Оценка антигенной активности вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, изготовленной с использованием различных питательных сред

Одной из сложных и актуальных проблем в современной ветеринарной медицине является инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота , вызываемый бактериями Moraxella bovis. Заболеваемость телят в летние месяцы в отдельных хозяйствах достигает 50-60 %, что ведет к значительному экономическому ущербу . Для специфической профилактики заболевания в ФГУ " ФЦТРБ - ВНИВИ " разработана и широко используется ассоциированная вакцина против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота ( ИКК КРС ) на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1[1]. Для получения бакмассы бактерий Moraxella bovis применяют плотные питательные среды . Однако использование таких сред трудоемко и не является технологичным при серийном промышленном производстве вакцины . Согласно данным зарубежных исследователей , образование гемолизина бактериями Moraxella bovis способствует увеличению антигенности биопрепарата . Выращенная на жидкой питательной среде бакмасса содержит наибольшее количество гемолизина . Гемолизин Moraxella bovis – это термолабильный белок , вырабатываемый бактериями в течение логарифмической фазы роста . Он в основном связан с клеткой , но при определенных условиях культивирования может высвобождаться в среду как экзотоксин [3].

В связи с выше изложенным , целью наших исследований являлась оценка антигенной активности вакцин , изготовленных на плотной и жидкой питательных средах .

Материалы и метода . Работа проводилась в условиях лаборатории ФГУ « ФЦТРБ - ВНИВИ » и в скотоводческом хозяйстве Республики Марий - Эл .

Для изучения антигенной активности изготовили согласно НТД , утвержденной в установленном порядке по 3 серии « Ассоциированной вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов и герпесвируса типа I», используя биомассу бактерий , выращенных на твердой и жидкой питательных средах . Жидкую питательную среду для культивирования бактерий Moraxella bovis глубинно - суспензионным способом готовили согласно разработанной рецептуре питательной среды с использованием в качестве основы ферментативного гидролизата маточно - плацентарно - эмбриональной массы коров ( ФГМПЭМ ) [2].

Антигенную активность изготовленных вакцин изучили первоначально на 9 кроликах массой 2-2,5 кг , затем на естественно восприимчивых животных – 15 телятах 4- месячного возраста . Антигенную активность каждой серии вакцины оценивали по уровню образования титров специфических антител в сыворотке крови иммунизированных животных , используя ИФА .

В первом опыте были сформированы три группы по 3 кролика в каждой , подобранных по принципу аналогов . Кроликов I группы иммунизировали вакциной , изготовленной из биомассы бактерий , полученной на твердой питательной среде , II группы – вакциной , изготовленной из бакмассы , полученной в среде на основе ФГМПЭМ . Третья группа животных служила контролем . Вакцину вводили подкожно , двукратно с интервалом 14 дней , в область спины в дозе 2 см ³. Перед иммунизацией и через каждые 7 дней после вакцинации производили забор крови животных и проводили исследования по определению нарастания титров специфических антител .

Во втором опыте были сформированы три группы по 5 телят в каждой . Телят I группы иммунизировали вакциной , изготовленной из биомассы бактерий , полученной на твердой питательной среде , II группы – вакциной , изготовленной из бакмассы , полученной в среде на основе ФГМПЭМ . Третья группа животных служила контролем . Вакцину вводили подкожно , двукратно с интервалом 14 дней , в область средней трети шеи в дозе 5 см ³. До иммунизации , через 7, 14, 21 и 28 суток после нее у телят из яремной вены брали кровь для определения титров специфических антител в сыворотке крови в ИФА .

Результаты исследования . Результаты серологических исследований сывороток крови кроликов ( табл . 1) показали , что наивысший уровень специфических антител к бактериям Moraxella bovis как в первой , так и во второй группе животных , наблюдается на 14 день после второй иммунизации . Титры антител в сыворотке крови кроликов иммунизированных вакциной , изготовленной из биомассы , полученной на жидкой питательной среде , уже на 7 сутки опыта были выше , чем у животных иммунизированных вакциной , изготовленной из биомассы , полученной на твердой питательной среде . В последующие сроки тенденция сохранялась , и на 14 день после второй вакцинации титр антител был выше , чем у животных I группы на 1,5 log 2.

1. Уровень специфических антител в сыворотке крови вакцинированных кроликов к антигенам бактерий Moraxella bovis

Данные представленные в таблице 2 показывают , что максимальный уровень специфических антител в сыворотке крови телят в обеих группах достигает на 7 день после второй вакцинации . При этом титр специфических антител в сыворотке крови II группе животных был на 1,75 раза выше , чем в первой группе .

2. Уровень специфических антител в сыворотке крови вакцинированных телят к антигенам бактерий Moraxella bovis

Заключение . Вакцина , изготовленная на основе бакмассы , полученной на жидкой питательной среде ( ФГМПЭМ ), по антигенной активности незначительно превосходит вакцину , изготовленную из бакмассы , полученной на твердой питательной среде .

ЛИТЕРАТУРА : 1. Гаффаров Х . З ., Спиридонов Г . Н ., Дуплева Л . Ш . Патент РФ на изобретение « Ассоциированная вакцина для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1» № 2264227 ( приоритет изобретения от 24.02. 2004), ВНИВИ , г . Казань . 2. Нургалиева А . Р . Получение биомассы бактерий Moraxella bovis в жидкой питательной среде // Ветеринария и кормление . – Владимир .-2010.- № 6 – С . 54. 3. Gray J., et al., Partial Characterization of a Moraxella bovis Cytolysin, Veterinary Microbiology, 43:183-196, (1995). … Lett., 124:6974.

ОЦЕНКА АНТИГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО КЕРАТОКОНЪЮНКТИВИТА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА , ИЗГОТОВЛЕННОЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ РАЗЛИЧНЫХ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД

Нургалиева А . Р ., Сатарова Н . В .

Резюме

Проведено изучение антигенной активности вакцины против инфекционного   кератоконъюнктивита   крупного рогатого   скота, изготовленной различными способами. Результаты проведенных исследований показывают, что вакцина, изготовленная на основе бакмассы, полученной на жидкой питательной среде (ФГМПЭМ), по антигенной активности незначительно превосходит вакцину, изготовленную из бакмассы, полученной на твердой питательной среде.

EVALUATION OF ANTIGENIC ACTIVITY VACCINE AGAINST INFECTIOUS BOVINE KERATOCONJUNCTIVITIS MANUFACTURED USING VARIOUS NUTRIENT MEDIA

Nurgalieva A.R., Sattarova N.V.