Морфологические показатели крови уток и селезней родительского стада при скармливании антиоксидантной добавки «Бисфенол-5»

Кровь является наиболее специализированной тканью организма. Ее состав взаимообуславливает характер протекающих в организме биологических процессов и отражает воспринимаемые организмом колебания внешней среды. Состав крови весьма лабилен. Большое влияние на состав крови оказывает уровень [5] кормления животных и особенно его полноценность [1, 2]. Картина крови является показателем физиологического состояния организма животного. С ее помощью поддерживается постоянство внутренней среды организма. В результате нарушения функций каких-либо органов или тканей, патологических показателей, отравления и при стрессах состав крови изменяется [4].

В связи с этим следует отметить, что все изменения, происходящие в обмене веществ и состоянии организма, четко отражаются на составе крови [3]. По ее показателям можно судить об интенсивности обменных процессов и состоянии здоровья птиц

Материал и методика исследований. Экспериментальные исследования проводили в условиях птицефабрики ООО «Фермерское хозяйство «Рамаевское» Лаишевского района Республики Татарстан.

Объектом исследования послужили утки и селезни мясного кросса «Черри-Велли» пекинской породы родительского стада в возрасте 18 месяцев. В хозяйстве применяется секционная напольная технология совместного содержания уток и селезней на глубокой несменяемой подстилке. В качестве подстилочного материала использовали опилки. Через каждые 10-20 дней по мере увлажнения подстилки подсыпали свежий материал. Половое соотношение самок к самцам в контрольной и опытных группах было одинаковым: в среднем на 1 селезня приходилось 3,5 утки.

Утки опытных групп получали основной рацион с включением в комбикорм путем ступенчатого смешивания отрубей, обогащенных антиоксидантом «Бисфенол-5» в разных дозах. В лаборатории ИП Ахмадуллина А.Г. изготавливали антиоксидантный премикс, смешав отруби с изучаемым препаратом в соотношении – 25 граммов «Бисфенол-5» на 20 кг отрубей.

Подопытные группы формировались по принципу аналогов с учетом кросса, возраста, живой массы, индивидуальных особенностей. В секциях содержалось от 439 до 441 головы с плотностью посадки 4 головы на 1 м2.

В ходе опыта изучали клиническое состояние животных гематологические и биохимические показатели крови. Для исследования кровь у уток отбирали в вакуумные пробирки до утреннего кормления из подкожной подкрыльцовой вены, расположенной на внутренней поверхности, крыла. Из каждой группы кровь на анализы брали у 5 уток и 5 селезней. Взятие крови осуществляли в день формирования групп, через 14 суток от начала эксперимента и в конце опыта.

Гематологические и биохимические исследования проводились в ветеринарной лаборатории «Веттест» в начале опыта (фоновые показатели), на 14-е и 60-е сутки опыта. В цельной крови при помощи автоматического «Mindrey BC- 2800 Vet», с использованием тест-реактивов фирмы «Mindrey», определяли уровень гемоглобина, содержание эритроцитов, тромбоцитов, общее количество и видовой состав лейкоцитов. Так же на базе ветеринарной лаборатории «Веттест» с помощью автоматического спектрофотометра BioSistems A-25 и жидких реагентов в сыворотке крови определяли щелочную фосфатазу, общий белок, альбумины, глобулины, мочевину, креатинин, глюкозу, холестерол, биллирубины, ферменты (АСТ, АЛТ).

Результат исследований.

Анализируя данные морфологических исследований крови подопытных уток на начало эксперимента, было установлено, что количество эритроцитов и лейкоцитов у уток и селезней соответствовало физиологической норме. Однако у селезней содержание красных и белых телец, а также концентрация гемоглобина была незначительно выше по сравнению с самками. Количество тромбоцитов, отвечающих за свертывание крови и целостность сосудистой стенки и восстановление её при повреждении, составило у уток больше, чем у самцов.

Показатель гематокрита, отражающего процентное содержание в крови самых многочисленных форменных элементов – эритроцитов относительно плазмы, т.е. у селезней по сравнению с утками данный показатель превышал. Концентрация гемоглобина, отвечающего за обеспечение всего организма кислородом, у селезней и уток находилась в пределах физиологической нормы.

Изучение лейкограммы показало, что количество нейтрофилов у селезней и уток почти не отличалось и находилось в пределах нормы. У самцов процентное отношение эозинофилов, моноцитов и лимфоцитов незначительно отличалось от самок и находилось в норме. Основная доля лейкоцитов была представлена лимфоцитами, отражающими противовирусную и противоопухолевую активность.

Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой является самым необходимым исследованием при скармливании животным и птице кормовых добавок, повышающих обмен веществ, так как он позволяет провести комплексную оценку состояния иммунитета и заметить происходящие изменения в организме. Поэтому через 14 суток от начала опыта у уток и селезней контрольной и опытных групп, которым в комбикорм включали антиоксидант «Бисфенол-5», для исследования была взята кровь. Результаты анализа крови приведены в таблицах 1 и 2.

На основании данных общеклинических исследований крови (Таблица 1), можно сделать заключение, что количество эритроцитов в крови уток контрольной группы составило 4,18±0,08х1012/л, а у особей опытных групп, которым задавали антиоксидант в разных дозах, данный показатель был незначительно больше. У самок второй и третьей опытных групп данный показатель был соответственно на 13,9 % (Р≤0,05) и 15,8 % (Р≤0,01) больше, чем в контрольной группе.

Изменение гематокрита у подопытных уток родительского стада соответствовало динамике содержания эритроцитов в крови и изменялось аналогично дозе вводимого нами препарата «Бисфенол-5» в комбикорм. Причем, процентное содержание эритроцитов относительно плазмы у сверстников третьей опытной группы, получавших антиоксидант в дозе 50,0 г на 1 т комбикорма, было на 12,8 % (Р≤0,05) больше по сравнению с особями контрольной группы.

Количество лейкоцитов в крови уток контрольной и опытных групп изменялось пропорционально введенного количества антиоксиданта. Незначительное увеличение содержания лейкоцитов в крови особей опытных групп, на наш взгляд, связано с повышением обменных процессов в их организме.

Количество тромбоцитов в крови особей контрольной группы составило 50,8±0,64 х 109/л, что значительно отличалось от аналогичного показателя сверстников опытных групп. Особенно это заметно во второй опытной группе, в которой этот показатель составил 60,6±0,95х109/л, т.е. содержание тромбоцитов в этой группе было на 19,3 % (Р≤0,01) больше, чем в контроле.

Таблица 1 – Результаты общеклинического исследования крови уток на 14 сутки от начала эксперимента, n=5

Показатель	Группа
	контрольная	1-ая опытная	2-ая опытная	3-я опытная
Эритроциты, 1012/л	4,18±0,08	4,21±0,05	4,76±0,08*	4,84±0,02**
Гемоглобин, г/л	114,0±1,78	115,2±1,2	115,8±1,38	116,0±1,94
Гематокрит, %	33,54±0,83	34,62±0,5	35,8±0,77	37,84±0,98*
Лейкоциты, 109/л	12,1±1,04	12,2±0,55	12,6±0,63	12,9±0,74
Тромбоциты, 109/л	50,8±0,64	55,2±0,24**	60,6±0,95**	60,2±0,56**
Лейкоформула:
Нейтрофилы, %	36,6±0,31	34,6±0,38*	35,20±0,67	36,0±0,69
Эозинофилы, %	2,0±0,17	2,4±0,15	3,0±0,25	4,0±0,21
Моноциты, %	4,4±0,07	4,6±0,07	4,6±0,05	3,6±0,07
Лимфоциты, %	57,0±0,35	58,4±0,37*	57,2±0,65	56,4±0,47

Примечание: * - Р ≤ 0,05; ** - Р ≤ 0,01

Анализ лейкоцитарной формулы, отражающей разделение лейкоцитов по видам и их количеству, показывает, что весомая доля белых кровяных телец представлена нейтрофилами, защищающими организм от бактериальных и грибковых инфекций. Содержание лимфоцитов в первой опытной группе составило 58,4 %, или на 2,5 % (Р≤0,05) больше, чем в контроле. Следовательно, скармливание антиоксиданта уткам родительского стада повышало количество лимфоцитов, формирующих иммунитет.

Таким образом, включение в комбикорм антиоксиданта «Бисфенол-5» способствовало повышению количества эритроцитов и тромбоцитов в крови уток опытных групп, а также повышало количество лимфоцитов, отвечающих за иммунологический гомеостаз. Исследования форменных элементов крови при скармливании жирорастворимого антиоксиданта водоплавающей птице представлены в таблице 2.

