Место мембранопротекции в терапии рассеянного склероза

Среди причин инвалидизации у людей молодого возраста по-прежнему значительная роль отводится рассеянному склерозу. Трансформация взглядов на природу этого тяжелого заболевания заставляет рассматривать его не только как исключительно аутоиммунный процесс, требующий коррекции иммунопатологических механизмов, но и как нейродегенеративное заболевание, в лечении которого большое значение придается нейропротектор-ному действию назначаемых лекарственных препаратов [3, 4, 8, 15, 16, 18]. Перспективным в лечении заболевания является использование препаратов, способных вмешиваться в логику патологического процесса и изменять течение заболевания. Эта современная группа лекарственных средств в последние годы неуклонно развивается, появляются все новые и новые препараты с уникальными механизмами действия с различиями в особенностях назначения и эффективности. Вновь появляющиеся средства становятся препаратами 2-го и 3-го ряда выбора в лечении рассеянного склероза. При этом препараты 1-го ряда по-прежнему не теряют своих позиций ввиду высокой эффективности, благоприятного профиля безопасности и наличия ряда дополнительных положительных свойств, к которым относится, в частности, нейропротекция [6, 7, 9, 10, 11, 20, 23]. Одним из таких препаратов является глатирамера ацетат. Вполне возможно, что свой клинический эффект глатирамера ацетат реализует не только путем влияния на аутоиммунные механизмы рассеянного склероза, но и в результате воздействия на нейродегенеративный процесс, то есть действует как нейропротектор. Подтверждением этому могут являться фундаментальные исследования, проведенные в последние десятилетия, которые продемонстрировали благоприятное влияние глатирамера ацетата на такие клинические проявления нейродегенерации, как прогрессирование инвалидизации, трансформация очагов в стойкие «черные дыры», прогрессирование атрофических процессов в головном и спинном мозге, нарастание когнитивных нарушений [7, 22-29].

Целью настоящего исследования явилось изучение влияния глатирамера ацетата на мембра-но-дестабилизирующие процессы, играющие роль в патогенезе РС, изменении структуры клеточных мембран и активности системы антиоксидантной защиты у больных ремиттирующей формой заболевания.

Материал и методы. Проведено обследование 46 пациентов с ремиттирующим рассеянным склерозом, находящихся под наблюдением в течение 2 лет. Диагноз РС был выставлен в соответствии с современными критериями МакДональда, средний возраст пациентов составил 37 + 2 года. Из общего числа обследованных больных 23 пациента получали глатирамера ацетат на фоне обычной комплексной терапии (группа наблюдения), тогда как пациенты группы сравнения препаратов из группы ПИТРС не получали. В целях изучения влияния глатирамера ацетата на мембрано - дестабилизирующие процессы, систему антиоксидантной защиты и структуру липидной фазы эритроцитарных мембран у больных ремиттирующим рассеянным склерозом были применены биохимические методы исследования, которые осуществлялись в режиме мониторирования как в группе наблюдения, так и в группе сравнения по следующей схеме: до назначения глатирамера ацетата (в группе сравнения до начала исследования), затем на протяжении первых 6 месяцев исследования – ежемесячно, последующие 1,5 года – 1 раз в 3 месяца. 20 человек, составивших контрольную группу (здоровые люди), обследовались однократно.

Ввиду недоступности нервной ткани для биохимического исследования в качестве модели использовали эритроцит периферической крови, из которого методом осмотического гемолиза выделяли мембранный комплекс.

Исследовали следующие биохимические параметры:

• 1.    Уровень антиоксидантной защиты оценивали на основании:

• а)    определения содержания альфа-токоферола -жирорастворимого антиоксиданта [ 17 ] ;

• б)    исследования активности супероксиддисму-тазы - фермента антирадикальной защиты [ 21 ] ;

• в)    исследования активности каталазы - фермента антиперекисной защиты [ 5 ] ;

• г)    исследования активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы [1].

• 2.    Структуру липидной фазы эритроцитарных мембран оценивали на основании определения содержания фосфолипидов в мембранах эритроцитов методом тонкослойной хроматографии на силикагеле [12] и определения холестерина методом, основанном на реакции Златкиса [ 14 ] .

• 3.    Активность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) оценивали на основании изучения содержания продуктов ПОЛ в мембранах эритроцитов: определение концентрации диеновых конъюгатов (ДК) полиненасыщенных жирных кислот фосфолипидов [ 19 ] ; определение концентрации шиффовых оснований (ШО) [ 13 ] .

