Оценка безопасности препарата РБФК

Ухудшение экологической обстановки, обусловленное влиянием ксенобиотиков, радионуклидов и биологических агентов, обусловливает развитие иммунодефицитного состояния и экопатологий у животных в связи с чем актуальным остается вопрос создания новых лечебнопрофилактических средств [1, 2, 4, 5].

В соответствии с требованиями к вновь созданным препаратам, все лекарственные средства, предлагаемые для клинических испытаний, должны подвергаться экспериментальным («доклиническим») исследованиям чтобы доказать специфическую эффективность препарата в качестве лекарственного средства, обеспечить безвредность препарата при его клиническом применении.

Обеспечение безвредности препарата решается путем фармакологических и токсикологических исследований выявления возможного развития и характера побочных явлений, связанных с применением препарата, и установлением соотношения между дозами, дающими терапевтический эффект, и вызывающими токсические явления [3, 6].

Исходя из вышеизложенного, целью настоящей работы является оценка безопасности применения препарата РБФК.

Материал и методы исследований. Оценку безопасности препарата РБФК проводили на модели острой и хронической токсичности. В опытах использовали 76 белых мышей обоих полов живой массой 18-20 г.

В первой серии опытов исследования проводили путем однократного введения подкожно в область холки препарата

РБФК. Для этой цели использовали 36 белых мышей, разделенных на 6 групп по принципу пар-аналогов. Животным 1 группы однократно подкожно вводили РБФК, разведенный в 100 раз (5*106 КОЕ/мл E.coli «ПЛ-6» (R) + 3*106 КОЕ/мл B.bifidum 1 (R)) в дозе 0,5 см3; животным 2 группы – в том же объеме препарат разведенный в 50 раз (1*107 КОЕ/мл E.coli «ПЛ6» (R) + 0,3*107 КОЕ/мл B.bifidum 1 (R)); 3 группы – препарат, разведенный в 30 раз (1,6*107 КОЕ/мл E.coli «ПЛ-6» (R) +1*107 КОЕ/мл B.bifidum 1 (R)); 4 группы – препарат, разведенный в 20 раз (2,5*107 КОЕ/мл E.coli «ПЛ-6» (R) +1,5*107 КОЕ/мл B.bifidum 1 (R)); 5 группы – неразведен-ный препарат (5*108 КОЕ/мл E.coli «ПЛ-6» (R) +3*108 КОЕ/мл B.bifidum 1 (R)). Контрольным животным 6 группы тем же способом вводили физиологический раствор в объеме 0,5 см3.

Токсичность препарата при пероральном его введении изучали на 6 группах по 5 голов в каждой в тех же дозах и условиях опыта. За животными всех групп вели наблюдение в течение 7 суток, ежедневно регистрируя наличие и отсутствие возможных клинических симптомов интоксикации (нарушение координации движения, наличие судорог, их характер, а также состояние волосяного покров, окраска слизистых оболочек).

Во второй серии токсикологических исследований изучали безвредность испытуемого препарата на модели многократного (14 суток) хронического поступления препарата РБФК при пероральном введении белым мышам разовой терапевтической дозы (5*108 КОЕ/мл E.coli «ПЛ-6» (R)

+3*108 КОЕ/мл B.bifidum 1 (R)) для человека.

Опыты проводили на 10 белых мышах, разделенных на 2 группы, по 5 животных в каждой. Животным 1 группы в течение 14 суток ежедневно перорально вводили препарат РБФК в дозе 5*108 КОЕ/мл E.coli «ПЛ-6» (R) +3*108 КОЕ/мл B.bifidum 1 (R). Животные 2 группы служили контролем, им вводили физиологический раствор. Наблюдение за животными вели в течение периода введения препарата и последующие 7 суток, регистрируя изменение клинического состояния, наличие или отсутствия возможных клинических симптомов интоксикации. Через 1 сутки после последнего введения препа- рата (на 15 сутки эксперимента) отдельным животным проводили эвтаназию эфирным наркозом с последующим вскрытием для макроскопического исследования внутренних органов.

Результаты исследования обработаны статистически с применением стандартного пакета программ Microsoft Office Excel 2007.

Результат исследований. В результате проведенных экспериментов было установлено, что препарат РБФК является безвредным и нетоксичным как при однократном подкожном, так и при пероральном введении белым мышам.

Полученные результаты представлены в таблице 1.

Таблица 1 – Оценка однократного введения препарата РБФК в различной концентрации белым мышам

Данные таблицы 1 свидетельствуют, что препарат РБФК, как при парентеральном, так и пероральном введении высоких, превышающих дозу для мышей более чем в 100 раз, не приводил к развитию признаков токсического действия. На вскрытии у отдельных животных отмечено развитие во внутренних органах (печень, легкие, селезенка) умеренного полнокро- вия и умеренных дистрофических изменений. Органы иммунной системы (тимус, селезенка, лимфоузлы) сохраняли свою структуру.

Следующим этапом эксперимента являлось токсикологическое исследование препарата РБФК на модели хронической токсичности. Результаты проведённых опытов представлены в таблице 2.

Таблица 2 – Оценка токсичности хронического воздействия препарата РБФК

Данные таблицы 2 свидетельствуют о том, что при пероральном хроническом поступлении препарат РБФК в концентрации 5*108 КОЕ/мл E.coli «ПЛ-6» (R) +3*108 КОЕ/мл B.bifidum 1 (R) не оказывает неблагоприятного воздействия на белых мышей, что свидетельствует об отсутствии выраженного токсического действия.

Заключение. По результатам токсикологических исследований на модели острой и хронической токсичности комплексный препарат РБФК, содержащий смешанную популяцию двух радиомоди-фицированных штаммов микроорганизмов, является безопасным для животных, что проявляется в отсутствии гибели, признаков токсического действия препарата на центральную нервную систему и внутренние органы подопытных животных.

В результате проведенных исследований установлено, что испытуемый препарат не оказывает неблагоприятного воздействия на подопытных животных и не вызывает их гибели, общее состояние оставалось удовлетворительным, что свидетельствует о безвредности и отсутствии токсичности испытуемого препарата.