Оценка психофизиологических характеристик и полиморфизма гена SCN9A при формировании аддиктивного поведения

Гендерная идентичность предполагает самоидентификацию с определенным полом, единство сознания и поведения индивида, относящего себя к тому или иному полу. В процессе своего становления гендерная идентичность проходит ряд этапов, соотносимых с возрастными этапами психического и физиологического развития человека. Формирование аддиктивного поведения [1] оказывает воздействие в том числе и на гендерную самоидентификацию. Показана связь между алкогольной и никотиновой зависимостями и гендерными стереотипами юношей и девушек [2]. Отмечается, что для подростков, имеющих опыт употребления каннабиноидов, характерна слабая дифференцированность представлений о маскулинности/фемининности, индифферентное отношение к гендерной принадлежности [3, 4]. Естественные адаптационные возможности аддикта нарушены на психофизиологическом уровне. Длительное употребление опиоидов приводит к повышению болевой чувствительности – возникновению опиоидно-индуцированной гиперал-гезии.

Индивидуальные различия болевого ответа [5] используются в качестве инструмента исследования ноцицептивных механизмов и рассматриваются как основа для персонализированного подхода к боли. Множество факторов, модулирующих боль, предпо- лагает сравнительную оценку их влияния на восприятие боли.

Значительный вклад в индивидуальные различия болевой чувствительности вносят генетические факторы [6]. Было показано, что полиморфизм rs6746030 гена SCN9A, который характеризуется аминокислотной заменой R1150W, может влиять на болевую чувствительность, изменяя потенциал покоя в NaV1.7 [7]. Мутации в гене SCN9A связывали с синдромами как сниженного, так и повышенного восприятия боли [8].

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Установление взаимосвязей гендерной самоидентификации, параметров ноцицепции и полиморфизма гена SLC9A у лиц на разных этапах формирования аддиктивных расстройств.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

В исследование было включено 248 человек (средний возраст составил 22,60±5,10 года): 108 человек с психическими и поведенческими расстройствами, вызванными употреблением психоактивных веществ (наркологические пациенты) (из них 48 мужчин и 60 женщин), 106 условно здоровых лиц (контрольная группа) (88 мужчин и 18 женщин), 34 человека, эпизодически и случайно употребляющие психоактивные вещества, согласно классификации Э.Е. Бехтеля (группа риска) (из них 16 мужчин и 18 женщин).

Исследование проводилось на базе отделения аддиктивных состояний клиники НИИ психического здоровья Томского НИМЦ, лаборатории клинической психонейроиммунологии и нейробиологии и лаборатории молекулярной генетики и биохимии НИИ психического здоровья Томского НИМЦ. Формирование групп обследованных также проходило на базе Томского областного наркологического диспансера, Кемеровского областного наркологического диспансера. Контрольную группу составили студенты средних специальных и высших учебных заведений. Обследование проведено с соблюдением принципов Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации. Клиническая верификация осуществлялась психиатрами-наркологами в соответствии с Международной классификацией болезней 10-го пересмотра (МКБ-10), диагноз квалифицировался как «Психические и поведенческие расстройства, вызванные употреблением психоактивных веществ» шифр (F1): употребление с вредными последствиями (F1x.l) и синдром зависимости (F1x.2).

Оценка порогов болевой чувствительности осуществлялась с помощью запатентованного нами собственного метода тензоалгометрии, который позволяет оценить пороги болевой чувствительности – минимальное болевое ощущение, которое субъект в состоянии распознать (нижний болевой порог), а также порог переносимости боли (верхний болевой порог) [9]. Результаты тензоалгометрии оценивались в условных единицах (усл. ед.). Для оценки эмоционального отношения к боли была использована визуально-аналоговая шкала [10]. С помощью вопросника Сандры Бэм по изучению маскулинности – фемининности определялся гендерный индекс и выявлялась направленность гендерной самоидентификации. Значения гендерного индекса >0 квалифицировались как фемининная направленность гендера, <0 – как маскулинная, =0 – как отсутствие гендерной самоидентификации [11]. Генотипирование полиморфного варианта гена SCN9A (rs6746030) проводили методом ПЦР в реальном времени на амплификаторе Step One Plus TM Real-Time PCR System (Applied Biosystems, США) с использованием наборов TaqMan Validated SNP Genotyping Assay (Applied Biosystems, США).

Статистический анализ данных проводился с использованием программы SPSS 21.0. Использовались непараметрические критерии Краскела– Уоллиса, Манна–Уитни. Для сравнения качественных признаков применялся критерий χ2.

