Корригирующее влияние дигидрокверцетина на состояние окислительного метаболизма у больных сахарным диабетом 2 типа, проживающих на севере

Введение. Сахарный диабет (СД) – хорошо известная гетерогенная группа метаболических нарушений, вызываемых как нарушением действия инсулина, так и снижением его выработки. Растущая распространенность диабета в России и во всем мире стала предметом серьезной глобальной озабоченности [1, 2].

Стойкая гипергликемия при СД вызывает образование активных форм кислорода (АФК), являющихся существенным фактором риска развития макро- и микрососудистых осложнений при СД [3]. Известно, что наряду с гиперпродукцией АФК происходит снижение активности антиоксидантных ферментов, вызывающее эндотелиальную дисфункцию и инсу-линорезистентность [4, 5].

Одним из способов предотвращения активации процессов перекисного окисления ли- пидов (ПОЛ) является применение антиоксидантов, способных тормозить процесс свободнорадикального окисления [6–8]. Дигидрокверцетин (ДГК) – биофлавоноид, полученный из древесины лиственницы сибирской и даурской, обладающий широким спектром действия, в т.ч. имеющий высокую антиради-кальную активность [9–11]. Доказаны антиоксидантные, капилляропротекторные, гепато-протекторные, гиполипидемические и диуретические свойства ДГК.

Материалы и методы. Обследовано 132 взрослых некоренных жителя г. Ханты-Мансийск, в т.ч. 78 чел., страдающих СД 2 типа (основная группа), и 54 здоровых добровольца (контрольная группа). В образцах их крови исследовались показатели про- и антиоксидантной активности. Проводилось, в частно- сти, определение содержания продуктов ПОЛ: гидроперекиси липидов (ГПл) с помощью тест-наборов фирмы ВСМ Diagnostics (Германия), тиобарбитуровой кислоты активных продуктов (ТБК-АП) с помощью тест-наборов фирмы «АГАТ» (Россия); изучалось состояние антиоксидантной системы (АОС): определялись общая антиоксидантная активность (ОАА) и тиоловый статус (ТС) с использованием коммерческих наборов фирм Cayman Chemical, Immundiagnostik AG (Германия). Коэффициент окислительного стресса (КОС) рассчитывался по формуле КОС=ГПл×ТБК-АП/ОАА×ТС.

Концентрация витамина Е определялась флуорометрическим методом с использованием биохимического анализатора «Флюо-рат 02 – АБЛФ» фирмы «Люмекс» (Россия); концентрация витамина С – с использованием тест-наборов фирмы Immundiagnostik AG (Германия) на анализаторе фирмы Personal Lab (Италия).

Методом случайной выборки из числа лиц, страдающих СД 2 типа (78 чел.), была выделена группа из 48 чел., которые фоне стандартной сахароснижающей терапии в течение 12 нед. принимали препарат «Дигидрокверцетин Байкальский» (свидетельство государственной регистрации № RU.77.99.88.003.Е.002700.06.17; ТУ 10.89.19-001-168222879-2017, фирма-производитель ООО «КАХОР-ПРОДУКТ», Россия) по 1 капсуле (60 мг) в день после еды.

Полученный цифровой материал статистически обрабатывался с использованием пакета программ Statistica 10.0 и MS Excel 2013. Вычислялись среднее арифметическое (М) и среднеквадратичное отклонение (σ). Достоверными считались различия изучаемых параметров при значениях p<0,05 с применением критерия Фишера–Стьюдента.

Настоящее исследование проводилось с соблюдением этических норм, изложенных в Хельсинкской декларации и Директивах Европейского сообщества (8/609ЕС). От всех обследуемых получено информированное добровольное согласие. Исследование одобрено локальным этическим комитетом Ханты-Мансийской государственной медицинской академии (протокол № 125 от 06.10.2017).

