Коррекция иммунометаболических нарушений при комплексном лечении диареи у новорожденных телят-гипотрофиков

Анализ литературных источников и ветеринарной статистики показал, что даже при нарастающем использовании химиотерапевтических и биологических средств защиты продолжает оставаться стабильно высокой заболеваемость и гибель телят от незаразных болезней желудочно-кишечного тракта и органов дыхания. Так, общий показатель смертности у новорожденных телят колеблется в пределах 15-20%. Причем 50-60% случаев приходится на первую неделю жизни с преобладанием острых расстройств пищеварения у животных-гипотрофиков, доля которых в структуре падежа достигает 70-75% [2, 4, 5, 6]. Под влиянием неблагоприятных факторов новых условий существования у них обнаруживаются структурно-функциональные изменения в желудочно-кишечном тракте, поджелудочной железе, печени и др.. В результате патологическая импульсация по афферентным нервам автономной нервной системы достигает гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы (ГГНС). Активация последней сопровождается синтезом и своеобразным выбросом повышенного количества стероидных гормонов катаболического типа, усугубляющих на этой почве расстройства пищеварения с типичной клинической картиной острого диарейного синдрома [2, 4, 8, 9].

Опираясь на вышеизложенное, мы поставили цель: изучить ряд показателей периферической крови, отражающих состояние морфобиохимического и иммунного статуса новорожденных телят-гипотрофиков при комплексном лечении функциональной диареи в первые 10-12 дней молозивно-молочного периода.

Материалы и методы. Работа выполнялась в условиях МТФ базовых хозяйств Нижегородской области в осенне-зимние сезоны 20092012 гг.

В период сухостоя стельные коровы при своевременном запуске кормились по рационам, сбалансированным по общей питательности, но с дефицитом витамина А, сахара в силосе и сенаже при избытке нитратов и нитритов, кислотности за счет повышенного содержания уксусной и масляной кислот, примеси заплесневелых частей растений, в т. ч. в сене с естественных и культурных угодий. Это не могло не сказаться на внутриутробном развитии плодов, на рождении мелковесных гипотрофичных телят (23-25 кг), на качестве молозива и молока. При своевременной трехкратной выпойке молозива первого и второго удоя (через 1-1,5 часа после рождения) в количестве не менее 70 мл/кг массы тела на вторые сутки у таких животных обнаруживались клинические признаки диареи легкой и средней степени тяжести (угнетение общего состояния, вялость, слабый аппетит, ослабление тургора кожи, заметное западение глазных яблок, жидкие каловые массы сероватого оттенка со слизью, температура тела в нижних пределах физиологической нормы и т.п.).

Из таких животных черно-пестрой породы были сформированы 2 группы: опытная (I, n = 32) и контрольная (II, n = 30). В качестве отрицательного контроля использовались клинически здоровые телята -аналоги по породе, возрасту (n = 10). Телята I группы лечились по разработанной схеме - модели, II - по схеме, принятой в хозяйствах. В начале лечения в обеих группах на 2 -й день после рождения назначалась кратковременная голодная диета (пропуск одного кормления молозивом), а перед следующим кормлением за 30-40 мин. им выпаивался отвар из лекарственного сырья (тысячелистник, конский щавель, полынь, зверобой, кора дуба) 0,5-0,7 л с добавлением по 0,5 г фталазола и сульгина, 5,0 натрия сульфата, 20,0 - глюкозы, 2,0-3,0 - хлорида натрия. Подобным образом отвар применялся в последующие дни лечения. В контрольной группе в первый день лечения (2 сутки) в/м вводился тетравит в дозе 5,0 мл. В опытной группе на 3 сутки выполнялась новокаиновая блокада по В.В.Мосину, в/м назначался «Седимин» (А-БИО, Россия) - 3 мл, а в/б - 5 мл тетравита. В последующие 5 дней применялся в/м витамин В12 (200 мкг 1 раз в сутки).

