Морфологические изменения в органах бычков при использовании в рационах кормовой добавки «Мультиомицин 1%»

Печень, почки и кишечник – это ключевые органы, отвечающие за различные жизненно важные функции организма, такие как метаболизм, детоксикация, выведение продуктов жизнедеятельности, пищеварение и всасывание питательных веществ. Состояние этих органов напрямую влияет на здоровье и продуктивность животных, в том числе бычков [1,3].

В последние годы происходит активное развитие и изучения кормовых добавок, которые могут оптимизировать питание животных и улучшить их здоровье. Одним из перспективных направлений является оценка влияния кормовых добавок на морфологию и функциональность ключевых органов [6, 7].

В данной статье представлено исследование, посвященное изучению влияния кормовой добавки "Мультиомицин 1%" на морфологию печени, почек и кишечника бычков. Целью исследования является анализ гистологических препаратов этих органов у животных, получавших кормовую добавку, и контрольной группы, получавшей стандартный рацион [2, 8].

Полученные результаты позволят оценить влияние "Мультиомицина 1%" на морфологию изученных органов, определить потенциальные риски или преимущества использования добавки в животноводстве, а также создать основу для дальнейших исследований в этой области.

Материал и методы исследований. Эксперимент проводился в лаборатории физиологии и патологии клетки ФГБОУ ВО Казанская ГАВМ в период с марта 2024 года по апрель 2024 года.

Животные были разделены на две группы по 5 голов в каждой: контрольную группу, получавшую основной рацион, и экспериментальную группу, получавшую кормовую добавку "Мультиомицин 1 %" с основным рационом.

Для анализа были отобраны органы, представляющие интерес для изучения: почки, печень и кишечник. Из каждой группы (контрольной и экспериментальной) было отобрано по три образца патологического материала от каждого животного, чтобы получить более точные результаты.

Изготовление гистологических препаратов происходило в несколько этапов:

• 1.    Взятие и фиксация материала. Изъяли материал в убойном пункте, острым инстументов отрезали кусочки небольшого размера и поместили в 10 % раствор нейтрального формалина. Транспортировали в лабораторию.

• 2.    Уплотнение материала. Материал промыли проточной водопроводной водой, затем обезвоживали в спиртах увеличивающейся концентрации в спиртах восходящей концентрации или в батарее спиртов восходящей концентрации (70^о, 80^о, 90^о, 96^о, абсолютный — 100 %). После этого материал готовили к пропитыванию парафином, обрабатывая патологический материал сначала спирт-толуолом в соотношнии 1:1, затем смесью парафина и толуола (при температуре 37 °С). Затем заливали материал гистологическим парафином в бумажные лодочки (при температуре 56 °С) и охлаждали. После застывания формировали парафиновые блоки с заключенным образцом и закрепляли их на деревянных кубиках.

• 3.    Приготовление срезов. Для изготовления гистологических срезов использовали специальный прибор — микротом. Микротомным ножом, направляемым под углом к поверхности парафинового блока, срезали с него тонкой слой органа толщиной 10 мкм. Срезы помещали на поверхность тёплой воды для их расправления, а затем - на предметное стекло, заранее смазанное смесью глицерина и белка в соотношении 1:1.

• 4.    Окрашивание срезов. Использовали специально подобранные красители гематоксилин и эозин, которые избирательно окрашивают структурные компоненты клеток и тканей.

• 5.    Заключение срезов в прозрачную среду. После окрашивания срезы быстро обезвоживали в спиртах возрастающей концентрации, просветляли в толуоле, затем наносили на срез тонкий слой канадского бальзама и накрывали покровным стеклом.

Обработку полученных в опыте результатов проводили с помощью световой микроскопии. Фотосъемка осуществлялась с использованием комплекса микроскопа Levenhuk MED Series с программным обеспечением Levenhuk MED Series.

Результат исследований. При исследовании почти у всех бычков контрольной и опытной группы не было выявлено отклонений в гистологических срезах. Снаружи почка покрыта соединительно-тканной капсулой, от которой отходят септы, делящие орган на слабо выраженные дольки. Дольчатое строение органа сохранено.

На препарате различают корковое и мозговое вещество. Корковое вещество расположено со стороны выпуклой части почки. Оно образовано системой извитых канальцев нефронов и почечными тельцами, а мозговое вещество представлено прямыми канальцами нефронов и собирательными трубками.

Строма почки представлена тонкими прослойками рыхлой соединительной ткани, в которой проходят многочисленные кровеносные и лимфатические сосуды и нервы.

Слепой конец нефрона образует капсулу, которая охватывает сосудистый клубочек и вместе с ним формирует почечное тельце. От капсулы начинается проксимальный извитой каналец, который продолжается в прямой и дальше в нисходящий и восходящий тонкие отделы, образующие петлю, переходящую в дистальный прямой и далее в извитой канальцы. Дистальные извитые канальцы нефронов впадают во вставочные отделы, которые, сливаясь между собой, образуют собирательные трубки, представляющие уже начальные отделы мочевыводящих путей.

Капсула нефрона — чашевидное полостное образование, ограниченное двумя листками, — внутренним и внешним. Внешний листок капсулы состоит из плоских нефроцитов, внутренний — представлен особыми клетками — подоцитами, которые имеют большие цитоплазматические выросты — цитотрабекулы, а от них отходят более мелкие отростки цитоподии. Этими отростками подоциты прилежат к трёхслойной базальной мембране, с которой с противоположной стороны граничат эндотелиоциты гемокапилляров сосудистого клубочка почечного тельца. В совокупности подоциты, трёхслойная базальная мембрана и эндотелиоциты формируют почечный фильтр.

