Оценка противовоспалительной активности экстракта листьев и плодов Elaeagnus angustifolia

Несмотря на достаточно широкий ассортимент противовоспалительных препаратов на фармацевтическом рынке, разработка новых эффективных и безопасных лекарственных средств, в том числе и растительного происхождения, является одним из приоритетных направлений современной фармации и медицины. Актуальность связана с тем, что воспалительная реакция играет ведущую патогенетическую роль в развитии многих патологических процессов, а их лечение синтетическими противовоспалительными средствами сопровождается развитием ряда побочных эффектов, требующих применения дополнительных лекарственных средств [1, 3]. В свою очередь, растительные лекарственные препараты обладают высокой противовоспалительной активностью наряду с низкой токсичностью, а также возможностью их длительного применения, что актуально в лечении хронических заболеваний [3].

Интерес представляет Лох узколистный ( Elaeagnus angustifolia ), произрастающий на территории Астраханской области. Доказана также антиоксидантная, регенераторная, противоопухолевая, спазмолитическая активность, а также противомикробное и противогрибковое действие экстрактов данного растения [2, 5]. В различных частях Elaeagnus angustifolia установлено наличие флавоноидов, фенольных кислот, фитостеролов, тритерпеновых сапонинов и урсоловой кислоты, в также витамины группы В и жирных кислот [4, 6, 7]. Несмотря на наличие исследований химического состава и биологического действия Лоха узколистного, произрастающего на территории Астраханской области, противовоспалительная его активность не изучена.

В связи с чем ц ель данного исследования – оценка противовоспалительной активности жидкого экстракта листьев и плодов Лоха узколистного.

Материалы и методы. Исследования выполнены на белых нелинейных крысах-самцах массой 210-230 г. Все животные во время эксперимента находились в стандартных условиях и содержались согласно требованиям нормативных документов, регламентирующих уход за лабораторными животными.

Противовоспалительную активность экстракта листьев и плодов Лоха узколистного оценивали путем моделирования хронического воспаления имплантацией под кожу спины лабораторных животных стерильного ватного шарика, для чего в асептических условиях крысам, находящимся под наркозом (внутрибрюшинное введение хлоралгидрата в дозе 400 мг/кг), в области спины выстригали шерсть, делали разрез кожи около 1 см и в образовавшуюся полость помещали стерильный ватный шарик массой 10 мг, затем на рану накладывали два шва. Животные были распределены на четыре группы (n=8): 1 группа (контроль I) – животные, получавшие внутрижелудочно эквивалентный объем воды дистиллированной; 2 группа (контроль II) - животные с моделью хронического воспаления, не получавшие лечение; 3 группа (опыт 1) – крысы, получавшие внутрижелудочно жидкий экстракт листьев и плодов Лоха узколистного в дозе 20 мг/кг в течение 7 дней, начиная с дня имплантации ватного шарика; 4 группа (опыт 2) - животные, получавшие внутрижелудочно препарат сравнения - нимесулид (гранулы для приготовления суспензии; ЮжФарм ООО; Россия) в средней терапевтической дозе 2,5 мг/кг течение 7 дней, начиная с дня имплантации ватного шарика. На восьмые сутки животных выводили из эксперимента. Ватные шарики грануляционной тканью, извлекали, взвешивали и высушивали до постоянной массы при 60° С. Пролиферативную реакцию оценивали по разнице между массой высушенной гранулемы и исходной массой шарика, а экссудативную реакцию – по разнице между массой сырой и высушенной гранулемы. Противовоспалительное действие (влияние на пролиферативный и экссудативный компоненты хронического воспаления) выражали в процентах по отношению к контролю. В крови животных определяли общее количество лейкоцитов в камере Горяева. В сыворотке крови с помощью им- муноферментного анализа определяли уровни С-реактивного белка, а также про- и противовоспалительных цитокинов (IL-6 и IL-10).

Статистическую обработку данных осуществляли при помощи пакета программы «Statistica 6.0» с учетом критерия Манна-Уитни. Различия между группами признавали статистически зна- чимыми при р ≤ 0,05.

Результаты и обсуждение .

При проведении оценки противовоспалительной активности при моделировании хронического воспаления получены результаты, подтверждающие развитие экссудативных и пролиферативных процессов в сравнении с контролем I (табл. 1).

Таблица 1

Влияние экстракта листьев и плодов Лоха узколистного на развитие экссудативных и пролиферативных процессов

Примечание: ** - измерения достоверны относительно контроля I;

#^; ## - измерения достоверны относительно контроля II

Внутрижелудочное введение животным экстракта листьев и плодов Лоха узколистного способствовало снижению экссудативных и пролиферативных процессов на 16% (р≤0,05) и 40% (р<0,01) соответственно по отношению к контролю II. При введении препарата сравнения - суспензии нимесулида отмечались схожие изменения: снижение экссудации и пролиферации на

• 18,5% и 48% соответственно в сравнении с группой животных, не получавших лечение (табл. 1).

Моделирование хронического воспаления привело к увеличению исследуемых показателей: а именно количества лейкоцитов на 154% (р≤0,01), уровня СРБ – на 25% (р≤0,05), IL-6 – на 43% (р<0,05) и IL-10 - на 24% (р>0,05) в сравнении с интактным контролем (табл. 2).

Таблица 2

Влияние экстракта листьев и плодов Лоха узколистного на количество лейкоцитов, уровень С-реактивного протеина и цитокинов

Примечание: *;** — измерения достоверны относительно контроля I;

#; ## — измерения достоверны относительно контроля II

Ведение экстракта листьев и плодов Лоха узколистного в сравнении с контролем I привело к снижению общего количества лейкоцитов, уровня СРБ и IL-6 на 52% (р≤0,01), 16% (р≤0,05) и 27% (р≤0,05) соответственно. Отмечено было некоторое повышение уровня противовоспалительного IL-10, однако данное изменение не имело статистической значимости. При введении суспензии нимесулида наблюдались следующие изменения: уменьшение количества лейкоцитов на 55% (р≤0,01), снижение уровня СРБ и IL-6 на 17% (р<0,05) и 36% (р<0,01) соответственно, повышение концентрации IL-10 на 13% (р≥0,05) по сравнению с контролем II (табл. 2).

На модели хронического воспаления выявле- на выраженная противовоспалительная активность жидкого экстракта листьев и плодов Лоха узколистного, произрастающего на территории Астраханской области, что подтверждается снижением количества лейкоцитов, уровней С-ре-активного белка и провоспалительного цитокина IL-6, увеличением концентрации противовоспалительного цитокина IL-10.

Таким образом, полученные нами экспериментальные данные, свидетельствуют о том, что жидкий экстракт листьев и плодов Лоха узколистного (Elaeagnus angustifolia), произрастающего на территории Астраханской области, обладает выраженным антиэкссудативным и антипролиферативным действием и после до- полнительных исследований может быть использован в качестве противовоспалительного средства.