Лечебно-профилактическая эффективность пробиотика на основе B. bifidum, апифитопрепарата «Вита-Форце М» и противорадиационного глобулина при экспериментальном колибактериозе на фоне радиоиндуцированной иммуносупрессии

Согласно комплексной программе развития биотехнологий в Российской Федерации на период до 2000 года (утв. Правительством РФ 24.04.2012г. № 1853п-П8) одним из наиболее приоритетных направлений является производство кормовых добавок для сельскохозяйственных животных и производство ветеринарных биопрепаратов. При этом наращивание физических объемов производства кормовых добавок без изменения технологических подходов (переработки отходов сельского хозяйства) станет невозможным.

В России в настоящее время переработке подвергаются не более 30% отходов сельскохозяйственного производства. Среди указанных отходов значительное место занимают отходы пчеловодства – пчелиный подмор, сырьевая база которого составляет до 10 тыс. т в год. Однако этот ценнейший продукт, содержащий мед, пчелиный яд, витамины, гормоны, аминокислоты, микроэлементы, гепарин, глюкозамин, меланин, уксусную кислоту и, главное - хитозан-меланиновый комплекс, используется в весьма ограниченном количестве (около 0,1%), а остальное выбрасывается как отходы производства меда.

Учитывая, что перечисленные компоненты пчелиного подмора обладают антиоксидантным, противоинфекционным, иммуномодулирующим, иммуностимулирующим, антистрессорным, радиопротекторным, антидотным свойствами, сотрудниками ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» была разработана технология получения биологически активной кормовой добавки «Вита-Форце» на основе отходов производства меда и растениеводства, обеспечивающая повышение сохранности молодняка и привесов животных. Однако сложность состава известной добавки и использование в ней ценных лекарственных субстанций (меда, пчелиного яда, перги, обножки и пчелиного расплода) сдерживает широкомасштабное производство кормовой добавки на основе апипродуктов, в частности, пчелиного подмора.

С учетом изложенного нами были проведены исследования по усовершенствованию технологии изготовления кормовой добавки на основе продуктов пчеловодства (пчелиный подмор), животноводства (эритроцитарно-тромбоцитарная масса), растениеводства (хвойная мука) и природного минерала (монтморилонит). Целью настоящей работы является оценка иммуноформакологической активности усовершенствованного препарата «Вита-Форце М» на фоне воздействия на организм иммунодепрессантов и инфекционных агентов.

Материалы и методы. Для оценки антистрессорной и антиинфекционной активности препарата «Вита-Форце М» опыты проводили на 110 белых мышах массой 18-20 г, разделенных на 11 групп по 10 животных в каждой. Моделирование иммунодепрессии у животных осуществляли путем однократного внешнего облучения животных на гамма-установке «Пума» с источником излучений 137 Cs при мощности экспозиционной дозы 2,58∙10-5 А/кг. В качестве эндогенного носителя и амплификатора генетической детерминанты патогенности, индуцирующей колибактериоз поросят, использовали энтеротоксигенный штамм E. coli «КВ1». Моделирование колибактериоза на фоне действия иммунодепрессанта осуществляли путем внутрибрюшинного введения тест-штамма E. coli «КВ1» в дозе 2∙106 м.к./животное сразу же после облучения животных гамма-лучами в дозе 6,0 Гр. В качестве средств антирадиационной и антиинфекционной защиты использовали противорадиационный лечебно-профилактический иммуноглобулин, а в качестве дисбиотика – бифидобактерин, натуральную биологически активную кормовую добавку «Вита-Форце М», а также рекомендованные при отечной болезни средства – «Ветом 2».