Ежедневно подопытные телята подвергались клиническому осмотру с регистрацией Т, П, Д, а на 2, 5 и 10-12 сутки у них брались пробы венозной крови, в которых определялся ряд показателей: -морфологических (количество эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, гематокрит, лейкоцитограмма); - биохимических (общий белок и его фракции, уровень общего кальция, неорганического фосфора, активность ферментов АсАТ, АлАТ, ЩФ); - иммунологических (показатели фагоцитоза и НСТ-теста полиморфноядерных нейтрофилов (ПЯН), бактерицидная, лизоцимная, комплементарная активность сыворотки крови)[4]. Цифровой материал обрабатывался статистически с использованием t-критерия Стьюдента.

Результаты и выводы исследования. Как видно из предоставленных в табл. 1 данных, у больных телят-гипотрофиков существенно (р<0,05-0,01) снижалось содержание эритроцитов, гемоглобина, но возрастал уровень гематокрита и лейкоцитов. Эта тенденция сохранялась и на 5 сутки опытов.

Биохимически в образцах исследуемой крови обнаруживались пониженными количество общего белка, альбуминов, активности сывороточных трансаминаз АсАТ и АлАТ, щелочной фосфатазы. В это же время у таких пациентов наблюдалось снижение уровня глюкозы, общего кальция и неорганического фосфата на фоне более высокой концентрации мочевины. При этом, как видно из табличных данных, исследуемые показатели в Ι группе достигали раньше нормативных значений. Этот факт подтвердился и клиническими данными. Так, продолжительность лечения в опыте составила 5,4±0,3, а в контроле – 7,6±0,4 сут. Величина суточного прироста живой массы на 30 день составила в первом случае 376±15, а во втором – лишь 310±20 г (р<0,05).

1. Морфобиохимический статус крови у подопытных телят (M±m, n=7)

Показатели	Сроки исследований, сутки
	2	5		10-12		Клинич. здоров. (нормотроф.)
	(начало)	Ι	ΙΙ	Ι	ΙΙ
Эр, 1012/л	5,8±0,23хх	6,3±0,20х	6,0±0,18х	7,4±0,31ха	6,5±0,20х	7,2±0,15
Hb, г/л	87,5±3,5хх	96,4±2,2х	93,1±1,3х	103,8±2,5ха	97,2±1,8х	110,8±2,0
Ht л/л	0,43±0,02х	0,37±0,01	0,40±0,02х	0,35±0,03	0,38±0,02	0,34±0,03
ОБ, г/л	56,8±1,2хх	64,3±1,4х	61,2±1,5х	69,6±1,3	66,2±1,4х	74,2±1,5
Альбумины, %	45,2±1,5хх	49,8±1,2ха	47,1±1,0х	51,3±1,4	48,7±1,6	52,7±1,3
Глобулины, %	41,8±1,4х	48,6±1,5	42,9±1,7	48,7±1,3	51,3±1,2	47,3±1,3
А/Г	1,1	1,0	1,1	0,9	0,9	0,9
АсАТ, Е/л	45,8±1,3	62,8±1,2	55,2±1,1	54,7±1,3	59,3±1,5	60,9±2,3
АлАТ, Е/л	23,6±1,5х	34,5±1,3	29,1±1,5	40,3±1,4	40,6±1,6	45,4±1,3
Коэфф. де Ритиса	1,9	1,8	1,9	1,3	1,4	1,3
ЩФ,ед.Бод.	2,0±0,1х	2,8±0,1х	2,2±0,1хх	3,0±0,2	2,7±0,3х	3,5±0,3
Са2+, мМ/л	1,83±0,04хх	2,36±0,05хха	2,04±0,02х	2,39±0,04ха	2,25±0,02х	2,43±0,05
Рн, мМ/л	1,15±0,02х	1,42±0,03хха	1,25±0,02	1,88±0,04	1,67±0,09	1,85±0,08
Глюкоза, мМ/л	2,64±0,15х	2,93±0,17	2,75±0,13	3,12±0,11	2,87±0,18	2,96±0,14
Мочевина, мМ/л	5,79±0,20х	4,32±0,15ха	5,03±0,2х	4,25±0,18	4,77±0,12х	4,08±0,3

