Морфофункциональные изменения в периферической иммунной системе овец при фасциолезе и после дегельминтизации и стимуляции

Широта распространения и высокая патогенность фасциолеза отмечается в трудах Скрябина К.И., Демидова Н.В., Пановой Л.Г., Нурхаметова Х.Г. [1, 2, 3, 4, 5, 6, 7]. Особенно значительно страдает от фасциолеза крупный и мелкий рогатый скот. Болеют фасциолезом и люди. Фасциолы характеризуются сложным развитием и наличием промежуточных и дополнительных хозяев. В результате действия метаболитов фасциол нарушается обмен витаминов, микроэлементов.

В настоящее время ультраструктурная организация овец при фасциолезе и после дегельминтизации изучены недостаточно, в связи с этим мы поставили цель исследовать печень, лимфатические узлы, селезенку у экспериментально зараженных животных 300 адо-лескариями F.Hepatica и после дегельминтизации ацемидофеном и гексихолом.

Материал и методы. Исследовали органы иммунной системы и печень овец породы советский меринос в возрасте 1,5 года, которым вводили по 300 адолескарий (F.Hepatica). Адолескарии культивировали в лабораториях Сазанова А.М. и Демидова Н.В. Животных 1 и 2 групп дегельминтизировали на 51 день (ювенальная стадия паразита) 15,8 % суспензией ацимедофена в дозе 1мл/кг. Животным 3 и 4 групп на имагинальной стадии паразита применили гексихол в дозе по 0,2 г/кг на 81 день. Овцы 5 группы были оставлены для контроля заражения. 6 группа состояла из клинически здоровых животных. Овцам 2 и 4 группы после дегельминтизации вскармливали комбикормом с премиксом «Мамил». 10 дней премикс давали в лечебной, а затем до конца опыта вскармливали в профилактической дозе.

Взятие материала проводили на 142 сутки после заражения. Ультраструктурные исследования проводили на электронном микроскопе JEM 100 S.

Результаты исследований . Нами установлено, что у больных овец при миграции фасциол в печени наблюдается травматическое повреждение паренхимы, значительное нарушение белоксинтезирующего и энергетического аппаратов в гепатоцитах. Глубокие деструктивные изменения отмечены также в кровеносных сосудах и желчных протоках.

В нашей работе в качестве антигель-минтиков использовали ацемидофен и гекси-хол. Исследования показывали значительную способность селезенки к адаптации при дегельминтизации ацемидофеном и стимуляции организма микроэлементами и витаминами.

При фасциолезе в лимфатических узлах обнаруживаются обширные некробиотиче-ские изменения. В популяциях лимфатических узелков и коркового плато значительно снижается количество малых лимфоцитов и увеличивается число незрелых клеточных элементов. В кариоплазме отдельных малых лимфоцитов обнаруживаются вакуоли (рис 1).

Рисунок 1 - Деструктивные изменения в лимфоците при фасциолезе. Электронная микрофотография. Ув. х 10000

Наблюдается увеличение относительно-     Плазмоциты отличаются высокой степенью го количества плазмоцитов и плазмобластов.     вакуолизации цитоплазмы и наличием бес- структурных зон. В ядрах некоторых плазмоцитов и плазмобластов отмечаются вакуоли и кариолизис

В белой пульпе селезенки лимфатические узелки и реактивные центры имеют слабо выраженные контуры. В узелках снижается количество малых лимфоцитов. В макрофагах содержится много деструктивного материала. В белой и красной пульпе увеличивается количество плазмобластов и плазмоцитов. Эритроциты имеют разнообразную поверхность и низкую электронную плотность.

В плазмоцитах цистерны гранулярного эндоплазматического ретикулума представлены в небольшом или умеренном количестве, в митохондриях наблюдается деструкция крист, и матрикс заполняется хлопьевидным материалом или миелиновыми тельцами.

В макрофагах чаще преобладают деструктивные изменения, цистерны эндоплазматического ретикулума сжаты, имеются лизосомы, остаточные тельца и хлопьевидный материал. В некоторых макрофагах небольшая группа органелл располагается в околоядер-ной области, а оставшаяся часть цитоплазмы занята гомогенным осмиофильным материалом.

Таким образом, в лимфатических узлах и селезенке овец при фасциолезе нами об-аружены признаки иммунодефицита.

При светооптическом исследовании лимфатических узлов после дегельминтизации овец ацемидофеном в ювенальной стадии заражения, наблюдается интенсивная базофилия всех клеток.

