Клинико-гематологические и росто-весовые показатели крыс при изучении эффективности СВЧ обработки зерна, пораженного микотоксинами

Качество производимого и получаемого в результате обработки зерна зависит от качества продуктов питания, поставляемых на наш рынок. Свойства используемого зерна для кормления, оказывают решающее влияние на рост, развитие, здоровье и продуктивность скота. Поражение зерна микроорганизмами грибной и бактериальной этиологии способствует ухудшению качества зерна, его технологических показателей, потерям сухого вещества, загрязнению высокотоксичными и канцерогенными продуктами метаболизма микроскопических грибов – микотоксинами.

В настоящее время существует множество способов обеззараживания зерна. Электрофизические методы наиболее привлекательны с точки зрения экологии и возможности встраивания в технологические линии послеуборочной обработки зерна. Микотоксикозы птиц – одна из наиболее значимых в экономическом отношении проблем современного птицеводства.

В настоящее время проблема контаминации микотоксинами кормов в животноводстве и птицеводстве является важнейшей и актуальной проблемой [1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 12].

Известно, что при скармливании кормов, контаминированных микотоксинами, в естественных условиях токсический эффект выражен сильнее, чем в экспериментальных условиях при введении эквивалентного количества чистых микотоксинов [8, 9].

Одним из наиболее эффективных электрофизических методов разрушения токсинов в кормах является сверхвысокочастотная обработка (СВЧ), которая дополнительно устраняет нежелательную микрофлору и повышает питательную ценность обработанного сырья или готового корма [10, 11].

В связи с этим целью исследований было изучение влияния на организм лабораторных животных скармливания корма, содержащего микотоксины, подвергнутого СВЧ-обработке, отдельно и совместно с цеолитом, а также на показатели крови и интенсивность их роста.

Материал и методы исследований. В проведении опыта использовали 60 крыс-самок линии Вистар в возрасте 10 недель. Лабораторных животных содержали в виварии Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана. Лабораторные животные имели свободный доступ к воде и кормам, условия содержания для всех подопытных групп было одинаковым.

Работа проведена на 6-ти подопытных группах по 10 самок в каждой живой массой от 221 до 225 г в течение 30-ти дней. Из 6-ти групп наблюдаемых животных 3 группы были контрольные: 1-ая – контрольная группа - получала основной рацион, состоящий из зерна ячменя из расчета 30 г на каждое животное; 2-ая–положительно контрольная, которая к основному рациону получала цеолит в количестве 3% от основного рациона, и 3-ая – отрицательно контрольная, получавшая корм, содержащий Т-2 токсин и охратоксин А в количестве 0,1 и 0,053мг/кг соответственно.

Остальные три – опытные группы животных: 4-ая – получала токсичный корм, подвергнутый СВЧ-обработке при частоте 915 ГГц и мощности 50 кВт в течение 90 сек, 5-ая опытная группа получала корм, содержащий микотоксиныи цеолит в количестве 3 % от основного рациона и 6-ая опытная группа получала корм, содержащий микотоксины и подвергнутый СВЧ-обработке, и цеолит в количестве 3 %. Регулярно оценивали общее клиническое состояние лабораторных животных, потребление корма и реакцию на внешние раздражители, акты мочеиспускания и дефекации.

Для изучения интенсивности роста подопытных животных в начале и в течение опыта проводили индивидуальное взвешивание перед утренним кормлением. Исследования крови крыс провели в ветеринарной лаборатории ВЕТТЕСТ с помощью гематологического анализатора MindrayBC-2800 VET.

Результат исследований.

Результаты индивидуальных взвешиваний подопытных животных в начале опыта не выявили существенных изменений среди групп опыта. На 10-ые сутки опыта у животных контрольных групп наблюдалось увеличение массы тела на 5; 7,5 и 3,7 % соответственно. В опытных группах масса тела подопытных животных также увеличилась на 2,3 и 3,1 % (Рисунок 1).

Через 20 дней тенденция к увеличению массы тела сохранялась в контрольных группах, за исключением 3-ей, а также в опытных группах. В 1-й и 2-й группах масса тела подопытных животных была выше, чем в 4-й, 5-й и 6-й группах на 5; 7,3 и 4,1 % и 7,6; 7,4 и 6,6%. В 3-й группе животных на 20-е сутки масса тела животных снизилась на 11,2 %.

