Оценка хронической токсичности композиции лечебных средств для устранения последствий токсикозов

В связи с интенсификацией производства и совершенствованием технологических процессов в животноводческой отрасли возрастает риск возникновения несоответствия между физиологическими возможностями организма животных и существующими условиями их кормления. Наличие в кормах посторонних химических и токсических агентов в сочетании с общей несбалансированностью рационов приводит к развитию эндогенного и экзогенного токсикозов в организме, которые запускают механизм возникновения многих заболеваний, в первую очередь, патологий печени, с которой связано большинство обменных процессов организма [2, 7, 11]. Для снижения негативных последствий перечисленных факторов необходимо использовать эффективные препараты и кормовые добавки, предназначенные для связывания в желудочно-кишечном тракте и выведения из организма животных токсичных веществ, бактериальных токсинов, токсичных продуктов метаболизма, продуктов гниения и так далее. Однако устранение основных причин, способствующих возникновению и развитию патологий гепатобилиарной системы, недостаточно для восстановления физиологических функций печени [4, 6]. На этом фоне необходимо проведение патогенетической терапии, направленной на адекватную фармакологическую коррекцию с помощью лекарственных средств, улучшающих метаболические процессы в печени, повышающих ее устойчивость к патогенным воздействиям, способствующие восстановлению ее функций [4, 6, 7, 10].

В патогенезе заболеваний печени имеют место различные патологические процессы в зависимости от причины заболевания, условий содержания и особенностей организма [1, 10]. Представляется рациональным применение комплексных средств, влияющих на различные патологические процессы и сочетающих в себе различные гепатопротективные вещества [10]. Поэтому разработка средств для устранения последствий токсикозов, патологии печени и коррекции обмена веществ имеет актуальность.

Целью работы явилось выявление токсического действия на организм лабораторных животных при продолжительном применении комплексного средства для устранения последствий токсикозов, гепа-топротекции и коррекции обмена веществ.

Материал и методы исследований. Исследования проведены в отделении токсикологии ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ», в соответствии с руководством по проведению доклинических исследований лекарственных средств [8].

По результатам первичного отбора компонентов средства для устранения последствий токсикозов, гепатопротекции и коррекции обмена веществ был сформирован комплекс, включающий холин хлорид, янтарную кислоту, ксимедон, сорбитол, суспензию молочно- и пропионовокислых микроорганизмов [3, 9, 12].

Изучение хронической токсичности препарата проводили на 30 белых крысах обоего пола живой массой 120-140 г, разделенных по принципу аналогов на 3 группы по 10 голов в каждой. Первая группа служила контролем и получала привычный рацион, вторая и третья – рацион с препаратом в дозе 1/50 и 1/20 от максимально вводимой (0,04 и 0,1 г/кг), соответственно, ежедневно в течение 60 дней. Экспериментальные животные находились в одинаковых условиях кормления и содержания с соблюдением санитарногигиенических требований.

О степени токсичности препарата судили по общему состоянию животных, динамике массы тела, изменениям показателей периферической крови [5], результатам патологоанатомического исследования. Статистическую обработку полученного цифрового материала осуществляли методом вариационной статистики с применением программы Microsoft Excel и критерия достоверности Стьюдента. Разница между сравниваемыми величинами считалась достоверной при p ≤ 0,05.

Результаты исследований. В ходе опыта выявили, что у животных всех групп общее клиническое состояние было удовлетворительным, сохранялась двигательная активность, отсутствовали признаки повышенной возбудимости. Крысы спокойно перемещались по клетке. Как контрольные, так и опытные животные реагировали на световые и звуковые раздражители. Гибели животных и признаков интоксикации зарегистрировано не было. Крысы имели свободный доступ к корму и воде, пищевая возбудимость у животных не нарушалась.

