Количественный анализ гемопоэтического химеризма после родственной аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток методом полимеразно-цепной реакции

Изучение динамики приживления трансплантата и ее связи с осложнениями играет важную роль в правильной оценке состояния больного и проведении дальнейшего лечения. Количественный мониторинг химеризма после аллогенной ТГСК молекулярными методами стал обязательным диагностическим инструментом для определения степени приживления трансплантата или его отторжения,а также предсказания рецидива основного заболевания.

Цель . Определить значение анализа донорского химеризма у пациентов после алло-ТГСК для определения риска развития рецидива.

Материалы и методы. Проанализировали результаты обследования 31 пациента после алло-ТГСК от родственных доноров с 2013 по 2017 гг., выполненных в клиниках «Национальный центр онкологии и трансплантологии» «Национальный научный центр материнства и детства» г. Астана. Оценку химеризма проводили методом STR-ПЦР с оценкой полиморфизма последовательности гипервариабельных участков геномной ДНК. Идентификация аллелей осуществлялась с помощью программы ChimerMarker версии 3.1.0. Результаты оценивали с использованием дескриптивных статистик непараметрического 2-стороннего критерия отношения шансов (ОШ) и 95 % доверительного интервала (ДИ 95 %).

Результаты. Среднее значение возраста доноров составило 21 год (диапазон от 7 до 59 лет), пациентов — 23 года (диапазон от 1 до 47 лет). Распределение по половому признаку среди пациентов: мужчины 12 (38,7 %), женщины 19 (61,3 %), среди доноров — 16 (51,6 %) и 15 (48,4 %), соответственно. У большей части реципиентов (19 (61,3 %)) число совпадений по HLA генам с донором составляло 9 и менее из 10, тогда как совпадение 10 из 10 наблюдалось у 12 пациентов (38,7 %). Преобладали пациенты с различными вариантами острого миелобластного лейкоза (18 человек (58,6 %)). Для оценки приживления ТГСК были выбраны 15 гипервариабельных участков ДНК и гены для идентификации пола. По степени значимости локусы распределялись в следующем порядке: D3S1358/D2S1338 > D7S820/D13S317 > D8s1179/CSF1PO/D16S539/ D5S818/FGA > D19S433 > D21S11/TPOX/AMEL > TH01/VWA > D18S51. По первичным результатам количество информативных локусов между парами донор/реципиент составило 2–11 (среднее значение — 6,5, медиана — 7). По результатам первичного анализа определения гемопоэтического химеризма полный донорский химеризм наблюдался у 16 пациентов, что составило 51,6 %. Смешанный донорский химеризм отмечался у 11 пациентов (35,4 %). Неприживление наблюдалось у 4 пациентов, где у 3 пар степень сочетания HLA было 5/10 и одна пара с HLA совместимостью 10/10. Полный донорский химеризм больше наблюдался среди пар с сочетанием 5/10 по системе HLA, смешанный — 10/10. Однофакторный анализ показал выраженную зависимость между степенью соответствия HLA 10/10 и первичным определением химеризма с исходом со смешанным донорским химеризмом, что в остальных группах не были

ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XV, № 2, 2019

статистически достоверны (p=0,05). Данные 7 пациентов более +30 дней после алло-ТГСК повторно направлены на анализ. Отмечено что из 4 пациентов со смешанным химеризмом у 2 пациентов наблюдается переход в возрастающий смешанный химеризм и 2 пациента вышли на полный донорский химеризм. У 1 пациента выявили отрицательную динамику приживления, переход на смешанный донорский химеризм.

Выводы. Информативность всех локусов метода позволяет в ранние сроки определить состояние кроветворения у пациента в пост-транплантационный период. Анализ гемопоэтического химеризма определяет развитие рецидива, отторжение трансплантата, а также характер течения болезней «трансплантат против хозяина», что облегчает задачу клиницистам при определении правильной тактики лечения после ТГСК.