg

Заключение:      Таким образом,     введение     кроликам холестерина,

обусловливающее

увеличение его содержание в крови и печени, вызывает длительно сохраняюшиеся сдвиги кариометрических показателей печени. В связи с изложенным данным об увеличении число крупных ядер в клетках печени под опытных кроликов можно расценивать как отражение изменений интенсивности обменных процессов в паренхиме органа при избыточном содержании в нем холестерина важного структурного и метаболитического ингредиента гепатоцитов. Вместе, с тем увеличение % гепатоцитов, имевших крупных ядра, можно рассматривать и с точки зрении концепции о роли полиплоидии в компенсации несбалансированного генома. Полученные нами результаты свидетельствуют о непольном возвращении изученных показателей через 1мес. После прекращение избыточного поступления в организм холестерина, хотя к этому сроку в значительной мере нормализируются показатели липидного обмена крови и печени. В печени кроликов 2й группы было характерно наличие существенного увеличения число двухядерных гепатоцитов, что не обнаруживалось при изучении органа у животных 1й группы. Данные об увеличении число двухядерных клеток могут рассматриваться с позиций концепции о смене поколений одноядерных и двухядерных клеток, особенно в связи с уменьшением в печени этих животных доли наиболее крупных ядер. Полученные данные свидетельствуют о целесообразности изучение состояние ядерного аппарата гепатоцитов и через более длительные сроки после прекращение введение холестерина.