Оценка радиопротекторных свойств фуллеренола для кроликов при тритиевом воздействии

Введение. На гомеостаз животных оказывают влияние различные экологические факторы, к одним из них относят малые дозы ионизирующего излучения. На сегодняшний день научная литература владеет экспериментальным материалом по влиянию субклинических доз ионизирующего излучения на многоклеточных животных. При воздействии ионизирующего излучения в малых дозах изменяются физиологические процессы на клеточном и тканевом уровнях, в результате возможно изменение гомеостаза всего организма, существует теория радиационного гормезиса [1]. В настоящее время в биосфере количество техногенных радионуклидов увеличивается, к основным радиобиологическим радионуклидам относят изотопы: ³H, ¹³⁷Cs, ⁹⁰Sr, ¹³¹I и ¹⁴C. Ионизирующее излучение воздействует на все уровни организации организма, изменяют органометрические показатели органов дыхания и пищеварения [2]. Установлен генотоксический эффект трития при хроническом воздействии на крыс, тритий потенцирует мутации в соматических клетках многоклеточного организма [3].

Тритий (Т, 3H) – радиоактивный изотоп водорода, открыт в 1934 г. Э. Резерфордом. Тритий имеет массовое число 3, атомную массу – 3,016 а.е.м., Т1/2 – 12,32 г, это бета-излучатель с энергией β-частиц 5,7 кэВ, пробег β-частиц в воздухе – до 6,0 мм, в воде и биологичкой ткани – 0,56 мкм [4, 5].

В соответствии с данными Л.Г. Бондаревой при тритиевом воздействии в 5 и 50 КБк/л наблюдалась наибольшая смертность икры и нарушение развития мальков Carassius gibelio ; накопление трития водными растениями Ceratophyllum и Lemna [6].

Биологические эффекты при воздействии трития в виде органических, неорганических соединений определяются физическими харак- теристиками β-частиц и пролиферативной активностью клеток биологической ткани, это определяет долю повреждений ДНК и ее способность к восстановлению. Исследование особенностей формирования биологических эффектов трития в многоклеточном организме, распределения трития в клетках, тканях и системах организма, задачи микродозиметрии трития, изучение молекулярных и клеточных эффектов при действии соединений трития относятся к важным вопросам радиобиологии. Следовательно, необходимы дополнительные исследования по оценке биологических откликов на воздействие трития, что сформирует современную тактику нормирования трития в объектах биосферы [7].

Радиопротекторные препараты – химические вещества для защиты организма от ионизирующего излучения (γ- или рентгеновских лучей, потоков протонов и нейтронов). Применение радиопротекторов формирует радиорезистентность – устойчивость организма к ионизирующему излучению. Анализ механизма противолучевой защиты показывает, что на фоне комбинированного применения радиопротекторов существенно повышается резистентность систем организма. Цитологический анализ показал, что при применении радиопротекторов в ишемическом участке в первые часы после облучения снижается доля дегенерирующих клеток, уменьшается количество клеток с хромосомными аберрациями. Под действием радиопротекторов уменьшается интенсивность проявления всех типов первичного лучевого поражения клеток радиочувствительных тканей, активизируется митоз, это способстует увеличению клеточного пула тканей.

Применение радиопротекторов снижает проявление повреждений костного мозга, в результате наблюдается снижение или ослабле- ние радиобиологических эффектов и повышение выживаемости. При этом снижается доля клеток, имеющих типичные радиационные поражения, в периферическую кровь поступает значительное количество жизнеспособных форменных элементов, это увеличивает скорость нормализации клеточного пула крови [8].

В защитном эффекте радиопротекторов значительный эффект принадлежит дифференцированной системной защите. Мексамин обладает защитным действием в отношении красного костного мозга, аминоэтилтифосфат защищает клетки красного костного мозга и желудочнокишечного тракта. При малых дозах или хроническом облучении накапливаются а-компонен-ты, образующиеся при крупных поражениях молекул ДНК, они плохо репарируются и модифицируются, а в-компоненты возникают при взаимодействии малых доз [8].

При воздействии ионизирующего излучения на организм применение радиопротекторов повышает радиорезистентность, при профилактическом использовании формируется защитный эффект, который снижает проявление радиационных эффектов и увеличивает выживаемость животных. Фармакологическая эффективность препаратов увеличивается при профилактическом применении, фармакологический эффект формируется после введения и сохраняется 6-8 ч.

