Лабораторная диагностика хронической и бессимптомной форм африканской чумы свиней

Автор: Середа А.Д., Дубровская О.А., Иматдинов А.Р., Стрижакова О.М., Васильев А.П., Синдрякова И.П., Луницин А.В.

Журнал: Сельскохозяйственная биология @agrobiology

Рубрика: Вирус африканской чумы свиней: персистенция и диагностика

Статья в выпуске: 4 т.51, 2016 года.

Бесплатный доступ

Африканская чума свиней (АЧС, возбудитель - вирус африканской чумы свиней, African swine fever virus, ASFV, семейство Asfarviridae, род Asfivirus ) может протекать сверхостро, остро, подостро, хронически и бессимптомно. В начале эпизоотий болезнь, как правило, проявляется в острой форме, но со временем обычно переходит в хроническую или бессимптомную. Через 7-10 сут после заражения выжившие свиньи вырабатывают вирусоспецифические антитела, которые сохраняются в течение длительного времени. Есть основания предполагать, что в результате многократного пассирования вируса АЧС в популяциях диких кабанов европейских стран в обозримом будущем могут появиться изоляты, вызывающие не острую форму болезни, как в настоящее время, а хроническую или бессимптомную. Нами предпринято сравнительное изучение особенностей лабораторной диагностики хронической и бессимптомной форм АЧС с целью выявления наиболее эффективных методов обнаружения носителей вируса при хроническом или бессимптомном течении инфекции для обоснования тактики диагностических и мониторинговых исследований. Для этого в лабораторных условиях воспроизводили указанные формы болезни, предварительно подобрав соответствующие штаммы или варианты вируса АЧС. Хроническую форму болезни наблюдали у свиньи, которой инокулировали аттенуированный вариант вируса АЧС Ставрополь 01/08 А4С2/9к (после 33-го пассажа) в дозе 106 ГАЕ50. На 5-7-е сут после инокуляции регистрировали характерные для хронической формы инфекции угнетенное состояние и повышение температуры тела животного до 40,5 °С. В сыворотке крови свиньи противовирусные антитела регистрировали с 7-х сут. После ее убоя на 21-е сут в реакции гемадсорбции вирус АЧС в низких титрах был выявлен в пробах тканей селезенки и подчелюстных лимфоузлов, но не обнаруживался в печени и легких. Наличие вирусной ДНК по результатам полимеразной цепной реакции (ПЦР) установили только в пробе ткани подчелюстных лимфоузлов. Во всех исследованных органах методом иммуноблоттинга антитела определялись в титрах 1:20-1:160. В бессимптомной форме АЧС протекала у кабана-сеголетка, которому внутримышечно ввели аттенуированный штамм вируса АЧС МК-200 в дозе 107 ГАЕ50. В сыворотке крови дикого кабана противовирусные антитела регистрировали с 8-х сут. После его убоя на 25-е сут характерных для АЧС патологоанатомических признаков не наблюдали, в пробах исследованных органов вирус АЧС в реакции гемадсорбции и его ДНК по результатам ПЦР не обнаруживались. Вирусоспецифические антитела в пробах печени, селезенки, легких, подчелюстных лимфоузлов определялись в иммуноблоттинге в разведениях 1:40-1:320. Таким образом, возможность выявления антител в пробах селезенки, легких, печени значительно облегчает мониторинг АЧС при проведении ограничительных мероприятий, особенно среди диких кабанов, добытых в охотхозяйствах. Животные, последовательно инфицированные слабовирулентным, а затем вирулентным изолятами вируса АЧС, могут выживать. При этом удается диагностировать болезнь как в ПЦР, так и серологическими методами. Для лабораторной диагностики хронической и бессимптомной форм АЧС, а также проведения мониторинговых исследований следует применять серологические методы.

