Комплексная терапия демодекоза собак и её влияние на показатели врождённого иммунитета

Как свидетельствуют литературные данные, возникновению и развитию демодекозной инвазии у собак способствуют не только породная и возрастная предрасположенность, но и метаболические нарушения, влекущие за собой ослабление механизмов неспецифической резистентности на фоне наследственной иммуносупрессии Т-клеточного иммунитета    (Ф.И. Василевич,    1993;    М.В. Шустрова,    1995;

С.В. Старченков, 1999; С. Патерсон, 2000; М.А. Медведева с соавт., 2001; Б. Биглер, 2004; Е.В. Криворучко, И.Н. Дубина, 2006).

Генерализованная форма демодекоза – системное заболевание, сопровождающееся нарушением работы ряда важных органов и систем, включая, в первую очередь механизмы врожденного (неспецифическая резистентность) и адаптивного иммунитета. Поэтому подобное клиническое проявление демодекоза у собак требует длительного комплексного лечения. И даже в этом случае риск возобновления заболевания сохраняется на протяжении довольно длительного времени (С.В. Старченков, 1999; С. Патерсон, 2000 и др.).

Целью настоящей работы явилась разработка и оценка схем-моделей комплексного лечения папулезно-пустулезной формы демодекоза собак с включением в них иммунотропных и других средств, позитивно влияющих на иммунобиологическую реактивность организма животных. В качестве иммуномодуляторов использовались Полиферрин А (НПО «Нарвак», г. Москва), Вобэнзим («Фарма Мукос», ФРГ), а тривитамин, селенопиран как антиоксиданты, назначались в сочетании с акарицидными средствами общего и местного действия (ивермек, неоцидол, мазь Вилькинсона, АСД-3 фракция на вазелиновом масле, зоошампунь с акарицидными компонентами). Для антибактериальной терапии в схемы включались энроксил 5 % для инъекций, бициллин-3, метронидазол. В качестве гепатопротекторов применялись орально и парентерально эссенциале форте, Лив-52, карсил, а для снятия зуда - мази на основе гидрокортизона и преднизалона, внутривенно растворы тиосульфата натрия, хлорида- и глюконата кальция. В процессе работы были сформированы следующие группы подопытных животных:

I (n=7) - схема № 1 (Полиферрин А, тривитамин, селенопиран);

II (n=5) - схема № 2 (схема № 1 + Вобэнзим без Полиферрина);

• III    (n=5) - схема № 3 (акарициды, антиоксиданты, симптоматические средства);

• IV    (n=7) - клинически здоровые собаки-аналоги по возрасту и массе тела.

В начале курса лечения проводилась механическая очистка, удаление волос, тщательное промывание поражённых участков и частей тела акарицидными шампунями или нейтральными мылами (дегтярное, ланолиновое, детское) с последующей обработкой 2-3 % раствором стомазана. После высушивания феном или с помощью чистого полотенца одна из акарицидных мазей тщательно втиралась 1 - 2 раза в день в течение недели. Затем начиналась другая и т.д. При наличии зуда и расчёсов применялись успокаивающие мази, содержавшие кортикостероиды, но чаще вводился в/в раствор супрастина, реже -тиосульфата натрия или хлорида кальция. В первую неделю лечения использовались Полиферрин А, тривитамин, селенопиран. Другие лекарственные средства включались по мере необходимости в дозах, указанных в соответствующих наставлениях и инструкциях.

В начале лечения, а также через 15 и 30 суток после него у собак в пробах венозной крови, отбиравшихся в утренние часы до кормления с антикоагулянтом (гепарин) и без него, определялись показатели одного из основных компонентов иммунного статуса животных - неспецифической резистентности.

Ниже приводятся данные по изучению фагоцитоза ПЯН -полиморфноядерных нейтрофилов (ФАН, ФЧ, ФИ, ФЕ), кислородзависимой цитотоксичности этих клеток в НСТ-тесте, а также бактерицидной (БАСК), лизоцимной и бета-лизинной (БЛАСК) активности сыворотки крови по общепринятым методам исследований (С.И. Плященко, В.Т. Сидоров, 1979; И.П. Кондрахин с соавт., 1985;

И.А. Пахмутов, 1988). Цифровой материал подвергался статистической обработке с использованием t-критерия Стьюдента.