Примечание: Эр – эритроциты, Hb – гемоглобин, Ht – гематокрит, ОБ – общий белок, А/Г – отношение альбумины/глобулины, АсАТ и АлАТ – аспартат и аланин аминотрансферазы, ЩФ – щелочная фосфатаза, Са2+ кальций общий, Рн – фосфор неорганический; х - р<0,05; хх - р<0,01; ха, хха – межгрупповые различия.

Судя по уровню общего белка, альбумина, соотношения А/Г, мочевины, активности ферментов АсАТ и АлАТ у больных телят ослабевал белковый обмен, что подтверждают результаты исследований других авторов [2,5,9]. Пониженная энзиматическая активность сывороточной ЩФ наряду с недостатком ионов кальция и фосфора свидетельствовали о существенных нарушениях фосфорно-кальцивого обмена, что не могло отразиться на функциональном состоянии ПЯН – первого эшелона защиты организма животных и человека не только от возбудителей (бактерии, грибы, вирусы), но и от трансформированных или поврежденных клеток хозяина [3]. С другой стороны, низкая активность ЩФ указывала и на заметное ослабление трансмембранного переноса глюкозы, количество которой у гипотрофичных телят находилось на нижней границе физиологической нормы. В целом, как наглядно продемонстрировали результаты табл. 1, в Ι группе, в отличие от ΙΙ через 10-12 суток устанавливались величины исследуемых показателей, весьма близкие к таковым у клинически здоровых телят-аналогов (р>0,05).

В табл. 2 представлены результаты исследований, отражающих состояние неспецифических факторов защиты (врожденного иммунитета) у подопытных животных.

2. Клеточные и гуморальные факторы неспецифической защиты (врожденного иммунитета) у подопытных телят (M±m, n=7)

Показатели	Сроки исследований, сутки
	2	5		10-12		Клинич. здор. аналоги (нормотроф.)
	Начало	Ι	ΙΙ	Ι	ΙΙ
	Лейкоцитограмма, %%:
Эоз	3,1±0,3xx	1,4±0,1	1,8±0,1х	1,5±0,2	1,7±0,3	1,3±0,2
Баз	0,5±0,2	-	0,1±0,05	-	-	-
Нейтроф.: ММ(юные)	7,3±0,1хх	3,2±0,2x	5,5±0,3xx	1,4±0,1ха	2,7±0,2x	1,5±0,3
ПЯ	13,4±0,2хх	8,2±0,5xa	10,6±0,4x	3,5±0,3ха	4,8±0,4x	3,2±0,5
СЯ	49,6±1,3хх	31,9±2,0x	37,7±1,5x	28,1±1,3ха	33,6±1,7	29,6±2,8
Лф	23,8±1,1хх	52,8±1,5x	41,7±1,4хх	63,2±2,5	55,7±3,1	62,2±2,3
Мон	2,3±0,2	2,5±0,1	2,6±0,2	2,3±0,1	2,5±0,2	2,2±0,1
Лейк., 109/л	11,4±0,3хх	8,5±0,5	9,3±0,4	8,1±0,3	9,0±0,4х	7,9±0,2
ФАН, %	41,4±1,1ххх	53,5±1,3хх	47,8±1,6ххх	67,8±1,5хха	58,7±1,4х	71,6±1,5
ФИ	3,8±0,3хх	6,6±0,5	5,1±0,2хх	8,2±0,3х	7,1±0,8	6,9±0,5
НСТ, СВ%	12,9±0,2хх	8,7±0,3ха	11,2±0,2хх	7,9±0,6	8,3±0,5х	6,5±0,4
НСТ, АВ%	46,3±1,4ххх	54,7±1,5х	50,3±1,3хх	66,8±1,5ха	61,3±1,2х	68,5±0,4
ИПКМН	5,8±0,4ххх	11,0±0,6х	8,2±0,5хх	13,8±0,9х	11,0±0,3хх	16,4±0,8
БАСК, %	31,8±1,2хх	44,6±1,1хха	37,1±1,3хх	62,9±2,7ха	55,6±1,8хх	71,5±1,7
ЛАСК, кг/мл	5,3±0,1	7,4±0,3ха	5,2±0,2	8,2±0,4х	6,8±0,6х	10,1±0,5
Компл. активность, %	8,4±0,2	12,7±0,4ха	10,6±0,2хх	16,9±0,5хха	13,5±0,3хх	17,8±1,5

