Морфологические варианты болезни Кастлемана и плотность сосудистой сети в ткани лимфатических узлов

Болезнь Кастлемана (БК) или интерлейкин-6 опосредованная ангио-фолликулярная гиперплазия лимфатических узлов – редкое лимфопролиферативное заболевание. Болезнь получила название в честь автора (B. Castleman), описавшего ее в 1954 г. [4]. Морфологической основой болезни Кастлемана является гиперплазия лимфоидных фолликулов в лимфатических узлах с инволюцией и гиалинозом герминативных центров, и, что наиболее демонстративно, обильным развитием в межфолликулярных зонах узлов капилляров с гиалинозом их стенок. Некоторые сосуды врастают в гиперплазированные фолликулы, напоминая картину “леденца на палочке” [7,8]. Заболевание имеет два основных морфологических варианта: плазмоклеточный (более редкий) и гиалиново-васкулярный (более частый). Ряд авторов выделяет также смешанный тип [1, 2, 4, 5]. Диагностика заболевания только морфологическая – по биопсии лимфатического узла. В части случаев проводится иммуногистохи-

Рис. 1. Развитие сосудистой сети в ткани лимфатического узла у пациентки контрольной группы после мастэктомии. Иммуногистохимическая реакция с антителами к СD34 х 200

Рис. 2. Сосудистая сеть в ткани лимфатического узла у больного с плазмоклеточным вариантом болезни Кастлемана и РОЕМS-синдромом. Иммуногистохимическая реакция с антителами к СD34 х 200

Рис. 3. Слабо развитая сосудистая сеть в ткани лимфатического узла у больного с гиалиново-васкулярным типом болезни Кастлемана. Иммуногистохимическая реакция с антителами к СD34 х 200

Рис. 4. Увеличение плотности микрососудов в ткани лимфатического узла у больного с гиалиново-васкулярным вариантом болезни Кастлемана. Иммуногистохимическая реакция с антителами к СD34 х 200

мическое исследование – преимущественно для оценки иммуноархитектоники лимфатического узла; она почти не отличается от нормальной. Иногда иммуногистохимическое исследование необходимо для дифференциальной диагностики болезни Кастлемана и В-клеточных лимфом из зрелых клеток (фолликулярной, лимфомы маргинальной зоны, лимфомы из мантийных клеток). Плазмоклеточный вариант характеризуется обилием плазмоцитов в межфолликулярных зонах в виде крупных скоплений или почти полным замещением лимфоцитов плазматическими клетками [4]. В зависимости от характера распределения увеличенных лимфатических узлов выделяют 2 клинических варианта болезни Кастлемана – уни-центрический и мультицентрический [5]. Гиперплазию сосудистого русла обычно оценивали визуально [5, 7, 8], что не позволяло количественно определить площадь сосудов. В отличие от гиалиново-васкулярного при плазмоклеточном варианте присутствуют симптомы интоксикации (потливость, субфебрилитет, слабость) и выявляются изменения лабораторных данных. Так, при плазмоклеточном варианте БК обнаружено 100-кратное увеличение содержания эндотелиального фактора роста сосудов (VEGF) в элюате из лимфатического узла [5], что может оказать заметное влияние на развитие новых сосудов. В предыдущей публикации [3] нами также была показана интенсивная экспрессия VEGF всеми клетками лимфатического узла у больного смешанным типом БК с обилием вновь образованных сосудов.

Целью работы явилось сопоставление морфологического варианта болезни Кастлемана с количественной оценкой процента площади сосудов в ткани лимфатического узла.

Материал и методы

Под наблюдением находилось 28 пациентов с болезнью Кастлемана (мужчины – 14, женщины – 14). Возраст больных колебался от 24 до 65 лет. При обследовании больных использовали метод цифровой иммунной гистоморфометрии. Срезы лимфатических узлов после этапа гистологического и иммуногистохимического подтверждения болезни Кастлемана обрабатывали антителами к СD34 class11 (QBEND10, Dako) для маркировки эндотелия сосудов. Далее препараты подвергали сплошному сканированию на сканнере Panoramic (Zeiss). Процент площади сосудов определяли с помощью программы Panoramic Viewer, что позволяло производить статистическую обработку данных по t-критерию Стьюдента. Содержание и распределение плазматических клеток в ткани лимфатических узлов определяли иммуногистохимическим методом с антителами к СD138 (М115, Dako). Для контроля были использованы 3 операционных лимфатических узла из подмышечной области, взятых у больных с опухолью молочной железы без признаков метастазирования. У всех пациентов при обследовании соблюдались этические стандарты.

Статистическая обработка полученных данных проводилась методом вариационной статистики с определением средней величины М, ее средней ошибки m. Достоверность различий оценивалась с помощью непарамет- рического U-критерия Манна–Уитни для малых выборок с ненормальным распределением. Различие между сравниваемыми показателями считалось статистически значимым при р≤0,05. Математическую обработку результатов исследования проводили с использованием программ Statistica v. 6.0, MedCalc, Microsoft Excel для Windows ХР.

