Клеточно-клеточные взаимодействия в крови в ранние сроки развития экспериментального перитонита

Автор: Кривохижина Л.В., Смирнов Д.М., Кантюков С.А., Куракин Е.Е.

Журнал: Человек. Спорт. Медицина @hsm-susu

Статья в выпуске: 16 (71), 2007 года.

Бесплатный доступ

В условиях экспериментального моделирования на крысах изучен характер клеточно-клеточных взаимодействий в крови в ранние сроки развития острого распространенного перитонита (3, 6,12, 24 и 48 час от момента индукции). Для оценки процессов межклеточного взаимодействия использовали метод L.A. Kirshenbaum и соавт. (1995); образование клеточных агрегатов оценивали согласно разработанной оригинальной методике. Установлено, что в динамике ранних сроков развития экспериментального перитонита имеет место изменение клеточно-клеточных взаимодействий в крови в сторону увеличения образования клеточных кооператов.

Короткий адрес: https://sciup.org/147152331

IDR: 147152331

Текст научной статьи Клеточно-клеточные взаимодействия в крови в ранние сроки развития экспериментального перитонита

Несмотря на успехи хирургического лечения, интенсивной лекарственной терапии, острый перитонит, абдоминальный сепсис остаются одними из наиболее сложных проблем современной ургент-ной медицины [3, 4, 5]. Общепризнанно, что воспалительный процесс является фактором активации клеток крови и эндотелиоцитов, что, с позиции единой клеточно-гуморальной системы защиты организма, предполагает реактивные изменения клеточно-клеточных взаимодействий в крови [1, 2]. В условиях развитой сосудистой системы брюшины, генерализованная дисфункция эндотелия при перитоните, нарушение реологических свойств крови, ухудшение микроциркуляции, содействуют распространению септического процесса и развитию синдрома системного воспалительного ответа [3, 4, 6]. Работы, посвященные изучению острого перитонита и абдоминального сепсиса в хирургии, не охватывают всего комплекса заинтересованных систем организма, и, что еще более важно, не выстраивают долгосрочный прогноз его развития с ранних сроков [3,4].

Цель исследования: в условиях экспериментального моделирования перитонита изучить характер клеточно-клеточных взаимодействий в крови в ранние сроки его развития.

Дизайн исследования: рандомизированное исследование на лабораторных животных.

Материалы и методы. Работа выполнена на 42 беспородных крысах обоего пола, массой 210— 295 граммов. Первую группу составили 12 крыс -контроль, вторую -30 крыс с экспериментальным острым перитонитом. Острый распространенный перитонит моделировали согласно методу, описанному A.S. Sharma и соавт. (1997), путем интра-абдоминальной инъекции каловой взвеси. Исследования проводили в остром опыте на 3, 6, 12, 24 и 48 час от момента индукции перитонита. Общепринятыми методами определяли общее количество форменных элементов крови, лейкограмму (Й. Тодоров, 1968). Выделение эритроцитов, тромбоцитов и лейкоцитов из цельной крови, осущест- вляли по методу Л.Б. Хейфеца, В .А. Абалкина (1973). Взвеси с заданной концентрацией клеток получали путем ресуспендирования в среде 199 (НПО «Микроген», Уфа). Образование клеточных агрегатов оценивали согласно разработанной на кафедре методике. Количество клеточных агрегатов (х109/л суспензии), с дифференцировкой каждых по размерам на малые (до трех клеток включительно) и большие (четыре и более клетки) подсчитывали в счетной камере Горяева. Для оценки процессов межклеточного взаимодействия использовали метод L.A. Kirshenbaum и соавт. (1995) в применении ко всем популяциям клеток крови.

Достоверность различий между группами рассчитывали по t-критерию Стьюдента и U-критерию Манна-Уитни. Для расчетов использованы: пакет статистического анализа Microsoft Excel для OS Windows ХР (Microsoft, США), пакет статистических программ Statistica 6.0 (StatSoft, США).