Результаты и их обсуждение. Как видно из материалов таблицы 1, в начале лечения все изучаемые показатели фагоцитоза у больных животных существенно снижались на фоне выраженной лейкоцитарной реакции.

Через 15 суток во всех группах отмечено возрастание процента фагоцитирующих нейтрофилов, их фагоцитарного числа, индекса фагоцитоза и фагоцитарной ёмкости крови при фактической нормализации количества лейкоцитов по сравнению с исходными данными. Однако уровень этих показателей фагоцитоза ПЯН в целом не достигал нормативных величин, указывая тем самым на ослабленный бактерицидный потенциал этих клеток крови в результате супрессивного влияния продуктов метаболизма как самих демодекозных клещей, так и, вероятно, повышенным расходом микробицидных факторов в ходе воспалительных изменений в коже и других органах у подопытных животных.

1.Показатели фагоцитоза у подопытных собак (M±m)

Группы	Сроки иссл-ий, сут.	Показатели
		Кол-во лейк., г/л	ФАН, %	ФЧ	ФИ	ФЕ, г/л
	Начало лечения	16,2±0,7	39,7±1,9 **	2,3±0,4 **	5,8±0,3 **	37,3±3,5 **
I (n=7)	15	10,6±0,4	46,3±1,4 *	3,8±0,2 **	8,2±0,2 **	40,2±4,3 **
	30	9,7±0,3	53,8±1,7	5,9±0,8	11,0±0,7	57,3±3,7
II (n=5)	15	10,3±0,4	47,8±1,2 *	3,8±0,3 **	8,0±0,5 **	39,1±5,4 **
	30	9,4±0,5	58,7±2,5	6,9±0,5	11,8±0,9	64,9±3,6
III (n=5)	15	11,3±0,7	42,7±2,0 **	3,4±0,3 **	8,0±0,8 **	38,4±2,8 **
	30	9,5±0,2	51,3±1,6	5,0±0.7	9,8±0,6 *	47,5±3.5 **
IV (n=7)	Клин. здоров. собаки	9,4±0,8	56,8±3,3	6,5±0,5	11,4±0,3	61,1±3,2

Условные обозначения: * - p<0,05; ** - p<0,01 – достоверность различий по сравнению с IV группой; группы I – III – соответствуют схемам лечения №№ 1 – 3.

Через 30 суток на завершающем этапе лечения и процессов репаративной регенерации в повреждённых участках кожного покрова при нормальном уровне лейкоцитов в периферической крови фактически нормализовались все изучаемые показатели фагоцитоза ПЯН в I и II группах, тогда как в III группе (отрицательный контроль) без иммунотропных препаратов они восстанавливались гораздо медленнее и не достигали такового у клинически здоровых животных в отношении ФИ

• - показатели интенсивности фагоцитоза и ФЕ - фагоцитарной ёмкости крови (p<0,05 - 0,01).

• 2. НСТ-тест и его показатели у подопытных собак (M±m)

  Группы	Сроки иссл-ий, сут.	Показатели
  		СВ, %	АВ, %	СЦП, СВ	СЦП, АВ	ПРН	КМАН
  	Начало лечения	19,1+0,8 **	45,8+1,3 **	0,38+0,05 **	1,32+0,04 **	2 4 **	0,58+0,04 **
  I (n=7)	15	11,5+0,3	52,3+1,5	0,31+0,02	1,53+0,05 **	4,6	0,77+0,03 *
  	30	8,2+0,6	62,8+2,3 *	0,26+0,03	1,85+0,07	8,3	0,87+0,05
  II (n=5)	15	10,3+0,5	55,7+2,5 *	0,24+0,05	1,64+0,06 *	5,4	0,81+0,03 *
  	30	8.0+0,4	67,5+2,7	0,20+0,02	1,90+0,08	8,4	0.88+0,03
  III (n=5)	15	13,8+0,6 *	47,3+1,4 **	0,33+0,03 *	1,49+0,07 **	3,5	0,72+0,01 **
  	30	8,2+0,7	54,9+1,6 **	0,27+0,03	1,62+0,08 **	5,4	0,81+0,02 *
  IV (n=7)	Клин. здоров. собаки	7,1+0,5	68,9+1,5	0,23+0,02	1,97+0,05	8,9	0,89+0,02
  Условные обозначения: * - p<0,05; ** - p<0,01 - достоверность различий по сравнению с IV группой; группы I - III - соответствуют схемам лечения №№ 1 - 3; СВ - спонтанный вариант НСТ-теста; АВ - активированный вариант НСТ-теста; СЦП, СВ - средний цитохимический показатель СВ НСТ-теста; СЦП, АВ - средний цитохимический показатель АВ НСТ-теста; ПРН - показатель резерва нейтрофилов; КМАН - коэффициент метаболической активности нейтрофилов; n - количество животных в группе.