Проксимальный отдел нефрона образован низкими призматическими или кубическими клетками, характерной особенностью которых является наличие щеточной каемки на апикальном полюсе и базального лабиринта, образованного впячиваниями базальной части плазмолеммы, между которыми располагаются митохондрии.

Рисунок 1 – Почка бычков, употреблявших кормовую добавку «Мультиомицн 1 %».

Окраска гематоксилином и эозином. Увл. 40

Рисунок 2 – Почка контрольной группы бычков. Окраска гематоксилином и эозином. Увл. 40

Тонкий отдел петли нефрона выстлан плоскими клетками, а восходящая её часть и извитой дистальный отдел образованы такими же кубическими нефроцитами, как и в проксимальном отделе, однако у них нет базальной исчерченности и не выражена щеточная каемка.

При сравнительном анализе гистологического препарата печени бычков опытной и контрольной группы также не было выявлено отклонений.

Снаружи печень покрыта тонкой соединительнотканной капсулой и серозной оболочкой.

Балочное (дольчатое) строение печени сохранено на обоих препаратах. Печеночная долька имеет форму шестигранной призмы с плоским основанием и слегка выпуклой верхушкой. В центре дольки находится центральная вена, а по её углам — тетрады: междольковые артерия, вена, лимфатический сосуд и желчный проток. Паренхима долек состоит из эпителиальных клеток — гепатоцитов. Имеют многоугольную форму, содержат одно или два ядра.

Цитоплазма гепатоцитов гетерофильна, содержит все органеллы, в том числе пероксисомы. ГЭС и АЭС в виде многочисленных микроканальцев, трубочек и пузырьков.

Митохондрии достаточно многочисленны. Комплекс Гольджи расположен у билиарного полюса клетки, где имеют место также лизосомы.

В цитоплазме гепатоцитов выявляются включения гликогена, липидов, пигментов.

В дольке гепатоциты образуют радиально расположенные печеночные пластинки (балки), между которыми находятся

внутридольковые

синусоидальные гемокапилляры.

В составе печеночных пластинок гепатоциты располагаются попарно в два ряда и взаимосвязаны между собой десмосомами и по типу «замка». Каждая пара гепатоцитов в составе пластинок участвует в образовании желчного канальца (капилляра), просвет которого заключен между касающимися билиарными полюсами двух соседних гепатоцитов. Поверхности гепатоцитов, обращенные в просвет желчного капилляра, имеют микроворсинки.

Рисунок 3 – печень бычков опытной группы. Окраска гематоксилином и эозином. Увл. 600

Рисунок 4 – Срез печени бычка из контрольной группы, окрашенный гематоксилином и эозином. Увл. 600

Рисунок 6 – Гистологический препарат кишечника контрольной группы бычков, окрашенный гематоксилином и эозином. Увл. 100

Структура кишечника у бычков опытной и контрольной групп оказалась сходной, что подтверждает отсутствие негативного влияния кормовой добавки "Мультиомицин 1 %" на этот орган.

На срезе представлена часть кишечника быка. Препарат окрашен гематоксилином и эозином. Ворсинки кишечника сохранены.

Слизистая оболочка кишечника трёхслойная, покрыта однослойным призматическим каемчатым эпителием. Ворсинки    представляют    тканевые образования в виде выпячиваний эпителия, собственной  пластинки и  отдельных миоцитов мышечной пластинки в просвет кишки, а крипты (кишечные железы) — впячивания эпителия в собственную пластинкуслизистой оболочки.

Мышечная пластинка слизистой оболочки является чёткой границей с подлежащей подслизистой основой, в которой располагаются подслизистые (Бруннеровы) кишечные железы.

Мышечная оболочка кишечника состоит из 2-х слоёв гладких, а в области анального отверстия – поперечнополосатых мышц: внутренний слой – циркулярный, а наружный – продольный.

Серозная оболочка образована тонким слоем рыхлой соединительной ткани, покрытым мезотелием. Собственная пластинка богата коллагеновыми и эластичными волокнами.

Эпителий слизистой оболочки кишечника однослойный, столбчатый, однорядный каемчатый. В его составе имеются каемчатые, бокаловидные, апикальнозернистые (клетки Панета), безкаемчатые (малодифференцированные) и базальнозернистые энтероэндокриноциты.

Заключение. Целью данного исследования было изучение влияния кормовой добавки "Мультиомицин 1 %" на морфологию и, соответственно, функцию ключевых органов бычков. В ходе исследования были изучены гистологические препараты кишечника, печени и почек животных, получавших кормовую добавку, и контрольной группы, получавшей стандартный рацион.

Результаты исследования показали, что кормовая добавка "Мультиомицин 1 %" не оказывает значимого влияния на морфологические показатели изученных органов. Структура и организация тканей кишечника, печени и почек у животных опытной группы не отличались от контрольной.

Полученные данные свидетельствуют о безопасности кормовой добавки «Мультиомицин 1 %» для организма бычков. Отсутствие негативного влияния на структуру ключевых органов указывает на ее потенциальную эффективность и отсутствие токсического воздействия.