РЕЗУЛЬТАТЫ и ОБСУЖДЕНИЕ

Результаты исследования ноцицепции и гендерной самоидентификации в обследованных группах представлены в таблице 1.

У мужчин из группы зависимых от ПАВ показатель нижнего болевого порога был статистически значимо выше, чем в контрольной группе. Из таблицы 1 также видно, что, несмотря на отсутствие статистических различий, в группе лиц, эпизодически употребляющих ПАВ, данный показатель для мужчин был выше, чем в группе здоровых лиц. Для женщин показатель гендерного индекса статистически значимо различался: в группах наркологических пациентов и лиц с эпизодическим употреблением ПАВ он был ниже, чем в контрольной группе, то есть для женщин, употребляющих ПАВ, было характерно снижение выраженности фемининности.

Таблица 1

Ноцицептивные параметры и гендерный индекс в группах сравнения Median (LQ; UQ)

Показатель	Контрольная группа	Группа риска	Наркологические пациенты
Переносимость боли по ВАШ, усл. ед. Мужчины Женщины	6,0 (5,5 – 7,0) 6,0 (4,65 – 6,0)	6,0 (4,0 – 6,65) 4,0 (3,0 – 6,0)	6,0 (3,0 – 6,75) 6,0 (5,0 – 7,0)
БН, усл. ед. Мужчины Женщины	5,0 (3,5 – 7,5) 6,0 (4,0 – 8,5)	9,0 (7,0 – 10,0) 5,0 (4,0 – 7,0)	8,0 (5,5 – 11,0)** 4,0 (2,0 – 4,0)
БВ, усл. ед. Мужчины Женщины	15,0 (12,5 – 16,0) 12,0 (10,0 – 14,0)	15,0 (13,5 – 16,0) 12,0 (11,0 – 12,0)	15,0 (14,5 – 15,0) 11,0 (7,0 – 14,0)
Гендерный индекс, баллы Мужчины Женщины	-0,043 (-1,611 – 0,011) 0,279 (0,065 – 1,045)	-0,097 (-0,216 – 0,097) 0,065 (-0,065 – 0,086)*	-0,011 (-0,140 – 0,012) 0,022 (-0,014-0,086)*

П р и м е ч а н и е: * – р<0,05 при сравнении с контрольной группой; ** – р<0,001 при сравнении с контрольной группой.

При дальнейшем статистическом анализе данных была выявлена корреляция гендерного индекса со значением нижнего болевого порога в группе мужчин на уровне статистической значимости (р=0,016), а в группе женщин на уровне статистической тенденции (р=0,104). При этом если в группе мужчин выявлена прямая корреляция данных показателей, то в группе женщин обратная, то есть в группе мужчин повышение нижнего болевого порога соответствовало снижению значения гендерного индекса

(снижению маскулинности), а в группе женщин его повышению (снижению фемининности). Таким образом, можно предположить, что высокое значение нижнего болевого порога ассоциировалось с потерей гендерной самоидентификации, при которой гендерный индекс близок к нулю.

Также анализ данных показал, что в группе мужчин с показателем нижнего болевого порога коррелирует стаж употребления ПАВ (р=0,039). Так, чем больше был стаж у зависимых от ПАВ мужчин, тем ниже был нижний болевой порог. В группе женщин стаж коррелировал с восприятием болевых ощущений (р=0,018). Чем больше был стаж употребления ПАВ у женщин с зависимостью, тем ниже был показатель переносимости боли по ВАШ, то есть чувствительность к боли была снижена.

При исследовании генетических особенностей обследованных лиц в группах сравнения были проанализированы частоты распределения генотипов и аллелей полиморфизма rs6746030 гена SCN9A. Результаты данного анализа приведены в таблице 2.

Таблица 2

Распределение частот генотипов и аллелей rs6746030 гена SCN9A у лиц, зависимых от ПАВ, из группы риска и контрольной группы

Группа	Генотипы			Аллели		Критерий χ2, p-value
	GG	AG	AA	G	A	2,656 р=0,617
Контрольная	82 (75,9%)	23 (21,3%)	3 (2,8%)	187 (86,6%)	29 (13,4%)
Группа риска	28 (82,4%)	5 (14,7%)	1 (2,9%)	61 (89,7%)	7 (10,3%)
Наркологические пациенты	74 (69,8%)	29 (27,4%)	3 (2,8%)	177 (83,5%)	35 (16,5%)

Распределение частот генотипов исследуемого полиморфного варианта гена SCN9A во всех трех группах соответствовало равновесию Харди– Вайнберга. Статистически значимых различий между группами выявлено не было.