Результаты и обсуждение. При оценке состояния процессов ПОЛ до коррекции био- антиоксидантом дигидрокверцетином было установлено, что у всех обследуемых лиц с СД (n=78) средние значения содержания ГПл существенно превышали физиологически оптимальные значения. Кроме того, показатели ГПл у лиц основной группы достоверно отличались от таковых у лиц контрольной группы (p<0,001). Аналогичная картина наблюдалась при оценке концентрации вторичных продуктов ПОЛ – ТБК-АП.

Средние значения показателей активности АОС у представителей обеих групп были ниже физиологической нормы. При этом статистически значимые отличия от нормальных значений наблюдались в группе с СД 2 типа (ОАА – р<0,001; ТС – р=0,04).

Значения концентрации витаминов-анти-оксидантов Е и С у всех обследуемых лиц основной и контрольной групп находились в пределах физиологической нормы, но оказались достоверно ниже у больных СД 2 типа (р=0,03 и р=0,001 соответственно).

Коэффициент окислительного стресса превышал допустимые физиологические значения в обеих группах: среди лиц с СД 2 типа – в 8 раз, в группе контроля – в 1,3 раза. При этом наблюдалось достоверное различие между группами (р<0,001).

В табл. 1 представлено распределение лиц основной и контрольной групп по степени изменения показателей ПОЛ и АОС до коррекции дигидрокверцетином.

В результате исследования установлено, что прием ДГК в течение 12 нед. способствовал достоверному снижению содержания как первичных, так и вторичных продуктов ПОЛ, что является свидетельством антиоксидантного действия данного препарата (табл. 2).

Наиболее мощный окислитель, образующийся в биологических системах, – гидроксильный радикал. Он способен атаковать любую биологическую молекулу. Стадия инициации перекисного окисления липидов наступает, когда гидроксильные радикалы атакуют полиненасыщенные жирные кислоты, вызывая свободнорадикальное окисление полине-насыщенных жирных кислот в биологических системах.

Известно, что первичные продукты ПОЛ неустойчивы, их распад приводит к появле- нию разнообразных вторичных и конечных продуктов ПОЛ, представляющих собой высокотоксичные соединения, которые оказывают повреждающее действие на мембраны и клеточные структуры [12, 13].

Результаты исследования состояния АОС показали увеличение ОАА в 1,7 раза (р<0,001) и повышение ТС почти в 1,1 раза (р=0,04) после приема биофлавоноида дигидрокверцетина в течение 12 нед. (табл. 2).

Общая антиоксидантная активность является одним из ключевых параметров, определяющим буферную ёмкость системы антиоксидантной защиты. Показано, что у лиц, страдающих СД 2 типа, снижение ОАА связано с ингибированием экспрессии супероксиддис-мутазы [14]. В нашем исследовании показатель ОАА был также достоверно (р<0,001) выше в группе без СД по сравнению с группой больных СД до приема ДГК (табл. 2).

Таблица 1

Table 1

Распределение обследованных лиц по степени изменения показателей ПОЛ – АОС, абс./%

Distribution of the trial subjects according to the changes in the LPO – AOS system, abs/%

Показатель Parameter	В пределах физиологически оптимальных значений Physiologically optimal values		Ниже оптимальных величин Below optimal values		Выше оптимальных величин Above optimal values
	СД Patients with diabetes mellitus (n=78)	без СД Patients without diabetes mellitus (n=54)	СД Patients with diabetes mellitus (n=78)	без СД Patients without diabetes mellitus (n=54)	СД Patients with diabetes mellitus (n=78)	без СД Patients without diabetes mellitus (n=54)
ГПл HPs	-	9/17	-	-	78/100	45/83
ТБК-АП TBA-AP		47/87,0			78/100	7/13,0
ОАА, ммоль/л TAS, mmol/l	-	48/88,9	78/100	6/11,1	-	-
ТС, ммоль/л TS, mmol/l	8/10,3	45/83,3	70/89,7	9/16,7	-	-
КОС, у.е. OSC, RU	-	26/48,1	-	-	78/100	28/51,9
Вит. Е, мг/мл Vitamine E, mg/ml	14/17,9	43/79,6	64/82,1	11/20,4	-	-
Вит. С, мг/мл Vitamine С, mg/ml	15/19,2	45/83,3	63/80,8	9/16,7	-	-