Примечание: х - р<0,05; хх - р<0,01; ха – достоверность различий по сравнению с контролем и между Ι и ΙΙ группами;

СВ и АВ – спонтанный и активированный варианты НСТ-теста; ИПКМН – интегральный показатель кислородзависимого метаболизма нейтрофилов; БАСК, ЛАСК - бактерицидная, лизоцимная активность сыворотки крови: ФАН, ФИ – фагоцитарная активность, фагоцитарный индекс.

Анализ лейкоцитограммы показал, что в I группе через 5-10 суток относительно раньше ослабевал нейтрофилез при нарастании процента лимфоцитов и снижение такового эозинофилов. При этом, как видно из данных табл. 2, у больных диареей телят существенно ослабевала ФАН -фагоцитарная активность нейтрофилов, которая в контроле не достигала нормативных величин даже через 10-12 суток. Интенсивность фагоцитоза ПЯН, определяемая по фагоцитарному индексу, резко ослабевала у больных животных, восстанавливаясь в I группе через 5, а во II - через 10 суток. Кислородзависимая цитотоксичность по НСТ-тесту этих клеток крови у больных телят оказалась гораздо ниже, чем у здоровых животных (р<0,01), что нашло свое объективное подтверждение в величинах ИПКМН (табл. 2). Комплексное лечение (Ι группа) способствовало более раннему снижению функционального раздражения ПЯН в СВ НСТ-теста по отношению ко II группе (р<0,05), а через 10-12 суток практически уже отсутствовало у телят I группы, тогда как во II-ой еще обнаруживалось его присутствие. То же самое проявлялось и в отношении процента позитивно реагирующих ПЯН в АВ НСТ-теста. Если в I группе наступала нормализация этого показателя, то во II-ой он был достоверно ниже (р<0,05) по сравнению с опытом и клинически здоровыми животными. Иными словами кислородзависимый потенциал микробицидности ПЯН на фоне комплексной терапии восстанавливался гораздо раньше, чем в контроле, по-видимому, как за счет повышении уровня внеклеточного кальция, так и за счет позитивного влияния новокаиновой блокады по В.В.Мосину, тесно связанной, как известно, с ее воздействием на адренергические механизмы регуляции функций нейтрофилов [3, 7].

Гуморальное звено неспецифической защиты у больных телят-гипотрофиков оказалась гораздо слабее, чем у клинически здоровых телят-аналогов (нормотрофиков). Например, бактерицидная активность сыворотки крови (табл. 2) во ΙΙ группе более чем в 2 раза ниже по сравнению с нормой. В I группе она существенно возрастала уже с 5-х суток, но оставалась меньше нормальных значений на 10 сутки, хотя была достоверно выше, чем в контрольной (р<0,05). С начала срока наблюдений слабо выраженные изменения уровня лизоцима (ЛАСК) регистрировались в обеих группах подопытных телят, но, судя по табличным данным, через 5 суток в I группе этот показатель оказался выше, чем во II-ой группе (р<0,05) Однако в дальнейшем (10 сутки) достоверных межгрупповых различий не установлено. При этом в обеих группах концентрация лизоцима оставалась пониженной по сравнению с клинически здоровыми телятами-аналогами. Как видно из данных табл. 2, комплементарная активность сыворотки крови у больных животных в начале лечения была ниже относительной нормы в 2 раза, а затем постепенно нарастала в той и другой группах. В отличие от контроля в опытной группе этот процесс протекал гораздо активнее, как через 5, так и через 10 суток с начала опытов (р<0,01). Причем в Ι группе она оказалась практически равной таковой у клинически здоровых телят-аналогов (р>0,05).