Для изучения эффективности испытуемых средств при профилактике и лечении колибактериоза на фоне радиогенного стресса было сформировано 11 групп белых мышей. Животных 1-й группы облучали в дозе 6,0 Гр и сразу же заражали внутрибрюшинно E. coli «КВ1» в дозе 2∙106 м.к./животное (контроль); зараженным и облученным в указанных дозах животным 2-й группы через 5 суток после контамированного радиационно-биологического воздействия однократно подкожно вводили противорадиационный лечебно-профилактический иммуноглобулин (ПРЛГ) в дозе 50 мг/кг (лечебный вариант); животным 3-й группы препарат вводили в аналогичных условиях за 5 суток до комбинированного воздействия (профилактический вариант); животных 4й группы в течение 10 суток до комбинированного воздействия патологических агентов кормили препаратом «Вита-Форце М» из расчета 0,2 г/животное; животных 5-й группы кормили указанным препаратом в течение 10 суток после комбинированного воздействия; животным 6-й группы в течение 10 сут до радиационно-биологического воздействия перорально задавали «Ветом 2» в дозе 20 мг/кг в смеси с кормом (профилактика); животным 7-й группы – аналогичный корм в течение 10 суток после комбинированного воздействия (лечебный вариант); животным 8-й группы – за 5 суток до аналогичного воздействия однократно подкожно вводили радиобифидумбактерин (РББ) в дозе 1∙108 м.к./кг (профилактика): животным 9-й группы – в аналогичных условиях воздействия вводили РББ через 5 суток после комбинированного воздействия (лечение); животным 10-й – за 5 суток до комбинированного воздействия однократное подкожное введение ПРЛГ и в течение 5 суток после комбинированного воздействия кормили «Вита-Форце М»; животным 11-й группы – кормление «Вита-Форце М» за 5 суток до и в течение 5 суток после комбинированного воздействия патологических агентов.

За подопытными животными в период применения препаратов вели наблюдение, учитывая заболеваемость их колибактериозом, падеж, сохранность.

Результаты исследований. Динамическое наблюдение за животными показало, что предварительное облучение животных в сублетальной дозе (6,0 Гр) и последующее заражение их энтеротоксигенным штаммом возбудителя колибактериоза оказывало иммунодепрессивное действие, ускоряя появление клинических признаков заболевания колибактериозом. Уже через 15 ч после заражения на фоне облучения зарегистрирован первый случай падежа мышат и гибель всех животных наступала в период с 1 по 5 суток после воздействия патологических агентов на животных.

Результаты патологоанатомических и бактериологических исследований органов и тканей павших животных потвердили этиологию и диагноз заболевания. Патогномоничные признаки заболевания (катарально-геморрагический гастроэнтероколит) сопровождались обсеменением тонкого отдела кишечника и транслокацией патогенной аутомикрофлоры во внутренние органы, обуславливая бактериемию и септицемии.

Лечебно-профилактическая эффективность препаратов при экспериментальном колибактериозе белых мышей на фоне радиогенной иммунодепрессии (облучение 6,0 Гр),   n=10

№, вариант опыта	Пало	Выжило	Выживаемость, %
1. Заражение E. coli + облучение	10	0	0
2. Лечение зараженных и облученных животных ПРЛГ в дозе 50 мг/кг п/к через 5 суток после комбинированного воздействия	4	6	60
3. Профилактика (за 5 суток до комбинированного воздействия ПРЛГ вводили в аналогичных условиях)	5	5	50
4. Профилактика (кормление животных препаратом «Вита-Форце М» в дозе 0,2 г/животное в течение 10 суток до комбинированного воздействия патологических агентов)	2	8	80
5. Лечение (кормление животных препаратом «Вита-Форце М» в дозе 0,2 г/животное в течение 10 суток после заражения и облучения)	3	7	70
6. Профилактика (кормление препаратом «Ветом 2» в дозе 20 мг/кг в течение 10 суток до заражения и облучения)	6	4	40
7. Лечение (кормление препаратом «Ветом 2» в дозе 20 мг/кг в течение 10 суток после облучения и заражения)	7	3	30
8. Профилактика (1-кратное п/к введение радиобифидумбактерина (РББ) в дозе 1∙108 КОЕ/кг за 5 суток до облучения и заражения)	1	9	90
9. Лечение (1-кратное п/к введение РББ в дозе 1∙108 КОЕ/кг через 5 суток после облучения и заражения)	2	8	80
10. Профилактика (1-кратное п/к введение ПРЛГ и в течение 5 суток кормление «Вита-Форце М» за 5 суток до облучения и заражения)	1	9	90
11. Лечение (через 5 суток после облучения и заражения 1-кратное п/к введение ПРЛГ и кормление «Вита-Форце М» в течение 5 суток)	1	9	90

ПРЛГ – противорадиационный лечебно-профилактический иммуноглобулин, п/к – подкожное введение .