• ■    1 -контрольная группа                     ■ 2 - положительно контрольная

• ■    3 - отрицательно контрольная               ■ 4 — опытная

• ■    5 - опытная                              ■ 6 - опытная

Рисунок 1 –Динамика живой массы подопытных животных

Таблица 1 – Результаты исследования крови подопытных животных

Показатель		Группы опыта
		1 -контрольна я	2 – положительно контрольная	3 – отрицательно контрольная		4 – опытная	5 – опытна я	6 – опытна я
Морфологические показатели
Эритроци ты, 1012/л	в начале опыта	8,08± 0,1	8,12± 0,1		7,9± 0,1	8,2± 0,2	8,10± 0,1	8,0± 0,07
	в конце опыта	8,38± 0,3	9,1± 0,8		5,4± 1,7	6,26± 1,1	7,1± 0,5	7,5± 0,2
Лейкоцит ы, 109/л	в начале опыта	12,5± 2,1	12,6± 2,1		12,9± 2,4	12,7± 2,2	12,5±2, 1	12,4± 2,0
	в конце опыта	12,8± 2,3	13,9± 3,1		8,6± 0,6	9,15± 0,2	9,9± 0,2	10,2± 0,4
Гемоглоб ин, г/л	в начале опыта	155,3± 3,3	156,7± 2,3		158± 1,4	157,3± 1,9	155,7± 3,0	155,8± 2,9
	в конце опыта	157± 2,1	172± 8,4		92± 4,8	99,6± 4,2	108,±3, 6	114,± 3,2
Биохимические показатели
Креатини н, мкмоль/л	в начале опыта	75,4± 0,4	72,8± 0,1		74,4± 1,0	75,2± 2,35	73,2± 1,1	75,8± 1,0
	в конце опыта	78,1± 0,25	78,2± 0,25		94,6± 1,05	85,5± 1,8	87,4± 0,98	86,2± 1,15
АСТ, Ед/л	в начале опыта	152,6± 1,2	154,6± 0,75		156,2± 0,55	152,2± 2,35	152,4± 1,55	156,2± 2,05
	в конце опыта	148,1± 0,5	158,2± 0,4		201,5± 0,6	192,0± 1,7	184,3± 2,0	172,4± 2,45
АЛТ, Ед/л	в начале опыта	76,2± 0,2	75,6± 0,33		76,6± 0,55	76,4± 1,5	78,2± 1,75	76,8± 1,05
	в конце опыта	75,9± 0,1	77,6± 0,55		93,4± 0,65	89,4± 0,5	86,2± 1,5	82,6± 1,0
Глюкоза ммоль/л,	в начале опыта	7,6± 0,15	7,4± 0,1		7,2± 0,18	7,3± 0,13	7,2± 0,15	7,4± 0,08
	в конце опыта	7,8± 0,08	8,0± 0,08		4,5± 0,3	6,5± 0,15	5,2± 0,33	7,6± 0,26
Общий белок, г/л	в начале опыта	75± 1,0	78,6± 0,45		77,2± 0,8	76,8± 2,0	79,0± 1,7	78,0± 1,7
	в конце опыта	77,0± 0,23	82,0± 0,27		58,3± 0,45	62,2± 1,5	68,3± 0,95	71± 1,4

В конце исследования средняя масса крыс всех опытных групп, кроме 3-й, была выше исходной на 20; 28,7; 3,2; 6,2 и 8,4 %. В 3-й группе средняя масса тела была ниже исходных данных на 18,4 %. Необходимо отметить, что масса крыс опытных групп в конце опыта была выше, чем масса животных 3-й группы на 27,4; 28,6 и 32,5 %.

При этом первые признаки интоксикации регистрировались у животных 3-ей группы на 15-й день – у животных отмечалась пугливость, усиление жажды и снижение аппетита. У животных с 4-ой по 6-ую группы признаки микотоксикоза были не выражены.

Для изучения влияния СВЧ-обработки зерна и цеолита отдельно и в сочетании на степень детоксикации кормов у подопытных животных изучали некоторые морфологические и биохимические показатели крови животных в начале и в конце опыта.

По окончании эксперимента в 1-ой и во 2-ой группах наблюдалась положительная динамика в содержании в крови эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина, особенно она была выражена во 2-ой группе. Так, количество эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина в этой группе к концу опыта увеличилось на 12, 10 и 9,7 %; в первой группе разница с фоновыми показателями составила 3,7; 2,4 и 1,1 %. Стоит отметить, что изучаемые показатели крови не выходили за референсные значения.

