Комплементарная активность слюны и сыворотки крови крупного и мелкого рогатого скота при гельминтозах

Система комплемента - это сложный комплекс функционально связанных между собой белков, для которых характерно быстрое многократное усиление ответа на первичный сигнал за счет каскадного процесса, когда продукт одной реакции служит катализатором последующей (Smith D., Taubman M., 1992). Исследования системы комплемента слюны немногочисленны и осуществляются в основном у людей зарубежными исследователями и не вышли за пределы экспериментов.

Вышеизложенное свидетельствует о необходимости исследований комплементарной активности слюны и сыворотки крови животных при различных патологиях. Целью наших исследований явилось определение комплементарной активности слюны и сыворотки крови коров и овец при стронгилятозе и мониезиозе.

Материалы и методы. Слюну и сыворотку крови получали от здоровых и больных гельминтозами нестельных коров черно-пестрой породы (КРС) в возрасте 18-24 месяцев массой 300-400 кг (всего 12, из них 6 - здоровых и 6 - больных стронгилятозом, количество гельминтов не менее 10 в поле зрения) в хозяйстве ООО «Сокуры» Атнинского района Республики Татарстан и у овец романовской породы в возрасте 24-30 месяцев массой 25 - 30 кг (всего 12, из них 6 - здоровых из Казанского зооботсада и 6 – больных с сочетанным гельминтозом а именно мониезиозом и стронгилятозом, соотношение возбудителей не менее 10:5, из вивария Казанской государственной академии ветеринарной медицины).

Слюну получали после фармакологической активации секреции подкожным введением 1 % - ного раствора пилокарпина гидрохлорида (глазные капли) крупному рогатому скоту в область лопатки в дозе 15 мл и овцам в область шеи в дозе 2,5 мл.

Сыворотку крови получали по методике Н.И. Гурьянова (1992). Кровь брали из яремной вены стерильно специальными системами во флаконы емкостью 250 мл, выдерживали 3 ч при температуре 20-22 °С до получения первичной сыворотки, которую затем центрифугировали при 3 000 об./мин течение 15 мин и подвергали стерилизации путем фильтрации через мембранные фильтры фирмы «Millipore» (США). Затем замораживали.

Свежие фекалии для определения гельминтов брали от крупного рогатого скота и овец сразу после выделения из прямой кишки, с пола (для этого использовали резиновые перчатки), и в количестве 10 г помещали в целлофановые пакеты.

При диагностике гельминтозов использовали гельминтоовоскопический метод (Котельников Г.А., Хренов В.М., 1980). При этом в качестве флотационной жидкости применяли аммиачную селитру (нитрат аммония), 1,5 кг которой растворяли в 1 л воды, доводя плотность раствора до 1,3. Пробу фекалий массой 3 г помещали в стакан, заливали небольшим количеством флотационной жидкости и тщательно размешивали. Затем добавляли 30 мл этого раствора и процеживали через металлическое сито в сухой, чистый стакан. Взвесь отстаивали 10 мин, после чего прикосновением металлической петли снимали поверхностную пленку и переносили на предметное стекло для микроскопирования.

Дегельминтизацию осуществляли фебталом в форме гранулята индивидуально. Овцам давали 1 г гранулята на 22 кг массы животного по 2 г с кормом, крупному рогатому скоту давали 1 г гранулята на 29 кг массы животного по 10-13 г с кормом.

Комплементарную активность слюны и сыворотки крови определяли по методике Л. С. Резниковой (1967), оценивая % гемолиза. Для титрования комплемента исследуемую сыворотку, разведенную в 10 раз, разливали в 11 пробирок дозами от 0,05 до 0,5 мл с разницей между отдельными дозами 0,05 мл, после чего в каждую пробирку прибавляли 1,5 мл гемолитической системы, т. е. сенсибилизированные эритроциты барана. Учет результатов производили в зоне 50 %-ого гемолиза после 45 мин хранения образцов в термостате при 37 °C, последующего охлаждения и центрифугирования.

Результаты исследований и обсуждение. Данные по комплементу представлены в таблице.

