Метод проточной цитофлуориметрии для подсчета гемопоэтических стволовых клеток CD34+ при аутологичной транплантации костного мозга



З. А. Ражабова, А. А. Исроилов, Н. Ш. Абдуллаева, М. М. Абидова, Г. З. Кузиева

Научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Министерства здравоохранения Республики Узбекистан, г. Ташкент

МЕТОД ПРОТОЧНОЙ ЦИТОФЛУОРИМЕТРИИ ДЛЯ ПОДСЧЕТА ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК CD34+ ПРИ АУТОЛОГИЧНОЙ ТРАНПЛАНТАЦИИ КОСТНОГО МОЗГА

Введение . К настоящему времени более 95 % всех аутологичных и 60 % аллогенных трансплантаций у больных с множественной миеломой выполняется с использованием периферических гемопоэтических стволовых клеток крови. При этом, проточная цитофлуориметрия является неотъемлемой частью при подсчете мобилизированных гемопоэтических CD34+ клеток периферической крови.

Цель . Освоение и адаптирование прибора проточного цитофлюориметра для подсчета CD34+ стволовых кроветворных клеток при множественной миеломе.

Материалы и методы . Для исследования использовали периферическую кровь. Количество CD34+ клеток в периферической крови осуществляли при помощи метода проточной цитофлуориметрии с использованием моноклональных антител фирмы «Becton Dickinson». Подсчет количества CD34+ клеток проводили на проточном цитофлуориметре BD FACSCalibur ™ (США) с использованием набора BD Stem Cell Enumeration (SCE) Kit (США), по протоколу ISHAGE. Анализ результатов проведен с помощью программного обеспечения BD CellQuest ™ Pro. Гемопоэтические стволовые клетки получили путем афереза при помощи сепаратора «Fresenius.»

Результаты. Для исследования использовали периферическую кровь у пятерых пациентов с множественной миеломой. Перед мобилиза- цией клеток определили базальное количество CD34+ клеток. Затем больным проводилась мобилизация с помощью Г-КСФ (гранулоцитарного колониестимулирующих факторов). После мобилизации подсчитали среднее количество СD34+ клеток, полученных за одну процедуру афереза. На конечном этапе анализа измерили общее количество СD34+клеток в конечном продукте афереза. У одного пациента за первую процедуру лейкафереза, собрано и подсчитано 9 х 106 СD34+ клеток на килограмм массы тела.

У четверых пациентов всего было произведено 2 процедуры лейкафереза, в количестве от 1,5–4.6 х 106 СD34+ клеток на килограмм массы тела.

Выводы . Эти данные позволяют сделать вывод, о том, что концентрация гемопоэтических стволовых клеток в периферической крови, определенная методом проточной цитофлуо-риметрии, является оптимальным показателем для решения вопроса о начале афереза. Освоение мобилизационных режимов и методики сбора CD34+ стволовых кроветворных клеток — одно из новых направлений в онкогематологии, направленное на трансплантацию аутологичных периферических гемопоэтических СD34+ клеток для пациентов Республики Узбекистан. Таким образом, освоение данной методики вносит неоценимый вклад в развитие аутологичной трансплантации у пациентов с множественной миеломой в Республике Узбекистан.