Морфология органов пищеварения норок при применении в кормлении личинок мухи черной львинки

В настоящее время поиск новых нетрадиционных белковых компонентов является актуальным, так как является достойной альтернативой традиционным добавкам. Большое внимание уделяется мухе черная львинка (Hermetia illucens), возможность использования личинок которой в кормах животных отмечается многими авторами [4; 9]. Достоинством личинок, как компонента кормов, является высокое содержание в них протеина, при этом на долю переваримого протеина приходится 85-95 % [1]. Содержание жира в личинках также высокое и достигает 2045 % [8]. Основной проблемой для клеточных пушных зверей является отсутствие централизованной кормовой базы и дефицит животного белка в кормах. Одним из перспективных путей восполнения или замещения кормового белка в рационах животных, в том числе и пушных зверей, является применение нетрадиционных источников белка [3]. Среди множества известных способов активно используют такое направление, как энтомофагия, т.е. поедание животными или человеком насекомых в разных формах обработки [5, 6, 7]. Уникальными в этом отношении являются личинки мухи Черная львинка (Hermetia illucens), их выбор обусловлен высокими темпами роста насекомых, использованием в качестве субстратов для их роста и развития пищевых отходов, отходов агропромышленного комплекса и др. [2]. Целью наших исследований явилось: изучить влияние корма из личинок мух черная львинка (Hermetia illucens) на морфологию органов пищеварения норок.

Материал и методы исследований. Для выявления оптимальной дозы введения в рацион молодняка пушных зверей личинок Черной львинки были проведены научно-производственные опыты. В условиях фермы были сформированы три группы по 14 стандартных тёмнокоричневых норок в каждой: контрольная на основном рационе (ОР); 1 опытная группа, норки которой к ОР дополнительно получали высушенных личинок в количестве 3 % от сухого вещества рациона; 2 опытная группа, норки которой к ОР дополнительно получали нативных личинок в количестве 12% от сухого вещества рациона (Таблица 1).

Таблица 1 – Схема эксперимента с норками (n=14)

Группа животных	Вид корма и кормовых добавок
Контроль	ОР - комбикорм
1	ОР + сухие насекомые 3 % от массы корма
2	ОР +натуральные насекомые 12 % от массы корма

Длительность применения личинок мухи Черной львинки составила – 30 суток – до технологического убоя норок на мех.

Морфометрические показатели внутренних органов определяли путем вскрытия норок с дальнейшей оценкой массы и размера внутренних органов. Для изучения формы, размеров и топографии органов использовали анатомоморфологический метод. Внутренние органы взвешивали на аналитических весах IV класса точности.

Вскрытие норок и исследование внутренних органов проводили по методике А.В. Жарова. Для гистологических исследований кусочки органов фиксировали в 10% водном растворе формалина с последующим уплотнением на замораживающем микротоме с охлаждением «ОМТ-0228» и «МЗП-01 Техном». Гистосрезы окрашивали гематоксилином и эозином, по Романовскому-Гимза. Гистопрепараты анализировали с помощью микроскопа JENAMED 2, окуляр GF-PW 10x25, объектив 40.

Результат исследований. При технологическом убое норок на мех от зверей контрольной и опытных групп были отобраны органы на исследование их структурно-функционального состояния. При макроскопическом исследовании визуальных различий в состоянии, цвете, консистенции, форме и размере внутренних органов между контрольной и опытными группами не установлено. Морфологически структурно-функциональное состояние внутренних органов соответствовало видовым и возрастным параметрам для молодняка норок.

Наиболее информативными органами при исследовании кормовых добавок являются органы желудочнокишечного тракта. В процессе пищеварения исследуемые вещества и добавки непосредственно соприкасаются со стенками органов, подвергаются ферментативному, химическому и механическому превращению. В связи с чем, были проведены гистологические исследования желудка, как модели химического и механического переваривания корма, и тонкого отдела кишечника, как модели основного всасывания питательных веществ в организме.

При гистологическом исследовании стенки желудка молодняка норок контрольной группы отмечали целостность слизистой с хорошо выраженными желудочными ямками различной глубины и умеренным количеством слизи на поверхности слизистой. Эпителиальные клетки, выстилавшие желудочные ямки, были цилиндрической формы, целостность их не нарушена, размер и форма клеток сохранены. Фундальные железы, сформированные главными и парентеральными гландулоцитами, имели трубчатую форму, целостность гландулоцитов не нарушена, размеры и форма клеток сохранены. В строме желудка наблюдали умеренное полнокровие кровеносных сосудов. Микрокартина характеризовала физиологический процесс желудочной секреции.

Гистологическая картина тощей кишки характеризовалась хорошо выраженной системой «крипта-ворсинка». На поверхности ворсинок наблюдали сформированную щеточную кайму энтероцитов и наличие единичных бокаловидных клеток (Рисунок 1).

Кровеносные сосуды слизистой оболочки, подслизистой основы и мышечной оболочки были умеренно полнокровны. В подслизистой кишки отмечали хорошо выраженные дуоденальные железы, концевые отделы которых имели незначительные просветы в кишечник. На поверхности слизистой кишки отмечали небольшое количество слизи. Микрокартина соответствовала физиологическому процессу умеренной секреторной активности.