Комплементарная активность (%) сыворотки крови и слюны у животных в норме, гельминтозах и после дегельминтизации

Установлено, что активность комплемента в сыворотке крови КРС, в норме составляющая 42,46±9,21 %, при стронгилятозе падает до 20,7±5,5 %. После обработки антгельментиком фебталом величина этого показателя возрастает, но остается ниже исходного значения (44,4±7,6 %).

Как видно из таблицы, показатель активность комплемента слюны у КРС в норме равняется 30,5±5,6 %, а при гельминтозе падает до 19,4±3,0 %. Дегельминтизация не только возвращает величину комплемента к исходному значению, но даже значительно увеличивает ее (до 28,6±4,6 %).

Активность комплемента сыворотки крови у овец при гельминтозе не изменяется (в норме – 17,6±3,4 %, при гельминтозе - 18,1±1,8 %), но возрастает после дегельминтизации (до 27,8±2,2 %). Активность комплемента слюны овец в норме равнялась 34,8±3,4 %, при гельминтозе снизилась до 16,8±8,0 %. Дегельминтизация несколько увеличивает эту величину (до 24,4±8,9 %), но она остается все же ниже исходного значения.

Обсуждение. Согласно нашим данным, величина комплементарной активности слюны и сыворотки крови у КРС и овец при гельминтозах снижается (исключение - сыворотка крови овец). Это можно объяснить нарушением процесса всасывания питательных веществ в ЖКТ жвачных, отрицательным азотистым балансом и интоксикацией организма животных продуктами метаболизма гельминтов, а также сдвигом основных физиологических констант макроорганизма, что ведет к нарушению гомеостаза.

После дегельминтизации отмечено повышение величины комплементарной активности обеих биологических жидкостей и у коров и у овец. Вероятно, это связано с устранением гельминта, нормализацией обменных процессов, восстановлением иммунного статуса и гомеостаза у животных. Возможно, использованный нами антгельментик фебтал губительно действовал на развитие нематод и цестод, помимо прямого эффекта опосредованно способствовал повышению неспецифической резистентности животных.

Выводы. Из полученных нами данных следует, что имеются различия в активности комплемента слюны и сыворотки крови коров и овец. Проведенные исследование, свидетельствует о снижении активности комплемента сыворотки крови и слюны при гельминтозах у КРС и отсутствии изменения этого показателя у овец в сыворотке крови. Последний факт возможно связан с особенностями действия собственно паразита.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Вагнер, Г.Ф. Колориметрическое определение комплементарной энергии крови / Г.Ф. Вагнер // Лаб. дело. - 1963. - №1. -С. 44-46. 2. Гурьянов, Н.И. Усовершенствование технологий получения сывороток крови кур, бычков, эмбрионов коров и изучение их свойств при культивировании клеток и вирусов: Автореф. дисс. … канд. биол. наук / Н.И. Гурьянов - Казань, 1992. - 19 с. 3. Котельников Г.А., Методические рекомендации по диагностике наиболее распространенных гельминтозов сельскохозяйственных животных. / Г.А. Котельников, В.М. Хренов // М., 1980. – 34. 4. Резникова, Л.С. Комплемент и его значение в иммунологических реакциях / Л.С. Резникова – М.: Медицина, 1967. - 272 с. 5. Smith, D. Ontogeny of immunity to oral microbiota in humans / D. Smith, M. Taubman // Crit. Rev. Oral. Biol. Med. - 1992. - V. 3. - P. 109-133.

КОМПЛЕМЕНТАРНАЯ АКТИВНОСТЬ СЛЮНЫ И СЫВОРОТКИ КРОВИ КРУПНОГО И МЕЛКОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ ГЕЛЬМИНТОЗАХ

Гильмутдинов Р.Я., Махамат M.K., Куряева Н.Ю.

Резюме

В статье изложены результаты исследования комплементарной активности слюны и сыворотки крови при гельминтозах у жвачных животных. Показано снижение величины данного показателя при мониезиозе и стронгилятозе.

COMPLEMENTARY ACTIVITY OF SALIVA AND BLOOD SERUM OF CATTLE SMALL CATTLE IN HELMINTHIASIS

Guilmutdinov R.Y., Mahamat M.K., Kuriaeva N.Y.