• 4.    Исследовали фосфолипазную активность эритроцитов (ФЛА2) [2].

Статистический анализ проведен с помощью стандартного пакета программ SAS 8,0 (SAS Inc., США). Использовали критерии t и χ2. Результаты считали достоверными при р<0,05.

Результаты и обсуждение.

В процессе двухлетнего динамического наблюдения нами установлена прогредиентная тенденция к снижению исходно повышенного уровня активности фосфолипазы А2 и уменьшению содержания продуктов перекисного окисления липидов (диеновых конъюгатов и шиффовых оснований) в мембранах эритроцитов у пациентов на фоне лечения глатирамера ацетатом, наиболее выраженная к концу второго года наблюдения (рис. 1). У больных в группе сравнения, не получавших лечения глатира-мера ацетатом, сохранялись высокие показатели активности фосфолипазы и содержания продуктов перекисного окисления липидов, достоверно отличные от параметров нормы.

Рис. 1. Активность фосфолипазы А2 и содержание ли-поперекисей в мембранах эритроцитов у больных ремиттирующим рассеянным склерозом на фоне лечения.

Данное положение свидетельствует о сохраняющейся дестабилизации клеточных мембран на фоне проводимой стандартной терапии и о способности глатирамера ацетата нивелировать данные изменения.

Анализ состояния отдельных звеньев системы антиоксидантной защиты у больных ремиттирую-щей формой рассеянного склероза позволил выявить положительные тенденции в результате применения глатирамера ацетата в комплексе лечебных мероприятий (рис. 2).

Рис. 2. Показатели системы антиоксидантной защиты у больных ремиттирующим рассеянным склерозом в динамике наблюдения.

У больных на фоне глатирамера ацетата

-У больных на стандартной терапии

Так, при исходно сниженном уровне активности ферментов антиоксидантной защиты и истощении пула альфа-токоферола в мембранах эритроцитов у больных ремиттирующим рассеянным склерозом, на фоне применения глатирамера ацетата мы установили повышение активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, супероксиддисмутазы, каталазы, начиная с конца 1-2 мес. от начала лечения и далее стабильно в процессе двухлетнего наблюдения.

Мы установили также постепенное повышение содержания альфа-токоферола в мембранах эритроцитов больных рассеянным склерозом на фоне применения глатирамера ацетата в комплексе лечебных мероприятий. В то же время в группе сравнения нами установлен низкий уровень активности ферментов антиоксидантной защиты и истощение пула альфа-токоферола как на старте, так и в финале исследований (через 2 года от начала исследований).

В целом мы можем утверждать, что применение глатирамера ацетата в комплексе лечения позволяет уменьшить проявления «оксидантного стресса» в организме больных ремиттирующей формой рассеянного склероза, а также препятству- ет истощению пула альфа-токоферола, что оказывает косвенно мембранопротекторное действие.

Рис. 3. Содержание общих фосфолипидов в эритроцитарных мембранах у больных ремиттирующим рассеянным склерозом на фоне лечения.

Подтверждением мембранопротекторного действия глатирамера ацетата являются изменения в структуре липидной фазы эритроцитарных мембран у больных ремиттирующей формой рассеянного склероза на фоне применения препарата в комплексе лечебных мероприятий (рис. 3).

В группе больных ремиттирующим рассеянным склерозом, получавших глатирамера ацетат в комплексе лечебных мероприятий (группа наблюдения) в процессе динамического наблюдения было установлено, что уже через месяц от начала лечения статистически достоверно увеличивалась сумма фосфолипидов в мембранах эритроцитов по сравнению со стартовым показателем, что может свидетельствовать о ресинтезе основных фракций фосфолипидов, а, следовательно, и суммарной фракции (общие фосфолипиды). При этом мы выявили повышение содержания в мембранах эритроцитов всех анализируемых фракций фосфолипидов не только по сравнению с аналогичными показателями у больных РРС до назначения глатирамера ацетата, но и по сравнению со здоровыми. Указанные изменения вполне могут быть отражением как процессов ресинтеза фосфолипидов в мембранах эритроцитов, так ив целом процессов ремиелинизации в центральной нервной системе.

Таким образом, полученные данные являются обоснованием мембранопротективного действия гла-тирамера ацетата при рассеянном склерозе, что существенно расширяет представления о механизме действия препарата. При этом основной механизм реализации мембранопротекции – ограничение мембранодестабилизирующих процессов и обеспечение в организме больных антиоксидантного эффекта.

THE PLACE OF MEMBRANE PROTECTION