Лабораторная диагностика HHV 6 инфекции на фоне иммуносупрессии

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА HHV 6 ИНФЕКЦИИ НА ФОНЕ ИММУНОСУПРЕССИИ

Введение. Описано несколько типов V 6 инфекции: первичная, латентная (без ви-ремии)и активная инфекция вследствие реактивации. Различают две формы латентной инфекции V 6. Первая — персистенция вируса в эписомальном виде, когда геном вируса находится в ядре инфицированной клетки в виде кольцевой ковалентно-замкнутой молекулы ДНК. Второй, более редкий тип латентной инфекции — интегрирование вирусного генома в теломеры хромосом хозяина посредством рекомбинации с вирусными ТТАGGG-повторами, расположенными на концевых участках генома. Вирусная ДНК в этом случае в ядросодержащих клетках обнаруживается в высокой концентрации порядка 1–3 генома на клетку (или более 1 6–1 7 копий/1 6 клеток). При активной V 6-инфекции вирусная нагрузка колеблется в пределах 1 4–1 5 копий/1 6 клеток, что может быть ошибочно расценено,как интегративная форма инфекции.

Так, при выявлении высокой концентрации ДНК V 6 в цельной крови, всегда возникает вопрос о дифференциации между активной репликацией и интеграцией. Выявление ДНК V 6 в плазме крови может указывать на лизис зараженных клеток, что свидетельствует об активной инфекции, хотя не исключена возможность наличия некоторого количества ДНК из-за разрушения клеток, содержащих вирусные эписомы в процессе их обработки или спонтанного лизиса. Нарастание титра иммуноглобулинов не всегда указывает на реактивацию, возможно выявление перекрестно реагирующих антител к другим герпесвирусам, особенно к V 7.

Цель . Определить типы V 6 инфекции (латентная, активная, интегрированная?) у больных на фоне иммуносупрессии.

Материалы и методы . В плазме крови 98 пациентов ГНЦ с гемобластозами и апластической анемией, в лейкоцитах периферической крови (ЛПК) которых была обнаружена ДНК V 6, определяли концентрацию ДНК

V 6 и наличие анти- V 6 IgG. Все пациенты находились на разных стадиях лечения основного заболевания, но в состоянии иммуносупрессии. Измерение концентрации ДНК проводили в лейкоцитах, выделенных из периферической крови,и в плазме крови. Вирусную нагрузку выражали в копиях геном-эквивалент на 1 5 ядросодержащих клеток (коп/1 5 кл) или на 1 мл плазмы (коп/мл) соответственно. Были использованы наборы реагентов отечественного производства.

Результаты . У большей части больных, включенных в исследование (67,3 %, 66

из 98), ДНК V 6 была обнаружена только в ЛПК, но не в плазме крови. Концентрация вирусной ДНК в этих образцах находилась на пределе чувствительности теста (менее 5 коп/1 ⁵ кл). Данное сочетание с высокой степенью вероятности указывало на латентную эписомальную форму V 6-инфекции. В образцах, где ДНК V 6 была обнаружена так же и в плазме крови, концентрация вирусной ДНК варьировала в широком диапазоне как в клетках, так и в плазме (в ЛПК от менее 500 до 1,7 х 10 5 коп/10⁵ кл и в плазме — от менее 500 до 1,3 х 10 5 коп/мл). При этом в большей части этих образцов (62,5 %, 2 из 32) концентрация в плазме находилась в области высоких значений (от 1,1 х 10³ до 1,3 х 10 5 коп/ мл). Таким образом, обнаружение в плазме крови ДНК V 6 косвенно указывало на наличие активно реплицирующегося вируса.

У двух больных была зафиксирована высокая виремия (1,5 х 10 5 /10 5 кл и 1,7 х 10 5 /10⁵ кл соответственно), что позволило заподозрить у них интегративную форму инфекции. Однако данное предположение не было подтверждено, поскольку в последующих образцах от этих больных зафиксировано уменьшение концентрации вируса в ЛПК до менее 5 коп/1 ⁵ кл, что невозможно в случае интеграции. Антитела к V 6 класса IgG были выявлены у 84,8 % (56 из 66) больных с персистентной и у 78,1 % (25 из 32) — с активной инфекцией V 6.

Выводы. Выявление в плазме крови ДНК V 6 в любой концентрации косвенно указывает на наличие активно реплицирующегося вируса, в то время как детекция вирусного генома только в клетках крови с высокой степенью вероятности указывает на латентную эписомальную форму V 6-инфекции. У больных, включенных в исследование, на фоне иммуносупрессии активная форма

V 6-инфекции выявлена в 32,7 % случаев. Интегрированную форму V 6-инфекции обнаружить не удалось.