Микробные антагонисты для биологической санации скотомогильников

Автор: Семенова С.А., Галиуллин А.К.

Журнал: Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана @uchenye-zapiski-ksavm

Статья в выпуске: 5 т.204, 2010 года.

Бесплатный доступ

Произведён поиск штаммов - антагонистов патогенных микроорганизмов для ускорения их нейтрализации в почве, на скотомогильниках для снижения риска распространения различных заболеваний. В результате проведённых исследований антагонистических взаимоотношений между отдельными представителями почвенного микромира выделенных из различных субстратов в отношении патогенных для человека и животных микроорганизмов отобраны как перспективные микробные антагонисты для санации скотомогильников изоляты Actinomyces Ас31/2, Trichoderma Tr2, Aspergillus. flavus As03, B.subtilis Б5 и B.subtilis Б4.

Микробные антагонисты, скотомогильник

Короткий адрес: https://sciup.org/14287074

IDR: 14287074

Текст научной статьи Микробные антагонисты для биологической санации скотомогильников

Известны факты, свидетельствующие о принципиальной возможности сапрофитного существования патогенных микроорганизмов в объектах окружающей среды. Особенный интерес в этом плане вызывают возбудители инфекционных болезней, которые длительно выживают в почве и воде. Возбудители которых способны непрерывно переходить из окружающей среды в организм теплокровных животных и человека, где они ведут паразитический образ жизни, и возвращаться в окружающую среду, где они функционируют как сапрофиты [7]. Появляется все больше оснований считать, что эпидемические варианты возбудителей инфекций могут формироваться не только при циркуляции среди людей или теплокровных животных, но и применительно к сапронозам в объектах внешней среды, в частности в почвах.

Listeria monocytogenes, как возбудители сапрозоонозов, способны сохраняться и размножаться в различных, абсолютно контрастных по своим характеристикам экологических нишах. Почва является одной из экологических ниш обитания этих бактерий [4]. Грибы рода Candida присутствуя в биоценозе они взаимодействуют с другими видами условнопатогенных микроорганизмов и представителями нормофлоры, изменяя их факторы персистенции и вирулентности [6]. Сибирская язва – сапрозоонозная особо опасная бактериальная инфекционная болезнь с конкретным механизмом передачи возбудителя. Резервуаром возбудителя инфекции служит почва. Источником возбудителя является зараженный организм, где патоген способен сохраняться, размножаться, накапливаться и выделяться во внешнюю среду.

Проблема биологической опасности скотомогильников актуальна не только в РФ и странах СНГ, но и в большинстве развитых и развивающихся странах мира [3]. В любом случае, поскольку многие инфкционные агенты, в том числе сибирская язва относится к почвенным инфекциям, то очень важно учитывать абиотические и биотические факторы природной среды [1].

Поэтому представляется интересным поиск штаммов – антагонистов патогенных микроорганизмов для ускорения их нейтрализации в почве, на скотомогильниках и в перспективе разработка на их основе биологических препаратов нового поколения для снижения риска распространения различных заболеваний. Изучение этого вопроса, а на первом этапе даже получение первичных данных, может сыграть немаловажную роль при разработке методов и средств биологической санации скотомогильников и оздоровления почвенных территорий, загрязненных возбудителем инфекционных заболеваний

Целью наших исследований было определение антагонистических взаимоотношений между отдельными представителями почвенного микромира в отношении патогенных для человека и животных микроорганизмов.

Материалы и методы. Работа выполнялась на кафедре микробиологии КГАВМ имени Н.Э. Баумана и во ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных».

Материалом для исследования служили образцы почв из различных районов Республики Татарстан, образец почвы из скотомогильника, образец пат.материала от разложившегося трупа животного из которых выделяли изоляты различных микроорганизмов. Выделение изолятов микроорганизмов проводили с использованием специальных жидких и плотных питательных сред. Микроскопические грибы выделяли согласно методике, описанной Курасовой В.В. и соавт. [5]. Для выделения актиномицетов использовалась специальная крахмало-аммиачная среда.

Для исследования антагонистических свойств бактерий использовали методы прямого антагонизма по Murray (1950), в модификации Усвяцова (1967) и отсроченного антагонизма по Frederiq (1957).

Антагонистическую активность штамма выражали степенью прироста тест-культуры при культивировании её с культуральной жидкостью антагониста.

Результаты исследований. Провели выделение микроорганизмов из различных образов почвы с присвоением шифра изолятам (преимущественно микробы рода Bacillus, Escherichia, Salmonella, Cllostridium), микроскопические грибы (родов Candida, Aspergillus , Penicillium , Tricdhoderma , Fusarium), актиномицеты (секции Cinereus и Roseus ). Кроме того, использовали музейные штаммы ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»: патогенные Escherichia coli, Staph. aureus, Candida albicans, Salmonella tythimurium, Listeria monocitogene,. Bacillus cereus ( штамм № 8035, принадлежит к почвенным сапрофитам, получен из ВГНКИ в 1992 году) .

