Морфологические методы диагностики рака молочной железы у кошек

Введение. К морфологическим методам исследования относятся цитологический и гистологический. Именно результаты морфологического исследования позволяют дифференцировать неоплазии молочной железы от других опухолей, схожих по локализации, определить тип и стадию, степень злокачественности, а также ряд других особенностей, позволяющих сформировать полноценный онкологический диагноз [1–7].

Цель исследований . Определить информативность цитологического метода в диагностике рака молочной железы (РМЖ) у кошек, а также выявить наиболее распространенный гистологический тип РМЖ у кошек в регионе.

Методы исследований. На первичном приеме, для подтверждения диагноза, проводили цитологические исследования клеточного материала, полученного с помощью метода тонкоигольной аспирационной биопсии (ТАБ). Материалом для исследования служили кошки разных пород и возрастных групп (n=304), со спонтанно возникшими новообразованиями молочной железы. Клинические наблюдения и микроскопию (при помощи микроскопа «МИКМЕД-5») проводили в ветеринарной клинике Центра красоты и здоровья животных «Зоостиль» (г. Волгоград) и на кафедре «Морфология, патология животных и биология» ФГБОУ ВО «Саратовский ГАУ». Степень злокачественности при цитологическом методе диагностики опухолей молочной железы определяли по модифицированной схеме, предложенной P. Scarff, H. Bloom, W. Richardson (2003). При хирургическом методе лечения, в 100 % случаев, для морфологической диагностики проводили гистологическое исследование операционного материала. Производили забор до 5 образцов ткани новообра- зования, а также регионарных лимфатических узлов, при одновременном удалении их с опухолью единым блоком. Обязательно проводили гистологическое исследование участков новообразования на границе со здоровой тканью. Опухоли незначительных размеров, до 1 см в диаметре, исследовали полностью. При неоднородности структуры паренхимы образцы брали из всех участков новообразования и прилегающих «здоровых» тканей. Полученный материал фиксировали в 10%-м растворе нейтрального формалина в стеклянной таре при комнатной температуре в течение 48 часов. В свою очередь, из парафиновых блоков изготавливали срезы, которые окрашивали гематоксилин и эозином по Ван Гизон. Определение морфологического типа новообразования проводили на основании «Международной гистологической классификации и номенклатуры опухолей домашних животных», принятой в 1975 году.

Результаты исследований. По результатам наших исследований РМЖ диагностирован у 271 животного (89,1%), из них: кошки-самки – 269 животных (99,3%) и коты – 2 животных (0,7%). В 99,2 % случаев диагностирована карцинома молочной железы и только в 0,8 % – карциносар-кома (рис. 1). В большинстве случаев (94,4%) при цитоморфологической диагностике РМЖ диагностировали карциномы неспецифического типа, имеющие общие цитологические признаки злокачественности.

Рис. 1. Карциносаркома молочной железы (МЖ). Различимы два вида клеток – округлые и вытянутые. Выражен клеточный и ядерный полиморфизм. Кошка 12 лет.

Окраска по Паппенгейму, х 400

Железистые клетки округлой формы, лежат разрозненно. Цитоплазма слабобазофильная, без четких границ. Вытянутые веретеновидные клетки лежат разрозненно. Цитоплазма слабобазофильная, вытянутая, без четких границ. Ядра вытянутые, полиморфные, с четким, но не ровным контуром ядерной оболочки.

Результаты проведенных нами цитологических исследований убедительно доказывают, что ввиду нарушений межклеточных связей отмечается преимущественно обильный цитоз.

Полиморфизм характеризуется разнообразием форм и размеров клеток и ядер, неравномерностью распределения хроматина, неровностью и нечеткостью контуров ядерной мембраны, неправильным расположением клеток (рис. 2).

В результате нарушения межклеточных связей и, соответственно, общей структуры выявлены нагромождения и наслоения клеток и ядер (рис. 3). Расстояние между клетками было неодинаково, ядра имели ориентацию в разных направлениях.

Рис. 2. Карцинома МЖ. Выраженный клеточный и ядерный полиморфизм. Хроматин крупнодисперсный. Клетки расположены в виде плотных, местами многослойных скоплений или разрозненно. Кошка 10 лет. Окраска по Паппенгейму, х 400

Рис. 3. Карцинома МЖ. Полиморфные клетки с полиморфными ядрами лежат в рыхлых, местами многослойных скоплениях (нагромождение клеток и наслоение ядер). Кошка 11 лет.

Окраска по Паппенгейму, х 400

Клеточный и ядерный полиморфизм – характерные признаки рака, являются одними из наиболее достоверных диагностических критериев.

Гистологическое строение новообразований молочной железы зависит от типа клеток, из которых происходит формирование опухолевой ткани. Именно это определяет морфологический тип опухоли. В диагностике неоплазий молочной железы выделяют опухоли комплексного и простого типа. Для комплексного типа характерны клетки и секреторные, и миоэпителиальные. Во втором случае опухоль формируется из клеток одного типа. Эти различия имеют важное диагностическое и прогностическое значение, так как каждый тип имеет свое гистологическое строение и биологическое поведение. При гистологическом исследовании операционного материала (n=207), в зависимости от морфологического типа, нами были выделены: аденокарцинома (в основном тубулярно-папиллярная простого типа) в 77,8 % случаев; солидная карцинома – 20,8; плоскоклеточная и анапластическая карцинома – 1,4 %. Морфологический тип РМЖ по степени злокачественности: низкодифференцированный РМЖ в 67,1 % случаев (рис. 4); умеренно дифференцированный – 28,8; высокодифференцированный – 4,1 %.

Рис. 4. Низкодифференцированная аденокарцинома молочной железы с очаговыми кровоизлияниями и некрозами опухолевой ткани с метастазами в лимфоузел. Кошка 14 лет. Окраска гематоксилин-эозином и по Ван Гизон, х 140

В различных полях зрения в ткани молочной железы выявляли разрастания патологических опухолевых клеток, находящиеся в различных стадиях митотического, амитотического и «многополюсного» митоза. Клетки формировали ацинарные, железистые структуры. Во многих полях зрения отмечали обширные некрозы опу- холевой ткани и очаговые кровоизлияния. Строма опухоли умеренно развита, налицо умеренный фиброз стромы молочной железы. Выявляли рассеянную умеренную лейкоцитарную, преимущественно лимфоидно-макрофагальную инфильтрацию ткани, с наличием единичных гранулоцитов. В лимфатических узлах не про- сматривается нормальное структурное строение ткани. В полях зрения микроскопа выявляли участки разрастания опухолевой ткани различного размера, представленной полиморфными клетками, формирующими железистоподобные структуры. Обнаруживали многочисленные митозы: по типу «многополюсных», рассеянную круглоклеточную инфильтрацию, умеренно выраженную строму опухоли.

Заключение. Цитоморфологический метод исследования, используемый нами в комплексной диагностике РМЖ у кошек, бесспорно, является информативным и позволяет:

• •    проводить раннюю дифференциальную диагностику новообразований молочной железы;

• •    предположить гистологический тип новообразования и характер опухолевого процесса;

• •    определить степень злокачественности опухоли.

В зависимости от морфологического типа РМЖ у кошек в городе Волгограде наиболее широкое распространение имеет тубулярнопапиллярная аденокарцинома простого типа. Результаты гистологического исследования позволяют сформировать полноценный онкологический диагноз с учетом детальной морфологической характеристики структуры новообразования, что позволяет наиболее обоснованно определить дальнейшую тактику ведения животного-пациента.