  Ослабление защитной функции ПЯН на фоне демодекозной инвазии у подопытных собак отразилось и на гуморальных факторах неспецифической резистентности, связанных, как известно, не только с фагоцитирующими клетками, но и с их синтезом в печени и других внутренних органах (С.И. Плященко, В.Т. Сидоров, 1979).

Убедительным подтверждением фактическому материалу табл. 1 явились результаты исследований показателей НСТ-теста у подопытных животных, что хорошо видно из данных табл. 2.

Если в начале лечения наблюдалось функциональное раздражение ПЯН, судя по проценту позитивно реагирующих клеток в СВ НСТ-теста и его СЦП (p<0,01), то остальные показатели, наоборот, демонстрировали достоверное ослабление кислородзависимого метаболизма в ПЯН у больных животных (p<0,01).

Через 15 суток, как видно из табличных данных, на фоне комплексного лечения в I -II группах существенно снижался процент спонтанно реагирующих ПЯН в СВ НСТ-теста. Однако он ещё не достигал величины у контрольных (клинически здоровых) животных. В III группе (табл. 2) эти процессы свидетельствовали о более медленном восстановлении в ПЯН микробицидных кислородзависимых радикалов, их наработки в так называемом «дыхательном» или «респираторном взрыве». Такая картина наблюдалась в этой группе даже через 30 суток после начала лечения без иммуномодулирующих средств. В I и II группах на фоне синергичного эффекта иммунотропных веществ, антиоксидантов и особенно в сочетании с энзимотерапией (II группа) обнаруживался более высокий процент положительно реагирующих ПЯН в активированном варианте (АВ) НСТ-теста, их СЦП, ПРН и КМАН, отражая тем самым не только количественный рост числа активных клеток, но и выраженные качественные изменения в характере отложений в цитоплазме клеток восстановленного красителя - диформазана синего цвета, с преобладанием ПЯН со 2 и 3 степенью активности как и у клинически здоровых собак (p<0,01).

Резюмируя, можно констатировать, что включение иммунотропных препаратов, антиоксидантов, ферментов растительного и животного происхождения оказало благоприятное влияние на механизмы выздоровления у больных демодекозом собак на фоне использования местных и системных акарицидов в сочетании с антибактериальной терапией. Как видно из материалов табл. 1 и 2, активация фагоцитоза ПЯН, их кислородзависимой бактерицидности являются реальным подтверждением важной роли дендритных клеток, макрофагов и нейтрофилов в обеспечении врождённого иммунитета (Р.М. Хаитов, 2006), представляющего первую линию обороны макроорганизма от инфекционных и инвазионных агентов.

В начале комплексного лечения обнаружилось значительное снижение уровня активности исследованных показателей, но уже через 15 суток в I и II группах содержание лизоцима и бета-лизинная активность сыворотки крови практически достигли нормативных (IV группа) значений, тогда как БАСК, как интегральный показатель, ещё оставалась пониженной (p<0,05) по сравнению со здоровыми собаками. Через 30 суток, за исключением БАСК в III группе, бактерицидная и другие виды активности сыворотки крови оказались в пределах величин, свойственных этому виду животных. Следует отметить, что трехнедельная системная энзимотерапия во II группе способствовала статистически значимому 179

повышению БАСК, уровня лизоцима и БЛАСК (p<0,05) по сравнению с III группой. Однако различия этих показателей с таковыми в I и II группах оказались недостоверными (p>0,05).