При гистологическом исследовании стенки желудка норок 1 опытной группы выявляли целостность эпителия слизистой желудочных ямок органа по всей поверхности контакта с кормовыми массами и высушенными личинками мухи Черной львинки. Компоненты кормовых масс были обволочены слизью. Целостность желудочных ямок сохранена, поверхностные эпителиальные клетки без нарушений структуры и формы. Главные и париетальные гландулоциты фундальных желез с сохранением их целостности и структур цитологии. В строме органа отмечали полнокровие кровеносных сосудов.

При исследовании тонкой кишки отмечали хорошо сформированную систему «крипта-ворсинка». Наблюдали удлинённые ворсинки пальцевидной формы, которые были выстланы хорошо оформленной щеткой каемчатых энтероцитов с единичными бокаловидными клетками с наличием ядер, расположенных по базальному полюсу. Отмечали незначительную десквамацию эпителия верхушек некоторых ворсинок слизистой, обусловленную, по нашему мнению, абразивными свойствами высушенной хитиновой оболочки (Рисунок 2).

Рисунок 1 – Ворсинки тощей кишки молодняка норок контрольной группы: а – сформированные каемчатые энтероциты; б – бокаловидные клетки. Окраска гематоксилином

Рисунок 2 – Энтероциты на поверхности ворсинок (а) с хорошо структурированной щеточной каймой, десквамация эпителия верхушек единичных ворсинок слизистой (б) в тощей кишке молодняка норок, получавших к ОР высушенные личинки. Окраска гематоксилином и эозином; х 600

Дуоденальные железы имели хорошо выраженную целостную структуру, концевые отделы имели выраженные просветы в кишечник. На поверхности слизистой оболочки кишки наблюдали обильное количество слизи. Кровеносные сосуды слизистой оболочки, подслизистой основы и мышечной оболочки были полнокровны. Микрокартина соответствовала физиологическому процессу активации секреторной деятельности и усилению пристеночного пищеварения.

При гистологическом исследовании стенки желудка норок 2 опытной группы наблюдали целостность слизистой с хорошо выраженной структурой желудочных ямок различной глубины и наличием обильной слизи на их поверхности. Поверхностные эпителиоциты слизистой характеризовались сохранением и целостностью структур. Фундальные железы имели удлиненную трубчатую форму, цитология их главных и париетальных гландулоцитов без нарушений. Выявляли полнокровие капилляров фундальных желез, в строме органа наблюдали полнокровие капилляров.

При исследовании тонкой кишки молодняка норок, получавших в рационе нативных личинок мухи Черной львинки, структурно-функциональное состояние органа характеризовалось целостностью структур, хорошей сформированностью систем «крипта-ворсинка», наличием и целостностью на ворсинке поверхностных энтероцитов с более четко выраженной щеточной каймой на апикальном полюсе клеток. Среди каемчатых энтероцитов наблюдали незначительное увеличение количества бокаловидных клеток. В подслизистой основе наблюдали дуоденальные железы с расширенными концевыми отделами (Рисунок 3).

В просвете кишки отмечали обильное количество слизи. Кровеносные сосуды слизистой оболочки, подслизистой основы и мышечной оболочки были кровенаполненые. Микрокартина соответствовала физиологическому процессу активации секреторной деятельности и усилению пристеночного пищеварения.

Рисунок 3 – Дуоденальные железы с расширенными концевыми частями(а), обилие слизи (б) на слизистой тощей кишки у молодняка норок, получавших к ОР нативных личинок. Окраска гематоксилином и эозином; х 600

Заключение. Таким образом, гистологическими исследованиями установлено, что введение личинок мухи Черной львинки в ОР молодняка норок обусловило:

• -    в желудке активацию и усиление секреторной деятельности фундальных желез, выделение обильного количества слизи на поверхность слизистой;

• -    в тощей кишке удлинение ворсинок различной степени интенсивности, более четкую сформированность структуры щеточной каймы, незначительную десквамацию эпителия верхушек единичных ворсинок слизистой у норок, получавших сушенных личинок;

• -    в тощей кишке норок, получавших нативных личинок, расширение концевых частей дуоденальных желез, увеличение количества бокаловидных клеток и обилие слизи.

Выявленные изменения микрокартины желудка характеризуют физиологический процесс усиления секреторной деятельности. Удлинение ворсинок в системе «крипта-ворсинка» и увеличение количества бокаловидных клеток в их структурах указывают на усиление пристеночного пищеварения. Десквамация отдельных эпителиоцитов ворсинок указывает на процессы слущивания клеток с верхушек ворсинок, что обуславливает усиление регенерации тканей, что в совокупности с полнокровием кровеносных сосудов возможно рассматривать как положительный ответ организма на введение кормовой добавки. Удлинение ворсинок, расширение их концевых пространств, регенерация обеспечивали повышение всасывания и усвояемость питательных веществ, что в свою очередь способствовало увеличению росто-весовых показателей и площади шкурок молодняка норок.

Резюме

В ходе проведенных исследований установлено, что при добавлении в рацион молодняка норок личинок мухи Черная львинка, масса внутренних органов имела тенденцию к увеличению. При макроскопическом исследовании визуальных различий в состоянии, цвете, консистенции, форме и размере внутренних органов между контрольной и опытными группами не установлено. Морфологически структурно-функциональное состояние внутренних органов соответствовало видовым и возрастным параметрам для молодняка норок. Гистологическими исследованиями установлено, что введение личинок мухи Черной львинки обусловило в желудке активацию и усиление секреторной деятельности фундальных желез, в тощей кишке удлинение ворсинок различной степени интенсивности, увеличение количества бокаловидных клеток и обилие слизи, что указывает на положительное влияние кормовой добавки.