Живая масса животных в течение эксперимента увеличивалась, как в контрольной, так и в опытных группах (Таблица 1). Прирост живой массы крыс во второй группе к 20 дням опыта составил 29,5 г, в третьей - 26,7 г, против 21,83 г в контрольной группе. Среднесуточные приросты массы тела составили, соответственно, 1,48; 1,33 и 1,09 г. Таким образом, увеличение живой массы относительно исходных показателей за 20 дней опыта у животных второй группы составило 22,7 %, третьей – 20,8 %, биологического контроля – 17,1 %.

Прирост массы на 40 день эксперимента во второй группе был 18,9 г, в третьей – 22,7 г, контрольной группе – 18,7 г, среднесуточные приросты массы тела составили 0,95; 1,14 и 0,94 г, соответственно. Живая масса у подопытных животных относительно исходных данных возросла во второй группе на 37,2 %; третьей – на 38,5 %, в группе контроля – на 31,7 %.

На 60 день опыта прирост массы у крыс второй группы составил 28,8 г, третьей – 28,2, в группе контроля – 22,9 г, среднесуточные приросты были на уровне 1,44; 1,41 и 1,15 г, соответственно. Таким образом, живая масса животных относительно исходных значений возросла на 59,4; 60,6 и 49,7 %. Абсолютный прирост живой массы за опыт во второй группе составил 77,2 г, в третьей – 77,5 г, что больше кон- троля на 21,8 и 22,2 %, соответственно. Полученные данные свидетельствуют о том, что препарат оказывал некоторое ростостимулирующее действие. При исследовании общепринятыми методами гематологических параметров крови было установлено, что концентрация эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина у крыс опытных групп была несколько выше контрольных значений, однако не имела с ними достоверных отличий (Таблица 2).

Результаты, представленные в таблице, свидетельствуют о наличии некоторого благоприятного влияния препарата на гемопоез.

Таблица 1 – Динамика массы тела белых крыс при введении в рацион препарата, n=10

Группа	Масса тела по дням наблюдения, г
	начало	20 сут	40 сут	60 сут
1. Контроль	127,67±3,18	149,50±1,95	168,17±2,61	191,10±1,91
2. Препарат в дозе 0,04 г/кг ЖМ	130,00±2,65	159,50±1,65*	178,40±2,35*	207,20±2,65*
3. Препарат в дозе 0,1 г/кг ЖМ	128,00±3,50	154,67±2,43	177,33±1,67*	205,51±2,59*

Примечание: *- p ≤ 0,05

Таблица 2 – Гематологические показатели крыс при введении в рацион препарата, n=10

Период, дни	Группа	Показатель
		эритроциты, х1012/л	лейкоциты, х109/л	гемоглобин, г/л
20	1. Контроль	7,59±0,10	14,78±0,49	161,20±3,11
	2. Препарат в дозе 0,04 г/кг ЖМ	7,67±0,12	15,03±0,57	167,40±1,86
	3. Препарат в дозе 0,1 г/кг ЖМ	7,43±0,09	16,09±0,51	159,80±2,48
40	1. Контроль	7,63±0,29	14,57±0,50	162,33±2,26
	2. Препарат в дозе 0,04 г/кг ЖМ	7,67±0,08	14,86±0,39	166,67±3,31
	3. Препарат в дозе 0,1 г/кг ЖМ	7,91±0,25	14,67±0,53	164,33±2,82
60	1. Контроль	7,43±0,53	15,58±0,57	158,17±3,41
	2. Препарат в дозе 0,04 г/кг ЖМ	7,78±0,58	14,93±0,33	167,83±1,56
	3. Препарат в дозе 0,1 г/кг ЖМ	7,40±0,49	14,33±0,66	166,50±2,97

Примечание: *- p ≤ 0,05

Изучение биохимических показателей сыворотки крови позволяет с высокой достоверностью определять нарушения обмена веществ, скрыто протекающие в организме. Так, содержание общего белка в сыворотке крови крыс второй и третьей групп превышало контрольные значения на 20 сутки опыта, соответственно, на 6,4 и