Результаты исследования и их обсуждение. Внутрибрюшное введение стерильного физиологического раствора животным контрольной группы не привело к каким-либо изменениям исследуемых показателей. В опытной группе животных, начиная с 6 часа, отмечено достоверное увеличение лейкоцитарных (ЛА) и эритроцитарных (ЗА) агрегатов. На сроках 6 и 12 часов - увеличение обусловлено достоверным ростом малых форм агрегатов, а на сроке 24 часа - за счет роста как малых, так и больших форм. При этом заслуживает внимания падение количества ЗА к 48 часу, тогда как количество ЛА продолжало оставаться высоким. На 24 и 48 час эксперимента отмечен достоверный рост общего количества торомбоци-тарных агрегатов (ТА), при этом в динамике достоверно увеличивается количество малых форм и снижается количество больших (табл. 1)

При анализе межклеточного взаимодействия обнаружено достоверное увеличение количества эритроцитарно-лейкоцитарных коагрегатов (ЭЛК) в опытной группе животных начиная с 6 часа эксперимента. На сроках 6-24 часа - увеличение обу-

Кривохижина Л.В., Смирнов Д.М., Кантюков С.А., Куракин Е.Е.

Клеточно-клеточные взаимодействия в крови в ранние сроки развития...

Таблица 1

Образование клеточных агрегатов крови крыс в ранние сроки экспериментального перитонита (х 109/л; М ± т; а)

Группы сравнения		Группа 1 Контроль п= 12	Группа 2 Острый распространенный перитонит (опытная группа) п = 30
Группы сравнения		Группа 1 Контроль п= 12	3 час	6 часов	12 часов	24 часа	48 часов
ЛА	Общее кол-во	1,075 ±0,115; 0,281	1,117 + 0,089; 0,207	1,383+0,165; 0,403*	1,492 ±0,185; 0,453*	1,517 + 0,191; 0,467*	1,218 ±.0,179; 0,214*(U)
	Малые	0,842 ±0,118; 0,289	0,839 + 0,131; 0,173	1,083 + 0,131; 0,322*	1,242 ±0,136; 0,334*(U)	1,083 + 0,166; 0,406*	0,972 + 0,133; 0,106
	Большие	0,233 ±0,044; 0,108	0,278 ±0,038; 0,089	0,300 ±0,056; 0,138	0,250 ±0, 062; 0,152	0,433 ±0,038; 0,093*	0,248 ±0,060; 0,074
ЭА	Общее кол-во	58,35+.3,81; 7,33	60,19 ±2,31; 5,17	65,20 ±3,41; 7,2*(U)	69,83 ±3,01; 6,33*	66,29+ 1,12; 2,33*	60,4 + 2,53; 4,92
	Малые	51,02 + 2,74; 6,81	52,18 ±1,59; 2,48	55,90 + 2,07; 4,36*(U)	57,53 ±1,54; 3,45*	54,49 + 2,19; 4,39*(U)	51,68 ±.1,56; 3,21
	Большие	7,33 ±1,45; 2,56	8,01 ±2,01, 4,15	9,30 ±1,37; 3,49*(U)	12,30 ±2,32; 4,67*	11,80 + 2,76; 4,13*(U)	8,72 ±0,34; 0,83
ТА	Общее кол-во	38,71 + 3,31; 4,08	38,43 +2,39; 5,04	39,03 + 1,51, 3,15	40,55 + 3,31, 6,12	47,15 + 1,48; 3,04*	51,13 ±2,17; 4,45*
	Малые	30,1 ±2,12; 2,97	29,33 + 1,33; 3,02	31,84 ±2,69; 4,91	33,15+.2,49; 5,08	40,29 ±1,13; 2,36*	46,01 ±3,1; 6,23*
	Большие	8,61 ±0,32; 1,05	9,10 ±2,10; 3,89	7,19±1,19; 2,45	7,40 + 0,29; 0,68	6,86 ±1,05; 2,23 *(U)	5,12 ±0,34; 0,72*

Примечание: * - достоверность различий между опытной и контрольной группами по t-критерию Стьюдента; U-критерию Манна-Уитни (р < 0,05).

Таблица 2

Образование межклеточных коагрегатов крови крыс в ранние сроки экспериментального перитонита (х 109/л; М ± гл; ст)

Группы сравнения

Группа 1 Контроль п= 12

Группа 2

Острый распространенный перитонит (опытная группа) п = 30

3 час

6 часов

12 часов

24 часа

48 часов

ЭЛК

Общее кол-во

6,88 ±0,49;

1,21

7,90 ±2,12;

4,3

8,41 ±1,18;

2,89*

8,08 ±0,58;

1,43*(U)

8,77 ±0,74;

1,81*

8,36 ±1,87;

3,21 *(U)

Малые

5,40 ±0,52;

1,28

6,18 ±1,11, 2,36

6,41 ±0,69;

1,71

5,95 ±0,67;

1,63

5,67 ±0,75;