Таблица 2 – Результаты общего анализа крови селезней на 14-е сутки эксперимента, n=5

Показатель	Группа
	контрольная	1-ая опытная	2-ая опытная	3-я опытная
Эритроциты, 1012/л	4,51±0,08	4,70±0,04	4,77±0,10*	4,86±0,07*
Гемоглобин, г/л	115,2±1,01	115,4±1,82	116,8±1,13	118,2±0,99*
Гематокрит, %	34,84±0,52	35,0±0,36	36,32±0,43*	38,16±0,53*
Лейкоциты, 109/л	12,22±0,46	12,36±0,86	12,38±0,45	13,14±0,83
Тромбоциты, 109/л	55,2±0,21	55,4±0,80	56,2±0,35	54,6±0,59
Лейкоформула:
Нейтрофилы, %	35,6±0,49	36,1±0,53	36,8±0,56	37,1±0,87
Эозинофилы, %	4,2±0,07	4,0±0,07	4,1±0,03	4,2±0,08
Моноциты, %	1,8±0,02	1,6±0,02	1,40±0,03	1,6±0,04
Лимфоциты, %	58,4±0,56	58,3±0,51	57,7±0,61	57,1±0,70

Примечание: * - Р ≤ 0,05; ** - Р ≤ 0,01; *** - Р ≤ 0,001

Анализируя данные общеклинического анализа крови селезней (Таблица 2), следует отметить, что количество эритроцитов в крови самцов всех групп, в том числе и в контрольной группе различалось незначительно. Однако у особей второй опытной группы содержание эритроцитов составило 4,77х1012/л, или на 5,8 % (Р≤0,05) больше, чем в контроле. У сверстников третьей опытной группы количество эритроцитов насчитывалось 4,86х1012/л, что на 7,8 % (Р≤0,05) выше, чем в контрольной группе. Разница по данному показателю между опытной и контрольной группами свидетельствует о том, что антиоксидант положительно влиял на содержание красных кровяных клеток. Особенно это заметно у птицы в третьей опытной группы, так как селезням данной группы задавалось наибольшее количество препарата «Бисфенола-5».

Концентрация гемоглобина в крови селезней контрольной группы составила 115,2±1,01 г/л, что было минимальным значением у подопытной птицы. Уровень гемоглобина в крови особей опытных групп увеличивался пропорционально скармливаемой дозы антиоксиданта. И у сверстников третьей опытной группы количество гемоглобина в крови достигло 118,2 г/л, или на 2,6 % (Р≤0,5) больше по сравнению с самцами контрольной группы.

Количество гематокрита в крови у самцов контрольной и опытных групп находилось в прямой зависимости от количества скормленного антиоксиданта. Если процентное содержание форменных элементов крови по отношению к ее жидкой части в контрольной группе составило 34,84 %, то в первой, второй и третьей опытных группах оно было равно соответственно 35,0; 36,32 и 38,16 %, или соответственно на 0,5; 4,2 (Р≤0,05) и 9,5 % (Р≤0,05) больше, чем в контроле.

При любых изменениях в организме птицы процентное содержание одних видов клеток белой крови увеличивается или уменьшается за счет увеличения или снижения в той или иной степени других. По данным лейкограммы судят об изменениях, происходящих в организме при включении в рацион кормовых добавок. Анализ лейкоцитарной формулы показывает, что значительное количество приходилось на лимфоциты, которые занимали в контрольной группе 58,4 %, а в опытных – от 57,1 до 58,3 %. На долю нейтрофилов у самцов контрольной группы приходилось 35,6 %. В опытных группах с увеличением дозы введенного антиоксиданта повышалось содержание нейтрофилов до 37,1 %.

Следовательно, включение в полнорационный комбикорм антиоксиданта «Бисфенол-5» оказало положительное влияние на количество форменных элементов крови, увеличило концентрацию гемоглобина, повышало уровень гематокрита, усиливало клеточный иммунитет.

Исходя из анализа данных, представленных в таблице 3, было установлено, что у подопытных уток морфологические показатели крови находились в пределах физиологической нормы. Однако содержание эритроцитов в крови у птицы опытных групп было выше по сравнению со сверстниками контрольной группы. Так, у уток первой, второй и третьей опытных групп количество эритроцитов составило соответственно 4,32; 4,92 и 4,88 × 10 12/л, или соответственно на 3,6; 18,0 и 17,0 % (Р≤0,05) больше по сравнению с данными, полученными у особей контрольной группы.

Уровень гемоглобина в крови уток контрольной группы составил 113,8± 1,15 г/л. У самок первой, второй и третьей опытных групп содержание гемоглобина было соответственно на 3,0; 4,0 и 3,5 % (Р≤0,05) больше по сравнению с особями контрольной группы. Скармливание птице антиоксиданта и, как результат увеличение концентрации гемоглобина в крови, способствует лучшему снабжению организма кислородом.