Еще

Африканская чума свиней, ачс, хроническая и бессимптомная формы болезни, лабораторная диагностика, иммуноблоттинг

Короткий адрес: https://sciup.org/142213952

IDR: 142213952   |   DOI: 10.15389/agrobiology.2016.4.459rus

Список литературы Лабораторная диагностика хронической и бессимптомной форм африканской чумы свиней

  • Dixon L.K., Costa J.V., Escribano J.M., Rock D.L., Vinuela E., Wilkinson P.J. Family Asfarviridae/M.H.V.V. Regenmortel (еd.). London Academic Press, San Diego, CA, 2000: 159-165.
  • Середа А.Д., Балышев В.М. Антигенное разнообразие вируса африканской чумы свиней. Вопросы вирусологии, 2011, 4: 38-42.
  • Макаров В.В., Сухарев О.И., Цветнова И.В. Эпизоотологическая характеристика вируса африканской чумы свиней. Ветеринарная практика, 2013, 1(60): 6-16.
  • Khomenko S., Beltrán-Alcrudo D., Rozstalnyy A., Gogin A., Kolbasov D., Pinto J., Lubroth J., Martin V. African swine fever in the Russian Federation: risk factors for Europe and beyond. EMPRES watch, 2013, 28: 1-14. Режим доступа: http://www.fao.org/docrep/018/aq240e/aq240e.pdf. Без даты.
  • Manual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals. Chapter 2.8.1. African swine fever. Office International des Epizooties, Paris, France, 2012. 7th ed. Режим доступа: http://www.oie.int/fileadmin/Home/fr/Health_standards/tahm/2.08.01_ASF.pdf. Без даты.
  • Sanchez-Vizcaino J.M. African swine fever diagnosis. In: African swine fever/Y. Becker (ed.). Martinus Nijhoff, Boston, USA, 1987: 63-71.
  • Вишняков И.Ф., Митин Н.И., Карпов Г.М., Куриннов В.В., Яшин А.Т. Диагностика и дифференциальная диагностика африканской и классической чумы свиней. Ветеринария, 1991, 4: 28-31.
  • Perez-Filgueira D.M., Gonzalez-Camacho F., Gallardo C., Resino-Talavan P., Blanco E., Gomez-Casado E., Alonso C., Escribano J.M. Optimization and validation of recombinant serological tests for African swine fever diagnosis based on detection of the p30 protein produced in Trichoplusia ni larvae. J. Сlin. Microbiol., 2006, 44(9): 114-3121 ( ) DOI: 10.1128/JCM.00406-06
  • Reis A.L., Parkhouse R.M.E., Penedos A.R., Martins C., Leitão A. Systematic analysis of longitudinal serological responses of pigs infected experimentally with African swine fever virus. J. Gen. Virol., 2007, 88: 2426-2434 ( ) DOI: 10.1099/vir.0.82857-0
  • Середа А.Д., Казакова А.С., Иматдинов А.Р., Колбасов Д.В. Гуморальные и клеточно-опосредованные механизмы иммунитета при африканской чуме свиней. Сельскохозяйственная биология, 2015, 50(6): 709-718 ( , 10.15389/agrobiology.2015.6.709eng) DOI: 10.15389/agrobiology.2015.6.709rus
  • Cubillos C., Gуmez-Sebastian S., Moreno N., Nunez M.C., Mulumba-Mfumu L.K., Quembode C.J., Heath L., Etter E.M.C., Jori F., Escribano J.M., Blanco E. African swine fever virus serodiagnosis: A general review with a focus on the analyses of African serum samples. Virus Res., 2013, 173: 159-167 ( ) DOI: 10.1016/j.virusres.2012.10.021
  • Steiger Y., Ackermann M., Mettraux C., Kihm D.U. Rapid and biologically safe diagnosis of African swine fever virus infection by using polymerase chain reaction. J. Clin. Microbiol., 1992, 30(1): 1-8.
  • Malogolovkin A., Burmakina G., Titov I., Sereda A., Gogin A., Baryshnikova E., Kolbasov D. Comparative analysis of African swine fever virus genotypes and serogroups. Emerging Infectious Diseases, 2015, 21(2): 312-315 ( ) DOI: 10.3201/eid2102.140649