С 3-ей по 6-ую группы опыта динамика гематологических показателей была отрицательной, наиболее ярко это проявлялось в 3-ей группе. Количество эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина в крови животных этой группы к концу эксперимента уменьшилось на 31,6; 33 и 41,8%.

В опытных группах с 4-ой по 6-ую наблюдалось понижение количества эритроцитов в крови на 23,6; 12,3 и 6,25 %; лейкоцитов – на 28; 20,8 и 17,7 %; гемоглобина – на 36,7; 30,2 и 26,4 %.

Содержание эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина в крови животных с 4-ой по 6-ую опытные группы было ниже аналогичных показателей крови животных 1-ой контрольной группы на 25,3; 15,3 и 10,5 %; на 28,5; 22,6 и 20,3 %; и на 36,5; 30,8 и 27 %, соответственно.

Однако, при сравнении с аналогичными данными в 3-ей контрольной группе содержание эритроцитов было выше на 16; 31,5 и 38,9 %; лейкоцитов – на 6,4; 15,1 и 18,6 %; гемоглобина – на 8,3; 18 и 24,5 %.

В таблице 1 приведены данные, из которых видно, что к концу эксперимента отмечается положительная динамика во 2-ой группе в содержании в крови аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансфераза (АСТ), креатинина, глюкозы, и общего белка. Так, количество аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансфераза (АСТ), креатинина, глюкозы, и общего белка в этой группе к концу опыта увеличилось на 2,6, 2,3, 7,4, 8,1 и 4,3 %.

У животных 3-ей группы наблюдается повышение аланинаминотрансферазы (АЛТ) на 21,9 %, аспартатаминотрансфераза (АСТ) на 29 % и креатинина на 27,1 % и снижение глюкозы на 37,5 %, а общего белка – на 24,5 %, соответственно.

Аналогичные изменения произошли в опытных группах с 4-ой по 6-ую. Так, наблюдается увеличение аланинаминотрансферазы (АЛТ) на 17,0; 10,2 и 7,6 %, аспартатаминотрансфераза (АСТ) на 26,1; 20,9 и 10,4 % и креатинина на 13,7; 19,4 и 13,7 % на фоне снижения глюкозы в 4-ой и 5-ой опытных группах на 11,0 и 27,8%. В сыворотке крови животных 6-ой опытной группы отмечено незначительное увеличение глюкозы на 2,7%, а также снижение общего белка – на 19,0; 13,5 и 8,9 %, соответственно.

Заключение. Таким образом, на основании полученных данных можно сделать вывод, что применение электрофизического метода обезвреживания токсинов в кормах, такого как микроволновая обработка, снижает токсическое действие микотоксинов на организм лабораторных животных, что подтверждается сохранением прироста массы подопытных животных и благоприятным воздействием на морфологические показатели крови. Кроме того, у подопытных животных наблюдается понижение активности печеночных ферментов относительно аналогичных показателей в сыворотке крови животных группы отрицательного контроля и менее выраженные проявления почечной недостаточности, углеводного и белкового обменов, о чем свидетельствует разница в содержании креатинина, общего белка и глюкозы в крови животных опытных групп и группы отрицательного контроля. Стоит отметить, что наилучший эффект наблюдается при комбинированном применении СВЧ-обработки зерна, пораженного микотоксинами, и применения сорбента.

Полученные результаты показывают, что сверхвысокочастотная обработка зерна, содержащего микотоксины, снижает токсическое действие токсинов, содержащихся в кормах, что проявляется сохранением прироста массы тела и положительным влиянием на клинико-гематологические показатели животных.

Резюме

Цель данной работы было изучение влияния на организм лабораторных животных скармливания токсичного корма, подвергнутого СВЧ-обработке, на показатели крови и интенсивность их роста. СВЧ обработка токсичного зерна и скармливание его отдельно и в комплексе с цеолитом подопытным животным улучшает весовые показатели. Скармливание подопытным животным корма, содержащего микотоксины, обработанные СВЧ излучениями, снижает токсическое действие токсинов, что проявляется положительным влиянием на клинико-гематологические показатели животных, а сочетанное использование цеолита - как адсорбента, улучшает антитоксический эффект.