Учитывая вышеприведенные фактические данные, можно констатировать, во-первых, факт депрессивного влияния гипотрофии и диарейного синдрома на клеточные и гуморальные факторы неспецифической защиты организма подопытных телят. Во-вторых, можно заключить, что при этом резко ослабевали механизмы фагоцитоза и кислородзависимой цитотоксичности ПЯН, бактерицидные свойства сыворотки крови у больных телят-гипотрофиков. В-третьих, как видно из материалов представленной работы, комплексная терапия таких животных, благоприятно влияет на все органы и системы, сокращая при этом не только сроки выздоровления на 2,2 сут. по сравнению с контролем, но и имела достаточно высокую лечебную эффективность (соответственно 91,8 и 83,6 % в опыте и контроле).

ЛИТЕРАТУРА: 1. Авакаянц, Б.М. Опыт лечения и профилактика энтерита /Б.М.Авакаянц //Ветеринария, 1997. - №9. - С. 34-36. 2. Анохин, Б.М. Комплексное лечение телят при гипотрофии /Б.М.Анохин, Л.А.Саврасов// Ветеринария, 2004. - №1. - С. 52-54. 3. Галкин, А.А. Роль Са2+ в регуляции функции нейтрофилов /А.А.Галкин, В.С.Демидова// Успехи соврем. биол., 2007. - т. 127. - №1. - С. 5 8-72. 4. Кондрахин, И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: Справочник /Под ред. проф. И.П.Кондрахина. - М.: КолосС, 2004. - 520 с. 5. Митюшин, В.В. Диспепсия новорожденных телят /В.В.Митюшин. - М.: Россельхозиздат, 1979. - 110 с. 6. Мищенко, В.А. Структура заболеваний пищеварительной системы новорожденных телят /В.А.Мищенко [и др.]//Ветеринария Кубани, 2008. - № 5. - С. 22-23. 7. Орлова, Е.Г.

Молекулярные механизмы адренергического контроля функций фагоцитирующих клеток /Е.Г.Орлова, С.В.Ширшев //Успехи соврем. биол., 2004. - т. 124. - №4. - С. 342-353. 8. Самохин, В.Т. Оптимизация метаболического статуса коров-матерей - основа профилактики неонатальных болезней телят /В.Т.Самохин, М.И.Рецкий, В.И.Шушлебин //Актуальн. пробл. болезней молодняка в соврем. условиях: м-лы междунар. науч.-практ. конф. 23-25 сентября 2002. - Воронеж: Изд-во ВГУ, 2002. - С. 37-38. 9. Сулейманов, С.М. Патогенез незаразных болезней пищеварительной системы у новорожденных телят /С.М.Сулейманов, П.А.Паршин, В.С.Слободяник //Ветеринария, 2011. - №9. - С. 49-54.

КОРРЕКЦИЯ ИММУНОМЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ ПРИ КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ ДИАРЕИ У НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ-ГИПОТРОФИКОВ

Гундоров М.А., Пахмутов И.А., Петрова О.Ю.

Резюме

Результаты исследований, показали, что у новорожденных телят- гипотрофиков на фоне функциональной диареи снижены уровень общего белка, альбуминов, глобулинов, а также показатели фагоцитоза ПЯН, их кислородзависимой бактерицидности, активности ферментов ЩФ, АсАТ, АлАт.

CORRECTION IMMUNOMETABOLIC DISORDERS BY COMPLEX THERAPY DIARRHEA OF NEWBORN CALVES WITH HIPOTHROPHIA

Gundorov M.A., Pahmutov I.A., Petrova O.Y.