Однако, компенсаторно– приспособительные изменения четче выявляются в лимфатических узлах животных, которые получали с кормом премикс «Мамил». В лимфатических узелках и корковом плато располагается большое количество малых лимфоцитов, между которыми увеличивается количество контактов. В ядрах малых лимфоцитов уменьшается содержание гетерохроматина, а в цитоплазме возрастает число свободных рибосом и митохондрий. Ядра отдельных малых лимфоцитов имеют угловатые очертания, в некоторых из них отмечаются остаточные мембранные структуры. В межклеточном пространстве между малыми лимфоцитами располагается мелкозернистый материал, образующийся при распаде клеток. В ряде больших лимфоцитов выявляются деструктивные процессы: в ядре локализуются остаточные тельца, в плазмолемме обнаруживаются перерывы.

В плазмоцитах развивается гранулярный эндоплазматический ретикулум (рис 2). Благодаря волнообразному ходу кариолеммы увеличивается площадь соприкосновения ядра с цитоплазмой.

Рисунок 2 - Лимфатический узел овцы после применения ацемидофена и стимуляции в ювенальной стадии заражения. В плазмаците развитый белоксинтезирующий аппарат. Электронная микрофотография. Ув. х10000

В перинуклеарной зоне макрофагов     имеют интактный вид, в остальной части ци- мембраны эндоплазматического ретикулума     топлазмы мембранные структуры сжаты крупными липидными гранулами и скоплениями липофусцина. Митохондрии набухшие, с единичнымикристами. Данный вид клеток в лимфатических узлах находится в

В гладкихмиоцитах, расположенных в трабекулах лимфатических узлов, наблюдаются процессы внутриклеточной регенерации. Регенераторные процессы происходят в перинуклеарной и центральной частях цитоплазмы, где располагаются короткие цистерны гранулярного эндоплазматического ретикулума, митохондрии и везикулярный компонент пластинчатого комплекса Гольджи.

В лимфатических узлах увеличивается количество кровеносных капилляров. Некоторые из них расширены и содержат форменные элементы крови.

Дистрофические процессы в отдельных клетках ведут к кариолизису и накоплению в их цитоплазме большого количества деструктивного осмиофильного материала, разрыву плазмолеммы.

Ретикулярные клетки образуют щелевидные контакты друг с другом, в ядрах некоторых из них также отмечается кариолизис, в цитоплазме умеренно развивается белоксин-тезирующий аппарат.

В селезенке овец после дегельминтизации в ювенальной стадии заражения в белой пульпе обнаруживаются малые лимфоциты, плазмоциты и макрофаги. В селезенке заметно увеличивается содержание малых лимфоцитов. Компенсаторно–приспособительные изменения лучше выражены в селезенке овец, которые после дегельминтизации дополнительно получали премикс «Мамил». В малых лимфоцитах наблюдается морфофункциональная активизация ядрышек и уменьшение гетерохроматина в кариоплазме. В небольшом объеме цитоплазмы малого лимфоцита обнаруживаются рибосомы, митохондрии, лизосомы. В некоторых больших лимфоцитах содержатся вакуоли и миелиновые тельца. В селезенке овец сохраняется высокое содержание плазмоцитов. Для них характернаосмио-филия многих мембран, четко видны контуры кариолеммы, плазмолеммы, цистерн гранулярного эндоплазматического ретикулума. В периферической части цитоплазмы находятся расширенные цистерны гранулярного эндоплазматического ретикулума. На канальцах гранулярного эндоплазматического ретику-лумаполисомы располагаются гроздьями и рядами и отличаются высокой контрастностью, что связано с увеличением содержания нуклеиновых кислот и белков в этих структурах. В большинстве митохондрий редуциру- состоянии морфофункционального напряжения, так как ими осуществляется фагоцитоз большого числа деструктивных элементов, поступающих в узлы с током лимфы. ются кристы, в матриксе находится хлопьевидный материал. Тучные клетки в селезенке встречаются реже, чем в лимфатических узлах.

В белой и красной пульпе селезенки содержится много макрофагов. В их цитоплазме отмечены процессы регенерации белоксинте-зирующего аппарата, который состоит из коротких цистерн гранулярного эндоплазматического ретикулума и свободных рибосом. В цитоплазме макрофагов первичные и вторичные лизосомы располагаются небольшими группами.

Наблюдаются регенераторные изменения в гладких миоцитах, которые располагаются в стенке кровеносных сосудов и трабекулах. На поверхности гладких миоцитов образуется много микроворсинок, в цитоплазме отдельных из них имеются пластинчатый комплекс и митохондрии. В эндотелиоцитах кровеносных сосудов увеличивается содержание свободных рибосом и митохондрий.

Таким образом, после дегельминтизации овец ацемидофеном и применения премикса «Мамил» компенсаторно – приспособительные изменения ярко выражены в малых лимфоцитах и плазмоцитах. Ультраструктур-ный анализ показывает значительную адаптивную способность данного органа к перестройке после дегельминтизации в ювенальной стадии экспериментального заражения.