Таблица 2

Table 2

Влияние антиоксиданта дигидрокверцетина на состояние окислительного метаболизма у пациентов с СД 2 типа, проживающих в г. Ханты-Мансийск

Impact of dihydroquercetin on oxidative metabolismin patients with type 2 diabetes mellitus living in Khanty-Mansiysk

Показатель Parameter	Физиологически оптимальные величины Physiologically optimal values	Пациенты без СД 2 типа (n=54) Patients without type 2 diabetes mellitus (n=54)	Пациенты с СД 2 типа (n=48) Patients with type 2 diabetes mellitus (n=48)		р
			до приема ДГК before dihydroquercetin intake	после приема ДГК after dihydroquercetin intake
ГПл HPs	225–450	468,6±21,2	562,4±22,1	473,6±15,6	*р=0,002, **р=0,001
ТБК-АП TBA-AP	2,2–4,8	2,5±2,18	5,1±2,14	4,3±2,15	*р<0,001, **р<0,001
ОАА, ммоль/л TAS, mmol/l	0,5–2,0	0,88±0,06	0,43±0,03	0,76±0,04	*р<0,001, **р<0,001
ТС, ммоль/л TS, mmol/l	430–660	428,5±19,4	378,2±9,9	405,9±9,73	*р=0,02, **р=0,04
КОС, у.е. OSC, RU	1,6–2,3	3,1±0,34	17,9±2,4	6,5±1,7	*р<0,001, **р<0,001
Вит. Е, мг/мл Vitamine E, mg/ml	5–18,0	4,8±0,21	4,3±0,26	4,6±0,19	*р=0,137, **р=0,353
Вит. С, мг/мл Vitamine С, mg/ml	4–15,0	5,9±0,46	4,1±0,32	4,5±0,27	*р<0,001, **р=0,341

Примечание. *р – достоверность различий между контрольной группой и основной группой до приема ДГК; **р – достоверность различий между основной группой до приема ДГК и основной группой после приема ДГК.

Note. *р – significance of differences between the control and main groups before dihydroquercetin intake; **p – significance of differences between the main group before dihydroquercetin intake and the main group after dihydroquercetin intake.

Кроме того, отмечено незначительное повышение в крови концентраций витаминов-антиоксидантов Е и С, однако достоверных различий выявлено не было (табл. 2).

Доказано, что антиоксиданты истощают АФК, препятствуя их функционированию [18, 19]. Действие эндогенных антиоксидантов, таких как супероксиддисмутаза, каталаза и глутатионпероксидаза, происходит совместно с экзогенными веществами (витамины А, C, E, β-каротин, флавоноиды, селен, цинк,

N-ацетилцистеин, коэнзим Q10, L-карнитин и др.) [20].

Витамин С, или аскорбиновая кислота, – водорастворимый антиоксидант, содержащийся в основном во фруктах и овощах. Он является важным кофактором в синтезе коллагена, карнитина и катехоламинов [21]; действует как мощный антиоксидант, регулируя внутриклеточное восстановление глутатиона и удаляя свободные радикалы; необходим как соантиоксидант для витамина E [22].

Витамин Е – это жирорастворимый витамин, представленный в основном в форме α-то-коферола. Он действует как поглотитель пе-роксильных радикалов в липидных фазах, таких как мембраны и ЛПНП, и таким образом ингибирует перекисное окисление липидов за счет собственного превращения в α-токофе-роксильный радикал, который может в дальнейшем реагировать с липидами, и, наоборот,

способствует образованию липидных радикалов [22]. Следовательно, для его антиоксидантного действия необходим соантиоксидант, которым является витамин С. Антиоксидантный эффект витамина Е заключается и в стимуляции активности глутатионпероксидазы [22].