  • Балышев В.М., Калантаенко Ю.Ф., Болгова М.В., Прудникова Е.Ю. Сероиммунологическая принадлежность вируса африканской чумы свиней, выделенного в Российской Федерации. Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук, 2011, 5: 52-53.
  • Казакова А.С., Середа А.Д., Стрижакова О.М., Живодеров С.П., Лыска В.М., Балышев В.М., Моргунов Ю.П., Шубина Н.Г., Хухорова И.Ю., Колбасов Д.В., Гусев А.А. Тест-система для экспресс-диагностики африканской чумы свиней методом иммуноблоттинга с использованием рекомбинантного белка р30. Ветеринария, 2014, 9: 52-56.
  • Afonso C.L., Alcaraz C., Brun A., Sussman M.D., Onisk D.V., Escribano J.M., Rock D.L. Characterization of p30, a highly antigenic membrane and secreted protein of African swine fever virus. Virology, 1992, 189(1): 368-373 ( ) DOI: 10.1016/0042-6822(92)90718-5
  • Колбасов Д.В., Балышев В.М., Середа А.Д. Итоги разработки живых вакцин против африканской чумы свиней. Ветеринария, 2014, 8: 3-8.
  • Балышева В.И., Прудникова Е.Ю., Гальнбек Т.В., Балышев В.М. Иммунобиолгические свойства аттенуированных вариантов вируса африканской чумы свиней, выделенного в Российской Федерации. Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук, 2015, 1-2: 65-69.
  • Ruiz-Gonzalvo F., Carnero M.E., Bruyel V. Immunological responses of pigs to partially attenuated African swine fever virus and their resistance to virulent homologous and heterologous viruses. Proc. CEC/FAO Research Seminar «African Swine Fever», Sardinia, Italy/P.J. Wilkinson (ed.). EUR 8466 EN. Luxemburg, Belgium, Commission of the European Communities, 1981: 206-216.
  • Vigario I.D., Terrinha A.M., Nunes J.F.M. Antigenic relationships among strains of African swine fever virus. Archiv für die gesamte Virusforschung, 1974, 45(3): 272-277 ( ) DOI: 10.1007/BF01249690
  • King K., Chapman D., Argilaguet J.M., Fishbourne E., Hutet E., Cariolet R., Hutchings G., Oura C.A., Netherton C.L., Moffat K., Taylor G., Le Potier M.F., Dixon L.K., Takamatsu H.H. Protection of European domestic pigs from virulent African isolates of African swine fever virus by experimental immunization. Vaccine, 2011, 29: 4593-4600 ( ) DOI: 10.1016/j.vaccine.2011.04.052
  • Непоклонов Е.А., Зеленцов В.А., Реутова Е.Г., Куринов В.В. Накопление вируса, антигенов и патолого-морфологические изменения в органах и тканях животных, привитых аттенуированными штаммами вируса АЧС 4 типа. Мат. науч.-теор. конф. ВНИИВВиМ. Покров, 1981: 242-244.
  • Коромыслов Е.В. Распределение и накопление вакцинного штамма «ФК» вируса АЧС в органах и тканях свиней при различных методах вакцинации. Тез. науч. конф. ВНИИВВиМ. Покров, 1984: 244-246.
  • Котельников А.П., Петров Ю.И., Зеленцов В.А., Реутова Е.Г. Распределение вируса и специфических антигенов у подсвинков, привитых вакцинным препаратом из штамма «МК». Мат. науч.-теор. конф. ВНИИВВиМ. Покров, 1981: 151-152.
  • Петров Ю.И., Котельников А.П., Митин Н.И., Черятников Л.Л., Татаринцева Н.Т. Межведомственная апробация вирусвакцины из штамма МК против АЧС 3 типа концентрированной лиофилизированной. Тез. науч. конф. ВНИИВВиМ. Покров, 1985: 24-27.
  • Mur L., Gallardo C., Soler A., Zimmermman J., Pelayo V., Nieto R., Sánchez-Vizcaíno J.M., Arias M. Potential use of oral fluid samples for serological diagnosis of African swine fever. Vet. Microbiol., 2013, 165(1-2): 135-139 ( ) DOI: 10.1016/j.vetmic.2012.12.034
Еще
Статья научная