Лимфопролиферативная активность у жителей заполярья

Пролиферативная активность клеток регулируется рядом факторов, в том числе интерлейкинами. IL-1 является фактором роста для Т-лимфоцитов и стимулирует их пролиферацию. Механизм его действия заключается в индукции синтеза IL-2 и IL-4 - ростовых факторов, секретируемых T-хелперами. Кроме того, IL-1 усиливает экспрессию рецепторов к IL-2 и IL-4, что обеспечивает регуляцию пролиферации Т-хелперов. Наибольшая стимулирующая активность IL-i e связана с Т-хелперами 2 типа, продуцирующими IL-4 [1, 2, 3]. Провоспалительные цитокины IL-1 e , IL-6 и TNF a участвуют в реализации воспалительной реакции, усиливают пролиферацию лимфоцитов. Главной мишенью IL-6 служат В-клетки, поскольку он является кофактором их пролиферации. Аналогичные функции принадлежат и TNF a [4-10]. IL-1 e выступает как фактор усиления пролиферации В-клеток и ингибирует синтез цитокинов ТЫ-лимфоцитами [9, 10].

Цель работы - изучить особенности иммунных реакций при повышенном и пониженном уровнях лимфопролиферации.

Материалы и методы исследования. Обследовано 100 человек в возрасте от 20 до 60 лет. Проведено определение содержания в периферической крови лимфоцитов фенотипов CD3 + , CD4⁺, CD5⁺, CD8⁺, CD10 + , CD16 + , CD25 + , CD71 + , CD95 + , HLADR + с помощью непрямой иммунопероксидазной реакции с использованием препаратов лимфоцитов типа «высушенной капли» (реактивы НПЦ «Мед-БиоСпектр», г. Москва). Моноцитограмму определяли по методике О.Н. Григоровой (1958), лимфоцитограмму учитывали по методу И .А. Кассирского, Г.А. Алексеева (1970). Содержание цитокинов (IL-6, TNF a , IL-10, IL-1 e , IFN y ), IgE определяли методом ИФА тест-наборами «BIOSOURCE» (Германия). Учет

Репина Вероника Павловна, кандидат биологических наук, научный сотрудник

результатов проводили на спектрофотометре серии Multiscan MS (Финляндия). Результаты исследования обработаны с использованием пакета прикладных программ «SPSS 11.5» (США). Тип исследования ретроспективный, выборки случайные, одномоментные. Проведено определение границ нормального распределения количественных показателей при помощи критерия Шапиро-Уилка. Достоверность различий между группами оценивали с помощью параметрического t-критерия Стьюдента для независимых выборок и непараметрического критерия Уилкоксона. Корреляционный анализ параметров проведен с учетом ранговой корреляции Спирмена с определением коэффициента корреляции (r) и оценки его достоверности. Статистическая достоверность присваивалась при значении p<0,05 [11].

Результаты исследования и их обсуждение. Результаты исследования разделены на 2 группы, по уровню содержания маркера пролиферации CD10 + : > 0,5Ч10⁹кл/л и < 0,2Ч10⁹кл/л. В первой группе 60 человек, во второй 51 человек. Среднее значение показателя в первой группе составило 0,95+0,05Ч10⁹кл/л, во второй группе 0,31+0,02Ч10⁹кл/л (p<0,01). В изученных группах практически не изменяется содержание моноцитов (соответственно 0,62+0,09 и 0,52+0,06Ч10⁹кл/л). В составе моноцитограммы отмечается увеличение числа промоноцитов (32,95+0,02%), в группе с повышенным содержанием CD10 + , по сравнению с таковым среди лиц с пониженным уровнем CD10 + , в которой содержание промоноцитов составило 26,77+2,06% (p<0,05) (рис.1).