Таким образом, результаты выполненных исследований показали, что при пустулезно-папуломатозной генерализованной форме демодекоза собак наблюдается ослабление клеточных и гуморальных механизмов неспецифической резистентности организма животных (врождённого иммунитета) и является одним из важнейших звеньев в патогенезе данного заболевания. Со всех точек зрения, наиболее эффективным методом его лечения следует признать комплексный подход, включая не только набор акарицидных и антибактериальных средств, но и биологически активных препаратов (Полиферрин А, Вобэнзим, селенопиран), оказывающих иммунотропное, антиоксидантное, противовоспалительное, гепатопротективное действие, направленное, в конечном итоге, на активацию компенсаторных и регенераторных процессов в повреждённых структурах кожи больных демодекозом собак.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Биглер, Б. Кожные заболевания. В кн.: Х.Г. Ниманд, П.Ф. Сутер Болезни собак. Практическое руководство для ветеринарных врачей, 8 изд. / Перев. с нем., – 2 изд. – М.: ООО «Аквариум Принт», 2004. – С. 271-303. 2. Василевич, Ф.И. Сравнительная оценка методов лечения собак при демодекозе / Ф.И. Василевич // Ветеринария. – 1993. – № 9. – С. 55-56. 3. Криворучко, Е.Б. Демодекоз собак – наш опыт / Е.Б. Криворучко, И.Н. Дубина // Практик. – 2006. – № 5. – С. 72-78. 4. Кондрахин. И.П. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии. Справочник / И.П. Кондрахин [и др.] – М.: Агропромиздат, 1985. – 486 с. 5. Медведева, М.А. Особенности изменения гематологических данных и показателей естественной резистентности собак, поражённых демодекозом / М.А. Медведева [и др.] // М-лы 9-го Междунар. вет. конгр. – М., 2001. – С. 176-177. 6. Патерсон. С. Кожные болезни собак / Пер.с англ. Е. Осипова. – М.: «Аквариум ЛТД», 2000. – 176 с. 7. Пахмутов, И.А. Цитохимия лейкоцитов периферической крови с.-х. животных в норме и патологии. Учеб. пособие. – Казань, 1988. – 83 с. 8. Плященко, С.И. Естественная резистентность организма животных / С.И. Плященко, В.Т. Сидоров. – Л., 1979. – 183 с. 9. Старченков, С.В. Болезни мелких животных: диагностика, лечение, профилактика. – СПб.: Изд-во «Лань», 1999. – С. 475-485. 10. Хаитов, Р.М. Физиология врождённого иммунитета / Р.М. Хаитов // Росс. физиол. журнал им. И.М. Сеченова. – 2006. – Т. 92. – № 6. – С. 649-661. 11. Шустрова, М.В. Демодекоз собак в условиях города / М.В. Шустрова // Ветеринария. – 1995. – № 1. – С. 54-55. 12. Barriga, O.O. Evidence of immunosupression by Demodex canis / O.O. Barriga // Veterin. Immunol. and Immunopatol. – 1992. – V. 32. – P. 37-46.

КОМПЛЕКСНАЯ ТЕРАПИЯ ДЕМОДЕКОЗА СОБАК И ЕЁ ВЛИЯНИЕ НА ПОКАЗАТЕЛИ ВРОЖДЁННОГО ИММУНИТЕТА

Модина Т.Н., Чвала А.В., Пахмутов И.А.

Резюме

Комплексная терапия генерализованной формы демодекоза у собак с включением сбалансированного набора растительных и животных ферментов (препарат «Вобэнзим») способствовала более раннему выздоровлению и нормализации иммунного статуса подопытных животных.

DOGS DEMODICOSIS COMPLEX THERAPY AND ITS INFLUENCE ON CONGENTIAL IMMUNITY INDICES

Modina T.N., Chvala A.V., Pakhmutov I.A.