Результаты и обсуждение

Плазмоклеточный вариант болезни Кастлемана был диагностирован у 8 (28,6%) из 28 больных, вошедших в исследование. Увеличение лимфатических узлов у них носило распространенный характер, что позволило всем поставить мультицентрический вариант заболевания. Этот вариант, как известно [5], встречается реже, протекает более агрессивно, характеризуется смешанно-клеточной или плазмоклеточной морфологией. У 5 из 8 больных был установлен РОЕМS-синдром, который характеризовался полинейропатией, органомегалией (гепато- и спленомегалия), эндокринопатиями с изменениями уровня половых гормонов у мужчин по женскому типу (снижение тестостерона, увеличением пролактина), а также появлением низкого уровня инсулина у одной больной, и изменениями кожи в виде обильного развития ангиом или гиперемии, и выявлением M-протеина при электрофорезе сывороточных белков. Полинейропатия была подтверждена проведением электро-нейромиографии, которая выявила нейромышечный сенсорно-моторный блок периферических нервов. Из литературы известно, что в развитии РОЕМS-синдрома ведущую роль играют свободные лямбда-цепи иммуноглобулинов, повреждающие ткани, и гиперпродукция VEGF, что приводит к существенному развитию новых сосудов (неоангиогенез) [6]. Эти два фактора вызывают развитие склероза тканей, истощение организма и гибель больных от респираторного нейро-мышечного блока, проявлявшегося отсутствием самостоятельного дыхания, что произошло с одним из наблюдаемых нами больным. Гиалиново-васкулярный тип БК установлен у 20 (71,4%) из 28 больных. У 16 из них болезнь носила мультицентрический тип (80%). При проведении исследования установлено, что в ткани лимфатических узлов контрольной группы сосуды занимали 10,6±1,0% площади (рис. 1) У больных с плазмоклеточным вариантом заболевания площадь сосудов в ткани узла была увеличена и составила 15,1±1,4% (р ≤ 0,05) (рис. 2). Больные гиалиново-васкулярным типом, в зависимости от величины площади сосудов, были разделены на 2 подгруппы. У 15 (75%) пациентов первой подгруппы процент площади сосудов составил 6,8±2,3% (рис. 3), что оказалось статистически значимо ниже по сравнению с больными плазмоклеточным вариантом болезни Кастлемана (р ≤ 0,05). У 5 (25%) больных гиалиново-васкулярным типом (вторая подгруппа) процент площади сосудов равнялся 12,3±1,5%, что не отличалось от уровня группы контроля и больных плазмоклеточным вариантом, но было выше, чем у пациентов первой подгруппы (р ≤ 0,05) (рис. 4).

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о наиболее выраженном неоангиогенезе в ткани лимфатических узлов при плазмоклеточном варианте болез- ни Кастлемана, в том числе с развитием РОЕМS-синдро-ма у 5 из 8 больных. Гиалиново-васкулярный тип болезни продемонстрировал свою гетерогенность по плотности вновь образующихся сосудов в ткани лимфоузлов. На наш взгляд, это объясняется различием в интенсивности выработки факторов ангиогенеза у этой категории больных. Как уже указывалось выше, наиболее высокая продукция VEGF наблюдается при плазмоклеточном варианте болезни Кастлемана.

Существует множество методов лечения БК: стероиды, химиотерапия, противовирусные препараты, интерферон α , моноклональные антитела к IL-6 и к его рецептору IL-6, моноклональное антитело к CD20 [5]. Установление факта выраженности неоангиогенеза при болезни Кастлемана ассоциируется с высокой агрессивностью данного варианта заболевания и требует проведения цитостатической терапии с включением препаратов-ингибиторов ангиогенеза [5].

Заключение

Проведенное исследование с использованием цифровой гисто-морфометрии площади, занимаемой сосудами в ткани лимфатического узла при болезни Кастлемана, дало возможность количественно оценить этот показатель. Наибольшие показатели плотности сосудов выявлены при плазмоклеточном варианте болезни Кастлема-на. При гиалиново-васкулярном типе плотность сосудов характеризовалась значительной вариабельностью, что может отражать неоднородность этого варианта болезни. Наиболее интенсивный неоангиогенез при плазмоклеточном варианте болезни Кастлемана указывает на необходимость применения у данной категории больных ингибиторов ангиогенеза.

Выводы

• 1.    Цифровая гисто-морфометрия позволяет количественно оценить развитие сосудов в ткани лимфатического узла при болезни Кастлемана.

• 2.    Неоангиогенез наиболее выражен у больных плазмоклеточным вариантом болезни Кастлемана.

• 3.    При гиалиново-васкулярном типе плотность сосудов характеризовалась значительной вариабельностью, что отражает его биологическую гетерогенность и возможные количественные различия выработки факторов неоангиогенеза.