1,84

7,24 ±1,09;

2,24*(U)

Большие

1,48 ±0,23; 0,56

1,73 ±0,21, 0,52

2,00 ±0,51;

1,25*(U)

2,13 ±0,22; 0,54*

3,10 ±0,30; 0,74*

1,12 ±0,38; 0,75

ЛТК

Общее кол-во

5,36 ±0,56;

1,37

4,55 ±0,38; 0,93

5,42 ±0,44; 1,03

7,12 ±0,59;

1,44*

9.18 ±0,69;

1,71*

6,17 ±0,94;

2,10

Малые

3,43 ±0,65;

1,59

3,31 ±0,35; 0,87

3,82 ±0,51;

1,12*(U)

4,64 ±0,59;

1,46*

6,36 ±0,93;

2,29*

3,59 ±0,76;

1,53

Большие

1,93 ±0,15; 0,37

1,24 ±0.11; 0,27

1,60 ±0,15; 0,42

2,48 ±0,25; 0,62*

2,82 ±0,39; 0,95*

2,58 ±0,16; 0,59*

ЭТК

Общее кол-во

50,88 ±3,79;

9,27

47,31 ±2,39;

4,91 *(U)

53,83 ±4,06;

9,95

62,16 ±3,77;

9,23*

54,23 ±3,21;

7,86

54,30 ±2,41;

5,16

Малые

48,26 ±3,40;

8,34

44,51 ±1,85;

3,79

50,85 ±3,63;

8,90

57,21 ±3,66;

8,34*

50,74 ±3,76;

9,22

52,17 ±2,08;

4,35

Большие

2,61 ±0,56;

1,36

1,80 ±0,33;

0,81 *(U)

2,98 ±0,78;

1,92

4,95 ±0,75;

1,85*

3,49 ±0,93;

2,29*

2,13 ±0,21, 0,56

Серия «Образование, здравоохранение, физическая культура», выпуск 12

Проблема здравоохранения

словлено достоверным ростом больших форм коагрегатов, а на сроке 48 часов - за счет снижения малых и роста больших форм. Рост количества лейкоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов (ЛТК) на 12 и 24 час обусловлен увеличением как малых, так и больших форм. Интересен тот факт, что образование эритроцитарно-тромбоцитарных коагрегатов (ЭТК) снижается на 3 час эксперимента, за счет падения больших форм, и достоверно увеличивается к 12 часу от момента индукции перитонита, за счет как малых, так и больших форм (табл. 2).

Таким образом, в динамике ранних сроков развития экспериментального перитонита имеет место изменение клеточно-клеточных взаимодействий в крови в сторону увеличения образования клеточных кооператов. Вышеизложенные экспериментальные наблюдения еще раз подтверждают, что медиаторно-цитокиновая реакция, и, в последующем, мультиорганная дисфункция при прогрессировании синдрома системного воспалительного ответа, есть результат дисбаланса в системе механизмов регуляции гомеостаза клеток.

Список литературы Клеточно-клеточные взаимодействия в крови в ранние сроки развития экспериментального перитонита

Кузник, Б.И. Единая клеточно-гуморалъная система защиты организма/Б.И. Кузник, К.Н. Цыбиков, Ю.А. Витковский//Тромбоз, гемостаз и реология. -2005. -№ 2 (22). -С. 3-16.
Люсов, В.А. Лейкоцитарная регуляция системы гемостаза в норме и при патологии/В.А. Люсов, Д.Б. Утешев, И.В. Дюков//Кардиология. -1993. -№ 12. -С. 75-78.
Мороз, В.В. Сепсис: Клинико-патофизио-логические аспекты интенсивной терапии: рук-во для врачей/В.В. Мороз и др. -Петрозаводск: ИнтелТек, 2004. -291 с.
Савельев, B.C. Перитонит: практическое руководство/под ред. B.C. Савельева, Б.Р. Гелъфанда, М.И. Филимонова. -М.: Литтерра, 2006.-208 с.
Bonne, R.C. Sepsis: a new hypothesis for pathogenesis of the disease process/R.C. Bonne, C.J. Godzin, R.A. Balk//Clin. Chest Med. -1997. -Vol. 20, № 6.-P. 235-243.
Reinhart, K. Markers of endothelial damage in organ dysfunction and sepsis/K. Reinhart, O. Bayer, F. Brunkhorst, M. Meisner//Crit. Care Med. -2002. -Vol. 30, 5 supl. -P. 302-213.

Статья научная