В исследовании мы проводили анализ данных в общей группе обследованных лиц, а также в подгруппах женщин и мужчин. В группе мужчин различий выявлено не было (χ2=1,676, р=0,795). В то время как в группе женщин распределение генотипов исследуемого локуса статистически значимо различалось между группами (табл. 3).

Таблица 3

Распределение частот генотипов и аллелей rs6746030 гена SCN9A у женщин, зависимых от ПАВ, из группы риска и контрольной группы

Группа	Генотипы			Аллели		Критерий χ2, p-value
	GG	AG	AA	G	A	10,534 р=0,032*
Контрольная	48 (80,0%)	12 (12,0%)	0 (0%)	108 (90,0%)	12 (10,0%)
Группа риска	15 (83,3%)	2 (11,1%)	1 (5,6%)	32 (88,9%)	4 (11,1%)
Наркологические пациенты	10 (55,6%)	8 (44,4%)	0 (0,0%)	28 (77,8%)	8 (22,2%)

П р и м е ч а н и е: * – уровень значимости р<0,05.

Однако при попарном сравнении выявлено, что группа зависимых от ПАВ женщин отличалась лишь на уровне статистической тенденции от группы риска (χ2=5,60, р=0,06) и от контрольной группы (χ2=4,34, р=0,11), при этом вычисленное значение отношение шансов для гетерозиготного генотипа AG полиморфного варианта rs6746030 гена SCN9A составило 6,40 (95% Cl=1,12–36,44) при сравнении группы наркологических пациентов с группой риска и 3,20 (95% Cl=1,04–9,85) при сравнении с группой здоровых лиц.

Следующим этапом исследования было изучение ассоциации полиморфизма rs6746030 гена SCN9A с параметрами болевой чувствительности при формировании аддиктивной патологии. Показатели болевой чувствительности оценивались среди мужчин и женщин в сравниваемых группах в зависимости от носительства различных генотипов по полиморфному варианту rs6746030 гена SCN9A. Значения показателей нижнего и верхнего порогов у носителей разных генотипов исследуемого локуса статистически не различались ни в группе мужчин, ни в группе женщин.

Интересно, что в группе женщин с зависимостью от ПАВ показатель переносимости боли по ВАШ не только показал связь со стажем, но и на уровне статистической тенденции (χ2=2,946, р=0,086) был ас- социирован с генотипом полиморфного варианта rs6746030 гена SCN9A. Так, для генотипа АА данный показатель составил 6,0 (6,0–8,5), а для гетерозиготного генотипа AG он был ниже и составил 4,5 (3,5–6,5), то у носителей генотипа AG чувствительность к боли была снижена (приведены значения Median – LQ; UQ). В то же время связи генотипов со стажем нет (χ2=0,727, 0,394), что позволяет предположить, что на эмоциональное восприятие боли у зависимых от ПАВ женщин может влиять как стаж, так и их генетические особенности.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В ходе проведенной работы было выявлено, что женщины из группы зависимых от ПАВ имеют менее выраженную фемининную направленность гендерной самоидентификации, чем женщины из контрольной группы здоровых лиц. В группе мужчин, зависимых от ПАВ, нижний болевой порог был значимо выше, чем в контрольной группе. Выявлено, что значения гендерного индекса и нижнего болевого порога взаимосвязаны, что выражалось в корреляции этих показателей в группе мужчин и в группе женщин с зависимостью от ПАВ. При этом для более высоких значений нижнего болевого порога было характерно снижение выраженности фемининности у женщин и маскулинности у мужчин.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что болевая чувствительность у зависимых от ПАВ лиц, возможно, связана со стажем употребления ПАВ. Так, стаж зависимости коррелировал со значениями нижнего болевого порога у мужчин и у женщин, а также с переносимостью боли в группе женщин. Одновременно с этим на болевую чувствительность при аддиктивных расстройствах могут влиять и генетические факторы. Так, на уровне статистической тенденции была выявлена ассоциация генотипа AG rs6746030 гена SCN9A с переносимостью боли и с развитием зависимости от ПАВ в группе женщин. Натриевый канал NaV1.7, кодируемый геном SCN9A, преимущественно экспрессируется в ноцицептивных первичных сенсорных нейронах, где он усиливает деполяризацию [12, 13, 14]. В ранних исследованиях было показано, что с изменением болевого порога была выявлена ассоциация аллеля А полиморфизма rs6746030 [15]. Тем самым полученные нами результаты согласуются с литературными данными и выдвинутой нами гипотезой о вкладе данного локуса в регуляцию механизмов боли при зависимости от ПАВ.