3,4 %, на 40 сутки – 6,4 и 8,7 %, на 60 - на 8,2 и 10,4 % (Таблица 3). Процентное содержание фракций альбуминов и глобулинов в сыворотке крови животных опытных групп не имело достоверных отличий с контрольными значениями. Результаты исследования активности ферментов в сыворотке крови крыс при введении в рацион препарата показали незначительное превышение в сравнении с контролем. Так, активность аланинаминотрансферазы во второй и третьей группах на 20 сутки опы- та была выше, соответственно, на 3,2 и 4,6 %, на 40 – 3,9 и 5,5 %, 60 сутки – на 3,0 и 4,4 %.

Таблица 3 – Биохимические показатели сыворотки крови крыс при введении в рацион препа- рата, n=10

к s о к & о С	сЗ к к &	Показатель
		общий белок, г/л	фракции белка, %
			hQ ко нВ	Я к S		Е
20	1	69,33±3,04	41,70±1,11	17,97±0,47	13,83±0,04	26,53±0,90
	2	73,80±4,65	41,97±2,67	18,07±0,71	13,60±0,90	27,03±0,47
	3	71,67±3,19	41,83±1,13	17,73±0,33	13,50±0,49	26,93±0,72
40	1	67,33±2,08	39,77±0,60	18,30±0,39	13,43±0,25	28,50±0,32
	2	71,67±1,33	40,53±1,43	18,17±0,64	13,67±0,18	27,63±0,86
	3	73,20±2,42*	39,00±0,86	18,37±0,32	14,53±0,61	28,10±0,07
60	1	70,67±3,49	40,20±0,55	18,17±0,55	13,73±0,36	27,90±0,49
	2	76,50±2,65*	40,57±1,43	17,83±1,03	14,00±0,35	27,93±0,43
	3	78,00±1,85*	40,37±0,29	16,97±0,89	14,47±0,35	28,20±0,49

Примечание: *– p ≤ 0,05

Полученные данные указывают на проявление препаратом стимулирующего обмен веществ действия. По завершению эксперимента провели эвтаназию и вскрытие крыс подопытных групп, макроскопическое исследование внутренних органов не выявило каких-либо патологических изменений и отличий от контроля.

Заключение. В результате проведенных исследований было установлено, что композиция, включающая холин хлорид, янтарную кислоту, ксимедон, сорбитол, суспензию молочно- и пропионовокислых микроорганизмов, и рекомендуемая для устранения последствий токсикозов животных, гепатопротекции и коррекции обмена веществ при продолжительном применении не вызывает явных клинических признаков токсикоза и не оказывает на организм лабораторных животных негативного воздействия.

Резюме

В статье представлены результаты изучения хронической токсичности комплекса лечебных средств для устранения последствий токсикозов животных, гепатопротекции и коррекции обмена веществ, включающего холин хлорид, янтарную кислоту, ксимедон, сорбитол, суспензию молочно- и пропионовокислых микроорганизмов. Препарат задавали белым крысам с кормом в дозах 1/50 и 1/20 от максимально вводимой (0,04 и 0,1 г/кг живой массы) в течение 60 дней. Проводили оценку клинических, росто-весовых, гематологических, биохимических и патоморфологических параметров. Было установлено, что исследуемый препарат при длительном введении не вызывает признаков токсикоза, не оказывает на организм лабораторных животных негативного воздействия. Абсолютный прирост живой массы за опыт в опытных группах был больше контроля на 21,8 и 22,2%, соответственно, препарат оказывал некоторое ростостимулирующее действие. Анализ крови показал, что значения исследуемых параметров были несколько выше контрольных значений, и свидетельствовал о наличии благоприятного влияния препарата на гемопоез и обменные процессы. При макроскопическом исследовании внутренних органов патологических изменений выявлено не было.