Исследование процентного содержания форменных элементов крови в ее общем объеме свидетельствует о том, что включение в комбикорм антиоксиданта повлияло на количество гематокрита у уток опытных групп. Если у особей контрольной группы количество гематокрита составило 30,18 %, то у сверстников из опытных групп по данному показателю было превышение в первой группе на 7,4 % (Р≤0,05), во второй – на 14,0 % (Р≤0,01) и в третьей – на 11,9 % (Р≤0,05) по сравнению с контролем. Следовательно, добавка в комбикорм антиоксиданта повышала содержание форменных элементов крови от ее общего объема, выраженное в процентах, и способствовало лучшей обеспеченности организма птиц кислородом.

Таблица 3 – Результаты общеклинического исследования крови уток на 60 сутки от начала эксперимента, n=5

Показатель	Группа
	контрольная	1-ая опытная	2-ая опытная	3-я опытная
Эритроциты, 1012/л	4,17±0,03	4,32±0,05*	4,92±0,06*	4,88±0,10*
Гемоглобин, г/л	113,8±1,15	117,2±1,06*	118,4±0,95*	117,8±0,72*
Гематокрит, %	30,18±0,48	32,4±0,57*	34,4±0,46**	33,76±0,67*
Лейкоциты, 109/л	11,80±0,63	12,46±0,62	13,74±0,80	13,17±0,63
Тромбоциты, 109/л	51,3±0,97	54,4±0,78	58,7±0,94**	56,7±0,87*
Лейкоформула:
Нейтрофилы, %	35,2±0,56	41,8±0,63**	43,6±0,96***	40,4±0,89*
Эозинофилы, %	3,80±0,07	4,00±0,06	4,80±0,06**	4,10±0,06*
Моноциты, %	4,20±0,02	4,60±0,03*	5,20±0,04**	4,40±0,06*
Лимфоциты, %	56,8±0,48	49,6±0,55**	46,4±0,92***	51,1±0,81*

Примечание: * - Р ≤ 0,05; ** - Р ≤ 0,01; *** - Р ≤ 0,001

Свертываемость крови зависит от содержания тромбоцитов в крови. Если у уток контрольной группы в крови содержалось 51,3±0,97×109/л тромбоцитов, то у особей первой, второй и третьей опытных групп их количество было соответственно на 6,0; 14,4 % (Р≤0,01) и 10,5 % (Р≤0,05) больше, чем у самок контрольной группы.

Количество лейкоцитов в крови сверстников контрольной группы было высокое и составило 11,8±0,63х109/л. При скармливании антиоксиданта «Бисфенол-5» птице опытных групп отмечалась тенденция повышения содержания белых кровяных телец. Лейкограмма показывает, что у уток лейкоциты, в основном, представлены лимфоцитами, отвечающими за продуцирование организмом антител к тому или иному заболеванию. В контрольной группе на долю лимфоцитов приходилось 56,8 %. В опытных группах содержание лимфоцитов было несколько меньше, чем в контроле. Количество нейтрофилов, защищающих организм от патологической микрофлоры, в контрольной группе составило 35,2 %. Скармливание водоплавающей птице изучаемой кормовой добавки способствовало повышению содержания нейтрофилов на 14,8-23,9 % по сравнению с контролем.

Результаты клинических исследований крови селезней, проведенных через два месяца от начала опыта, представлены в таблице 3.

Анализ полученных данных клинических исследований крови (Таблица 4) показывает, что количество эритроцитов в крови селезней контрольной группы составило 4,79 х 1012/л, или на 14,9 % (Р≤0,01) больше по сравнению с утками. Применение антиоксиданта в кормлении водоплавающей птицы положительно отразилось на содержании красных кровяных телец в крови селезней. Так, у самцов первой, второй и третьей опытных групп в крови содержалось эритроцитов соответственно на 3,5; 9,8 и 5,0 % больше, чем в контроле.

Концентрация гемоглобина в крови особей опытных групп была выше по сравнению с контролем. Так, в крови самцов первой опытной группы, которым в полнорационный комбикорм вводили изучаемый препарат в дозе 12,5 г на 1 т корма, количество гемоглобина было на 1,9 % больше, чем в контроле. Максимальное содержание гемоглобина в крови наблюдали у сверстников второй опытной группы, получавших комбикорм, обогащенный антиоксидантом в дозе 25,0 г на 1 т корма. У селезней данной группы в крови содержалось 120,8 г/л гемоглобина, или на 3,6 % (Р≤0,05) больше по сравнению с особями контрольной группы, что свидетельствует о лучшей обеспеченности организма птиц опытных групп кислородом.