В результате исследования было установлено, что прием ДГК способствует нормализации углеводно-липидного обмена (табл. 3).

Таблица 3

Table 3

Влияние антиоксиданта дигидрокверцетина на состояние углеводно-липидного профиля у обследованных лиц г. Ханты-Мансийск, страдающих сахарным диабетом 2 типа

Impact of dihydroquercetin on carbohydrate-lipid profilein trial subjects with type 2 diabets mellitus living in Khanty-Mansiysk

Показатель Parameter	Физиологически оптимальные значения Physiologically optimal values	Пациенты без СД 2 типа (n=54) Patients without type 2 diabetes mellitus (n=54)	Пациенты с СД 2 типа (n=48) Patients with type 2 diabetes (n=48)		р
			До приема ДГК before dihydroquercetin intake	после приема ДГК after dihydroquercetin intake
Глюкоза, ммоль/л Glucose, mmol/l	3,5–6,1	4,4±0,16	8,9±1,01	6,2±0,9	*р<0,001, **р=0,04
HbA1С, %	4,8–5,9	5,1±0,03	8,2±0,75	6,03±0,53	*р<0,001, **р=0,02
ОХС, ммоль/л TCL, mmol/l	3,1–5,2	4,7±0,1	6,68±0,7	5,09±0,25	*р=0,006, **р=0,03
ТГ, ммоль/л TG, mmol/l	0,6–1,7	1,1±0,2	2,4±0,25	1,6±0,2	*р<0,001, *р=0,014
ЛПНП, ммоль/л LDL, mmol/l	2,0–3,0	2,3±0,2	3,64±0,21	3,07±0,1	*р<0,001, **р=0,016
ЛПВП, ммоль/л (мужчины) HDL, mmol/l, (males)	>0,9	1,3±0,03	0,81±0,06	1,19±0,09	*р<0,001, **р<0,001
ЛПВП, ммоль/л (женщины) HDL, mmol/l, (females)	>1,1	1,4±0,07	1,01±0,04	1,25±0,02	*р<0,001, **p<0,001
ИА, у.е. AI, RU	<3	2,28±0,06	4,8±0,5	3,1±0,5	*р<0,001, **р=0,018

Примечание. *р – достоверность различий между контрольной группой и основной группой до приема ДГК; **р – достоверность различий между основной группой до приема ДГК и основной группой после приема ДГК.

Note. *р – significance of differences between the control and main groups before dihydroquercetin intake; **p – significance of differences between the main group before dihydroquercetin intake and the main group after dihydroquercetin intake.

После приема ДГК отмечено достоверное снижение концентрации глюкозы в крови натощак по сравнению с показателями до начала применения ДГК (р=0,04), однако физиологически оптимальных значений достигнуто не было.

Аналогично снижению показателей углеводного профиля наблюдалась тенденция к снижению показателей липидного профиля (табл. 3).

Кроме того, по результатам анкетирования отмечено улучшение качества жизни пациентов. Помимо снижения побочных клинических проявлений СД 2 типа (жажда, сухость кожного покрова и слизистых оболочек, полиурия, особенно в ночное время) на фоне стандартной антидиабетической терапии, установ-

лено улучшение общего состояния, нормализация сна, снижение частоты и интенсивности головной боли.

Заключение. Таким образом, коррекция метаболического статуса с применением в течение 12 нед. антиоксиданта растительного происхождения «Дигидрокверцетин Байкальский» способствовала достоверному ослаблению процессов ПОЛ (снижению содержания первичных и вторичных продуктов: гидроперекисей липидов и тиобарбитуровой кислоты активных продуктов), повышению активности АОС (повышению общей антиоксидантной активности и тиолового статуса), а также снижению показателей углеводного-липидного профиля у лиц г. Ханты-Мансийск, страдающих сахарным диабетом 2 типа.