В селезенке овец после дегельминтизации гексихолом в имагинальной стадии заражения в сочетании с премиксом «Мамил» малые лимфоциты располагаются одиночно, имеют хорошую ультраструктуру. В их ядре гетерохроматин располагается в виде узкой каймы, в цитоплазме находятся митохондрии, полисомы, мелкие гранулы.

В селезенке наблюдается высокое содержание плазмоцитов, расположенных группами из 2 – 3 клеток. В отдельных из них увеличивается объем цитоплазмы, содержащей большое количество умеренно расширенных цистерн гранулярного эндоплазматического ретикулума. Перинуклеарное пространство увеличивается и содержит материал средней электронной плотности. В цитоплазме некоторых плазмоцитов кроме цистерн гранулярного эндоплазматического ретикулума, активизируется пластинчатый комплекс Гольджи, состоящий из нескольких рядов концентрических мембран, лизосом и везикулярного ком- понента. Плазмоциты находятся в различном морфофункциональном состоянии. В одних -гипертрофируется пластинчатый комплекс, который участвует в образовании первичных лизосом. В других клетках белоксинтезирую-щий аппарат представлен единичными цистернами гранулярного эндоплазматического ретикулума и свободных рибосом. В третьих - в начале деструктивные измененияобнаружи-ваются в ядре, а затем в цитоплазме накапливается хлопьевидный материал и распадается плазмолемма.

В макрофагах и их отростках находится большое количество первичных лизосом, другие органеллы представлены незначительно.

Рисунок 3 - Селезенка овцы после применения гексихола и стимуляции в хронической стадии заражения. Лимфоцит, отростки ретикулярных клеток с лизосомами. Электронная микрофотогра-

фия. Ув.

В красной пульпе располагаются ретикулярные клетки низкой электронной плотности с диффузно распределенными рибосомами, митохондриями и лизосомами (рис. 3). В некоторых ретикулярных клетках развивается сеть агранулярных мембран. В других случаях в цитоплазме ретикулярных клеток обнаруживается пластинчатый комплекс Гольджи, рядом с которым локализуются лизосомы и мелкие гранулярные тельца. Эти данные свидетельствуют о наличии органелл обеспечивающих их фагоцитарную функцию.

В кровеносных сосудах эндотелиоциты содержат рибосомы и цистерны гладкого эндоплазматического ретикулума, в ядрах преобладает эухроматин. В гладкомышечных клетках кровеносных сосудов также видны компенсаторно–приспособительные изменения. В околоядерной области концентрируются цистерны гранулярного эндоплазматического ретикулума, митохондрии. Осмиофиль-ная плазмолемма образует небольшие складки.

Между плазмоцитами и макрофагами лежат нервные отростки. В осевых цилиндрах имеются нейрофиламенты, рибосомы и цистерны гранулярного эндоплазматического ре- х10000

тикулума. Нервные отростки окружены цитоплазмой нейролеммоцита.

В селезенке встречаются деструктивные клетки с кариопикнозом и цитоплазмой высокой электронной плотности.

Таким образом, исследование ультраструктуры селезенки овец после дегельминтизации овец гексихолом в имагинальной стадии заражения в сочетании с премиксом “Ма-мил” показало, что клеточный состав нормализуется слабее, чем при дегельминтизации в ювенальной стадии. В данном органе в основном преобладают плазмоциты в различном морфофункциональном состоянии.

Заключение. Для решения проблемы регенерации патологически измененных органов особое значение приобретают эксперименты по моделированию заболеваний на животных и поиск средств, стимулирующих обратимость возникших изменений.

Изучение антигельминтной эффективности препаратов и разработка эффективных лекарственных форм имеет важное научное и практическое значение [9, 10].

Нами для стимуляции компенсаторноприспособительных изменений, снятия супрессивного воздействия используемых ксе- нобиотиков при фасциолезе, использован премикс «Мамил», состоящий из комплекса витаминов и микроэлементов с учетом особенностей биогеохимической зоны Республики Башкортостан. Использование их в острой стадии заражения способствует развертыванию компенсаторно-приспособительных изменений в иммунной системе овец.

Таким образом, в лимфатических узлах овец, после применения премикса, восстанавливается количество малых лимфоцитов. В плазмоцитах, тучных клетках, в гладких миоцитах и фибробластах отчетливо выражена внутриклеточная регенерация. Кроме того, в лимфатических узлах этих животных сохраняется ряд дистрофических изменений, которые постепенно фагоцитируются макрофагами.

Резюме

В статье представлены данные ультраструктурных изменений лимфоидной ткани селезенки и лимфатических узлов при экспериментальномфасциолезе, обнаружены признаки иммунодефицита.