Таблица 3 – Морфологические показатели крови подопытных селезней кросса «Черри-Велли»

на 60-е сутки эксперимента, n=5

Наименование показателя	Группа
	контрольная	1-я опытная	2-я опытная	3-я опытная
Эритроциты, 1012/л	4,79±0,07	4,96±0,12	5,26±0,15*	5,03±0,10
Гемоглобин, г/л	116,6±1,08	118,8±1,09	120,8±0,97*	119,4±1,05*
Гематокрит, %	34,86±0,17	35,36±0,15*	36,06±0,25*	35,89±0,12*
Лейкоциты, 109/л	12,28±0,46	12,94±0,42	14,20±0,79*	14,08±0,87*
Тромбоциты, 109/л	44,6±0,72	46,6±0,92*	53,2±0,65***	49,2±0,70**
Лейкоформула:
Нейтрофилы, %	38,80±0,52	40,00±0,56	42,50±0,40**	39,50±0,64
Эозинофилы, %	3,20±0,04	3,40±0,02*	4,00±0,05***	3,60±0,04**
Моноциты, %	4,60±0,05	4,70±0,04	4,80±0,04*	4,70±0,05
Лимфоциты, %	53,40±0,42	51,90±0,60*	48,7±0,46***	52,20±0,51

Примечание: * - Р ≤ 0,05; ** - Р ≤ 0,01; *** - Р ≤ 0,001

Процентное содержание форменных элементов крови в ее общем объеме у селезней опытных групп было более высокое, чем в контрольной группе. Полученные данные свидетельствуют о том, что включение в рацион антиоксиданта способствовало лучшему обеспечению всех органов кислородом.

Максимальное количество тромбоцитов в крови (53,2±0,65х109/л) наблюдали у особей второй опытной группы, которым добавляли в комбикорм антиоксидант в дозе 25,0 г на 1 т корма. Разница по данному показателю между второй опытной и контрольной группами составила 19,3 % (Р≤0,001).

Достоверное повышение количества лейкоцитов в крови отмечалось у селезней второй и третьей опытных групп, которые по данному показателю превышали соответственно на 15,6 и 14,7 % (Р≤0,05) сверстников контрольной группы.

Лейкоцитарная формула, характеризующая разделение лейкоцитов по видам и их количеству, показывает, что скармливание антиоксиданта «Бисфенол-5» селезням опытных групп отразилось на количественном составе разных видов клеток белой крови. По отношению к контролю увеличилось процентное содержание нейтрофилов в крови особей опытных групп. В то же время содержание клеток иммунной системы в крови опытных групп снизилось. Количество лимфоцитов у сверстников второй опытной группы составило 48,7 %, или на 8,8 % (Р≤0,001) меньше по сравнению с особями контрольной группы.

В ходе клинических исследований крови было установлено, что под влиянием антиоксиданта «Бисфенол-5» в дозе 25,0 г на 1 т комбикорма на шестидесятые сутки эксперимента количество эритроцитов, гематокрита и уровень гемоглобина в крови уток опытной группы были соответственно на 18,0; 14,0 и 4,0 % больше, а у селезней данные показатели – соответственно на 9,8; 3,4 и 3,6 % выше по сравнению с особями контрольной группы, что способствовало более интенсивному насыщению тканей кислородом и активации окислительновосстановительных реакций.

Заключение. Таким образом, использование антиоксиданта «Бисфенол-5» в кормлении уток родительского стада кросса «Черри-Велли» достоверно повышало в крови содержание эритроцитов, тромбоцитов, уровень гемоглобина и увеличивало количество нейтрофилов, отвечающих за защиту организма от патологической микрофлоры, что приводило к повышению гемопоэза и устойчивости организма к патогенам.

Следовательно, клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой является самым необходимым исследованием при скармливании животным и птице кормовых добавок, повышающих обмен веществ, так как он позволяет провести комплексную оценку состояния иммунитета и заметить происходящие изменения в организме.

Резюме

В статье предоставлены морфологические показатели крови уток и селезней родительского стада при скармливании антиоксидантной добавки «Бисфенол-5», которые доказывают, что все изменения, происходящие в обмене веществ и состоянии организма, четко отражаются на составе крови. По ее показателям можно судить об интенсивности обменных процессов и состоянии здоровья птиц. Таким образом, в ходе клинических исследований крови было установлено, что под влиянием антиоксиданта «Бисфенол-5» в дозе 25,0 г на 1 т комбикорма на шестидесятые сутки эксперимента количество эритроцитов, гематокрита и уровень гемоглобина в крови уток опытной группы были соответственно на 18,0; 14,0 и 4,0 % больше, а у селезней данные показатели – соответственно на 9,8; 3,4 и 3,6 % выше по сравнению с особями контрольной группы, что способствовало более интенсивному насыщению тканей кислородом и активации окислительно-восстановительных реакций.