В результате выделены чистые культуры 116 изолятов микроорганизмов и микроскопических грибов, из них отобрано по интенсивности роста на питательных средах 64 изолята. Далее были изучены антагонистические свойства 64 изолятов с помощью метода штриха, в результате были отобраны наиболее активные анатагонисты – всего 16 изолятов, их изучали методом отсроченного антагонизма.

Результаты исследования антагонистических свойств методом отсроченного антагонизма обобщены и представлены в таблице.

Из таблицы видно, что наиболее активным антагонистам является Bacillus subtillis Б 5 к B.cereus , Candida albicans П , Sal. typhimurium П , St. aureus П , Listeria monocitogenes П , и в отношении микроскопических грибов Trichoderma Tr2/1, Trichoderma Tr2/2, Aspergillus flavus А s03, Aspergillus ochraceus А s32 . Actinomyces Ас 4 был активен в отношении микроорганизмов B.cereus, Sal. Typhimurium П , Candida albicans П и в отношение микроскопических грибов Aspergillus flavus А s03, Aspergillus ochraceus А s32, Trichoderma Tr2/1, Trichoderma Tr2/2 . Для патогенного St. aureus антагонистами являются Actinomyces А c31/2, Escherichia coli В 1, Sal. typhimurium Sl1. Sal. typhimurium Sl1 является активной в отношении St. aureus П . Штамм Candida pseudotropicalis Cp2/2 не оказывал антагонистического действия на тест-культуры. Aspergillus flavus А s03 был активен в отношении Candida albicans П .

1. Характеристика антагонизма выделенных микроорганизмов

Выделенные изоляты

СО

3 3

со

3 о

~з з

~з

Со со

^г'|

^ 3

3 3

~3 3 о

со

S 3

^ 3

3 3

too

3 о

Bacillus subtillis Б 3

Bacillus subtillis Б 4

Bacillus subtillis Б 5

Aspergillus flavus А s03

Aspergillus ochraceus А s32

Trichoderma Tr2/1

Trichoderma Tr2/2

Actinomyces Ас 1

Actinomyces А c31/2

Actinomyces Ас 4

Actinomyces Ас 4/1

Actinomyces А c31/4

Escherichia coli В 1

Candida albicans C1

Candida

pseudotropicalis Cp2/2

Sal. typhimurium Sl1

Заключение. В результате проведённых исследований изучены антагонистические свойства микроорганизмов выделенных из различных субстратов, отобраны как перспективные штаммы для санации скотомогильников изоляты Actinomyces Ас31/2, Tricdhoderma Tr2, Aspergillus. flavus As03, B.subtilis Б5 и B.subtilis Б4.

ЛИТЕРАТУРА : 1. Берлянт, А.М. Электронное картографирование в России / А.М. Берлянт // Соровский образовательный журнал.-2000.-Т.6, №1.-С.64-70. 2. Билай, В.И. Токсинообразующие грибы / В.И. Билай, Н.М. Пидопличко. - К.: Наукова Думка, 1970. – 287с. 3. Гаврилов, В.А., Биологическая опасность сибиреязвенных скотомогильников и перспективы решения существующей проблемы./ В.А. Гаврилов, // Жизнь без опасностей 2008.-№4.-2009-№1. – С.81-84. 4. Гершун, В. И. Экология листерий и пути их циркуляции в природном очаге. // В кн.: Экология возбудителей сапронозов. - М. - 1988. - c. 80-85. 5. Курасова, В.В. Методы исследования в ветеринарной микологии / В.В. Курасова, В.В. Костин, Л.С. Малиновская - М.: Колос, 1971. - 312 с. 6. Перунова, Н.Б. Антагонистическая активность Candida albicans. / Н.Б Перунова. // Успехи медицинской микологии. – Т.7.- М.: Нацоинальная академия микологии, 2006- С.16-17. 7. Сомов, Г. П. Сапрофитизм и паразитизм патогенных бактерий: экологические аспекты / Г.П. Сомов, В.Ю. Литвин -Новосибирск: Наука Сиб. отд-ие, 1988. - 208 c.

МИКРОБНЫЕ АНТАГОНИСТЫ ДЛЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ САНАЦИИ СКОТОМОГИЛЬНИКОВ

Семенова С.А., Галиуллин А.К.

Резюме

Произведён поиск штаммов – антагонистов патогенных микроорганизмов для ускорения их нейтрализации в почве, на скотомогильниках для снижения риска распространения различных заболеваний. В результате проведённых исследований антагонистических взаимоотношений между отдельными представителями почвенного микромира выделенных из различных субстратов в отношении патогенных для человека и животных микроорганизмов отобраны как перспективные микробные антагонисты для санации скотомогильников изоляты Actinomyces Ас 31/2, Trichoderma Tr2, Aspergillus. flavus As03, B.subtilis Б 5 и B.subtilis Б 4.

MICROBIAL ANTAGONISTS FOR BIOLOGIC SANITATION OF BURIAL PLACES

Semyenova S.A., Galiullin A.K.

Статья научная