Применение испытуемых средств оказывало модифицирующее действие на течение и исход колибактериоза, вызванного экспериментальным заражением животных на фоне иммунодепрессии, индуцированной радиогенным стресс-фактором. При этом эффект модифицирующего действия испытуемых препаратов зависел как от их природы, так и от схемы применения, что иллюстрируется данными таблицы.

Из данных таблицы видно, что из испытанных 11 схем наиболее эффективными оказались 4, 8, 10 и 11 схемы применения препаратов «Вита-Форце М», радиобифидумбактерина (РББ), противорадиационного лечебно-профилактического иммуноглобулина (парентерально) и «Вита-Форце М» (перорально). При этом профилактический вариант применения указанных препаратов был эффективнее, чем лечебный. Так, кормление животных в течение 10 сут до комбинированного радиационно-биологического поражения препаратом «Вита-Форце М», 1-кратное подкожное введение радиобифидумбактерина за 5 сут до облучения и заражения, 1-кратное введение ПРЛГ и кормление в течение 5 сут «Вита-Форце М» обеспечивали 80 (вариант 4) - 90%-ную (варианты 8 и 10) выживаемость пораженных использованными патологическими агентами животных.

Наиболее высокий лечебный эффект из испытанных средств и схем оказали РББ (вариант 9) и ПРЛГ в сочетании с кормлением животных «Вита-Форце М» (вариант 11), которые обеспечивали выживаемость 80 и 90% животных от отечной болезни на фоне радиоиндуцированного дисбактериоза.

Заключение. Таким образом, парентеральное применение радиомодифицированного пробиотика - радиобифидумбактерина, а также противорадиационного иммуноглобулина в сочетании с пероральным применением апифитопрепарата «Вита-Форце М» обеспечивают высокую профилактическую и лечебную эффективность и сохранность пораженных возбудителем колибактериоза на фоне радиогенного стресса белых мышей.

Однократное подкожное введение радиобифидумбактерина в дозе Ы08 КОЕ/кг за 5 суток до и в течение 5 суток после облучения и заражения способствует выздоровлению и снижает гибель животных от отечной болезни, обеспечивая 80%-ную выживаемость животных. Подкожное введение противорадиационного лечебно-профилактического иммуноглобулина в сочетании с пероральным применением кормовой добавки «Вита-Форце М» значительно повышает выживаемость животных (90%-ная защита) как при профилактическом (1-кратное подкожное введение ПРЛГ и кормление «Вита-Форце М» за 5 суток до комбинированного поражения), так и лечебном (подкожное введение ПРЛГ и кормление указанным препаратом в течение 5 суток после воздействия патологических агентов) применении препаратов.

Радиобифидумбактерин технологичен в применении, легко смешивается с кормом и может быть использован в сухом (порошковом) виде в составе «Вита-Форце М».

Сочетанное (парентеральное и пероральное) применение препаратов глобулина, апифитопрепарата и пробиотика «Радиобифидумбактерин» может быть использовано для экстренной защиты животных на фоне изолированного и комбинированного поражения организма факторами радиогенной (облучение) и инфекционной (колибактериоз) природы.

ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОБИОТИКА НА ОСНОВЕ B. BIFIDUM, АПИФИТОПРЕПАРАТА «ВИТА-ФОРЦЕ М» И ПРОТИВОРАДИАЦИОННОГО ГЛОБУЛИНА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ КОЛИБАКТЕРИОЗЕ НА ФОНЕ РАДИОИНДУЦИРОВАННОЙ ИММУНОСУПРЕССИИ

Низамов Р.Н., Тухфатуллов М.З., Сетдеков Р.А., Иванов А.А., Юсупов Р.Х., Юсупов Р.Р.

Резюме

Описано развитие колибактериоза на фоне радиогенной иммуносупрессии и его модификации под воздействием радиобифидумбактерина,    противорадиационного    глобулина    и апифитопрепарата «Вита-Форце М».

THERAPEUTIC AND PROPHYLACTIC EFFICACY OF PROBIOTIC BASED ON B.

BIFIDUM, АPIPHYTOPREPARATION «VITA-ФОРTSE M» AND RADIATIONPROTECTIVE GLOBULIN IN EXPERIMENTAL COLIBACTERIOSIS ON THE BACKGROUND OF RADIOINDUCTIVE IMMUNOSUPPRESSION

Nizamov R.N., Yuchphatullov M.Z., Setdecov R.A., Yusupov R.Kh.,

Yusupov R.R.