При повышенной концентрации CD10 + общее содержание лимфоцитов с (1,98+0,11 до 2,73+0,13Ч10⁹кл/л; p<0,05), малых лимфоцитов в составе лимфоцитограммы (1,03+0,01 и 0,66+0,01Ч10⁹кл/л; p<0,05) и больших лимфоцитов (0,45+0,010 и 0,31+0,02Ч10⁹кл/л, p<0,05). Для группы с повышенным содержанием CD10 + характерно увеличение содержания CD4⁺ с 0,32+0,04 до 0,61+0,04Ч10⁹кл/л (<0,01). Установлено, что при возрастании активности лимфопролиферации происходит увеличение уровней провоспалительных цитокинов. Концентрация IL-6 повышается с

9,44+1,87 пг/мл (в группе с пониженным содержанием CD10+) до 13,51 + 1,39 пг/мл (в группе с повышенным содержанием CD10+). Уровень TNFa — соответственно с 6,75+0,85 пг/мл до 8,88+0,95 пг/мл, IL-1e — с 1,73+0,19 пг/мл до 2,21+0,26 пг/мл. Выявляется тенденция снижения содержания IL-10 с 3,18+0,41 пг/мл до 2,66+0,34 пг/мл. Содержание реагинов в группе с пониженным содержанием CD10+ значительно ниже (95,52+3,42 Ме/мл), чем в группе с повышенным уровнем CD10+ (145,88+4,61 Ме/мл, p<0,01).

Рис. 1. Моно цито граммы в группах с повышен ным, и пониженным содержанием CD10 + .

Примечание: I I - высокое содержание CD10⁺; I I - относительно низкое содержание CD10 + ;

*- p<0,05.

лимфоциты лимфоциты         лимфоциты

Рис. 2. Лимфоцитограммы в группах с повышенным и пониженным содержанием CD10 + .

Примечание: I   I - высокое содержание CD10 + ; I   I - относительно низкое содержание CD10 + ; *- p<0,05.

Для группы с повышенным содержанием CD10 + характерно увеличение содержания CD4⁺ с 0,32+0,04 до 0,61+0,04410⁹кл/л (<0,01). Установлено, что при возрастании активности лимфопролиферации происходит увеличение уровней провоспалительных цитокинов. Концентрация IL-6 повышается с 9,44+1,87 пг/мл (в группе с пониженным содержанием CD10 + ) до 13,51 + 1,39 пг/мл (в группе с повышенным содержанием CD10 + ). Уровень TNF a - соответственно с 6,75+0,85 пг/мл до 8,88+0,95 пг/мл, IL-1 e — с 1,73+0,19 пг/мл до 2,21+0,26 пг/мл. Выявляется тенденция снижения содержания IL-10 с 3,18+0,41 пг/мл до 2,66+0,34 пг/мл. Содержание реагинов в группе с пониженным содержанием CD10 + значительно ниже (95,52+3,42 Ме/мл), чем в группе с повышенным уровнем CD10 + (145,88+4,61 Ме/мл, p<0,01).

Пролиферативная реакция сопровождается увеличением числа цитотоксических клеток (соответственно 0,41+0,04 и 0,69+0,054109кл/л, p<0,05) и натуральных киллеров (0,37+0,04 и 0,67+0,054109кл/л, p<0,05). Отмечается адоптивное увеличение уровня апоптоза лимфоцитов, что проявляется в увеличении содержания клеток с маркером CD95 (с 0,35+0,04 до 0,77+0,054109кл/л ;<0,05).

Выводы: установлено, что активизация лимфопролиферации, выявляющаяся по изменению в составе лимфоцитограммы и содержанию в крови CD10+ ассоциируется с увеличением концентрации провоспалительных цитокинов IL1e, L-6, TNFa, а также реагинов, цитотоксических лимфоцитов (CD8+, CD16+) и Т-хелперов. Взаимосвязь уровня пролиферации лимфоцитов и содержания провоспалительных цитокинов, Т-хелперов обоснована и объяснима. Активизация пролиферации цитотоксическими лимфоцитами, вероятно, опосредована их цитокинами. Преимущественное влияние на этот процесс реагинов требует дополнительных исследований.