Костный мозг, его состав и структура в сравнении у диких жвачных и сельскохозяйственных животных

Введение. Изучению влияния биологически активных препаратов на механизмы специфической и неспецифической резистентности организма и их коррекции в настоящее время уделяется все больше внимание. Актуальным вопросом является использование костного сырья, так как клетки костного мозга выполняют функцию иммуномодуляторов [4]. Костный мозг – основной орган гемопоэза, в нем находится самопод-держивающаяся популяция стволовых клеток [2]. Полипотентные стволовые клетки производят несколько общих клеток-предшественников, которые затем дифференцируются на клетки эритроидного, гранулоцитарного, мегакариоцитарного и агранулоцитарного рядов. Для того чтобы знать, в каких участках клеток нахо- дятся биологически активные вещества, необходимо знать их структуру [5]. Наиболее полное представление о состоянии кроветворной системы дает цитологическое исследование костного мозга [1].

В литературных источниках можно найти информацию о цитологическом составе костного мозга сельскохозяйственных животных [3], но данных по изучению костного мозга диких жвачных животных мало. Костный мозг сибирской косули Амурской области не изучался, поэтому целью нашего исследования стало изучение морфологической структуры костного мозга сибирской косули, определение нормативных величин и сравнение с показателями сельскохозяйственных видов животных (крупный рогатый скот, мелкий рогатый скот).

Материалы и методы исследований. Материалом для данного исследования послужили клеточные популяции костного мозга сельскохозяйственных животных (коров (3), коз (3) и свободноживущих животных (сибирской косули (3)), возраст которых варьировал от 8 до 12 месяцев. Мазки костного мозга готовили общепринятым методом, их окрашивание проводили по методу Паппенгейма. Фиксированные и окрашенные мазки костного мозга исследовали сначала под малым увеличением (ок. 15, об. 10), чтобы установить качество приготовленных мазков и получить общее представление о насыщенности клетками, а затем с иммерсионной системой под большим увеличением (ок. 15, об. 90). Клетки считали по методу Н.А. Аринкина, то есть подсчитывали подряд все попадающиеся клетки в разных участках мазка общим количеством не менее 500, а затем выводили процентное соотношение клеток.

Результаты исследования. Исследование препаратов под малым увеличением позволило установить, что мазки костного мозга хорошо просматриваются, клетки которого четко окрашены и препараты богаты клеточными элементами. При этом проводили дифференцированный подсчет миелокариоцитов.

При большом увеличении частицы костного мозга выглядят как окрашенные в синий цвет участки, которые содержат сосуды, клетки стромы, плазматические клетки и предшественники клеток крови. В пределах единичной частицы определили процентные доли пространства, занятого гемическими клетками (т.е. темно-синими) и жиром (круглые и овальные светлые области). Доля пространства занятая клетками составляет от 40 до 65%, жиром от 35 до 60%.

Путем наблюдения общей клеточной насыщенности установили, что все препараты костного мозга с нормальной клеточной насыщенностью, так как имеют намного больше отдельных ядерных клеток и включают незрелые формы.

Изучение клеточного состава костного мозга сельскохозяйственных и свободноживущих животных (табл. 1) по содержанию миелобластических клеток показало, что большее количество клеток миелобласти-ческого ряда содержалось в костном мозге крупного рогатого скота – 47,8%, у коз меньше на 2,9%, у сибирской косули на 4,9 %. Однако анализ клеточного состава позволил выявить некоторые особенности. У коровы обнаружилось большее содержание в костном мозге молодых форм клеток, чем у домашней козы, у которой отмечается больше зрелых клеток. У сибирской косули промиелоцитов меньше, чем у коров на 0,3%, а миелоцитов на 1,7%, но больше, чем у коз, на 0,2 и 0,6% соответственно. Метамиелоцитов в костном мозге коров больше, чем у сибирской косули, на 1,9%, а у коз этот показатель ниже на 2,2 % (разница показателей достоверна). Содержание эозинофилов у сибирской косули наблюдается в меньшем количестве (P<0,05) чем у коров и коз, а содержание базофилов в большем количестве и составляет 0,5 %.

Клеточный состав костного мозга различных видов животных

Таблица 1

Окончание табл. 1

*P<0,05; **P<0,01; ***P>0,05 - показатели различий результатов.

Проведя сравнение по эритробластическому ряду, можно отметить, что наибольшее содержание клеток отмечается у коз (46,8%) и у сибирской косули (46,6%) (различия достоверны). Из всех представленных клеток эритроидного ряда наиболее ценными для иммунологии являются эритробласты, в клетках которых имеется комплекс Гольджи, необходимый для синтеза глобулинов, и при анализе данных наибольшее их количество наблюдается у сибирской косули и составляют 0,7%, что подтверждается статистически (P<0,05).

Моноциты образуют самостоятельную клеточную линию мононуклеарной фагоцитирующей системы и в тесном взаимодействии с лимфоцитами выполняют ведущую роль во всех видах иммунных реакций, а плазмоциты синтезируют различные классы иммуноглобулинов. Поэтому содержание этих клеток в костном мозге очень важно при подборе материала для приготовления иммуностимулирующих препаратов.

Изучение особенностей состава костного мозга по содержанию клеток моноцитарного и лимфоцитарного ростка диких жвачных и сельскохозяйственных животных в сравнении показало, что лимфоцитов и моноцитов у коров больше, чем у сибирской косули, на 5,2 и 1,0% соответственно, меньшее их количество наблюдается у коз. Количество ретикулярных клеток сибирской косули больше, чем у коров, на 0,9% и больше, чем у коз, на 0,2%. Количество плазматических клеток наблюдается у коров (0,8%), это больше, чем у сибирской косули и коз, на 0,3 и 0,4% соответственно.

При исследовании костного мозга, кроме количества подсчитанных клеток, необходимо производить расчет индексов соотношения между молодыми и зрелыми формами клеток. Результаты расчетов (табл. 2) показали, что индексы соотношения у коров выше, то есть количество молодых форм клеток в процентном соотношении больше, чем у коз и сибирской косули, что связано с индивидуальными особенностями организма. У сибирской косули эти показатели ниже, но находятся в пределах физиологической нормы и показывают нормальную степень зрелости клеток костного мозга.

Индексы соотношения между молодыми и зрелыми формами

Таблица 2

*P<0,05; **P<0,01 - показатели различий результатов.

Заключение. Таким образом, цитологическое исследование костного мозга животных позволило дополнить морфологические характеристики клеток костного мозга сибирской косули, сравнить данные показатели с сельскохозяйственными видами животных, определить их степень зрелости и функциональную активность.

Клеточный состав костного мозга каждого вида животных имеет свои особенности. В миелограмме крупного рогатого скота преобладающим являются лимфоциты (12,1%) и миелограмма лимфоцитарного характера. У сибирской косули количество лимфоцитов меньше (6,9%), но преобладает количество эритробластов (0,7%), то есть можно утверждать, что у коров и диких жвачных животных цитологический состав костного мозга достаточно разнообразен и перспективен в плане использования в ветеринарной практике. Таким образом, для получения стимуляторов антигенных популяций целесообразно брать клеточные популяции сибирской косули и коров, содержащие наибольшее количество иммунокомпетентных клеток, таких как лимфоциты, плазматические клетки и эритробласты.