При попадании ионизирующего излучения в клетку в цитоплазме потенцируется процесс радиолиза, в результате в цитоплазме в большом количестве образуются активные формы кислорода (АФК): супероксид-анион (О 2- ), гидроксильный радикал (ОН) и перекись водорода (Н 2 О 2 ). АФК повреждают органеллы клетки: ядро (ДНК), мембраны (белки, жиры). Большинство радиопротекторов имеют антиоксидантный эффект, они нейтрализуют воздействие свободных радикалов на клеточные структуры. Исследования показали, что повреждение ДНК, вызванное радиацией, является основной причиной задержки митоза и гибели клеток после облучения [10, 11].

Радиозащитный эффект радиопротекторов определяется снижением косвенного действия радиации на критические структуры клетки -ДНК, цитоплазму, биологические мембраны. Радиопротекторное действие определяется захватом и инактивацией АФК. Радиопротекторы активируют антиоксидантную систему организма, кратно увеличивают продукцию фермента супероксиддисмутазы, снижают содержание кислорода в цитоплазме клетки, что уменьшает развитие «кислородного эффекта» и проявлений оксидативного стрессового состояния [9]. Кислородный эффект (гипоксический механизм), протекторы вызывают снижение концентрации кислорода в тканях (особенно в селезенке) на 50 %, молекулы кислорода конкурируют с тиолами (SH-), находящимися около мишеней, тиолы восстанавливают повреждение клеточных структур. Согласно сульфгидрильной гипотезе, под влиянием радиопротекторов увеличивается содержание на 15 % в клетках эндогенных сульфгидрильных (тиольных) групп (SH). Радиационное поражение уникальных структур клеток (низкомолекулярные соединения в эндоплазматическом ретикулуме и органоидах) может вызвать репродуктивную гибель клеток. При развитии неспецифической реакции скорость реакции репродуктивной гибели замедляется, доля репарируемых повреждений увеличивается, происходит ослабление радиационного повреждения ферментативных систем, что сводится не к физико-химическим процессам, а к метаболическим изменениям.

Биологическая защита организма - это введение веществ, повышающих общую резистентность организма. Применение адаптогенов - веществ растительного происхождения, которые увеличивают пролиферацию клеток, уменьшают стрессовую реакцию в данном случае адаптоге-ны снижают мутагенное действие ионизирующего излучении. При радиационном воздействии применяют: лимон, родиолу розовую, чеснок, мумие, женьшень, прополис, пихту сибирскую.

На современном этапе развития науки известно более 3000 видов радиопротекторов, при радиационном воздействии применяют: амно-этилизотеуронй, метроокситриптамид, цистами, цистофос, серотонин, цистамид, диэтилстиль-бэстрол, фосфадитилэтаноламин.

Цистамин является распространенным радиопротектором, имеет высокую эффективность [12]. Применяется перорально, однократная доза для крупного рогатого скота 6–7 г [13]. Однако цистамин негативно воздействует на желудочно-кишечный тракт, центральную нервную, сердечно-сосудистую и дыхательную системы организма, что лимитиует его применение.

Диэтилстильбэстрол - синтетический эстроген, радиопротектор длительного действия, ра-диозащитный эффект формируется на 23-й день. Радиозащитный эффект диэтилстиль-бэстрола определяется системным воздейст- вием, изменением гормонального фона и активацией функции ретикулоэндотелиальной системы. Препарат изменяет пролиферативную активность красного костного мозга, что обеспечивает уменьшение гибели клеток в момент облучения и увеличение гемопоэза в последующем; влияет на функцию щитовидной железы, активизирует деятельность коры надпочечников, в результате снижается пострадиационный катаболизм и активизируется восстановление радиочувствительных тканей. Препарат стимулирует функцию ретикулоэндотелиальной системы, что увеличивает резистентность организма к токсемии и бактериемии. Однако существуют данные о канцерогенном действии ди-этилстильбэстрола, применение препарата значительно увеличивает риск злокачественных новообразований молочной железы, шейки матки, влагалища [12]. Н.В. Кондакова выявила эффективность диэтилстильбэстрола при воздействии радиации в умеренных (1,0-1,5 Гр) и малых (10-50 сГр) дозах. Однако, несмотря на положительное влияние на показатели красной крови, снижение уровня перекисного окисления липидов в эритроцитах, применение препарата не привело к восстановлению исходного количества лейкоцитов и тромбоцитов [12]. В работах П.Г. Жеребченко рассматриваются радио-защитные вещества, относящиеся к группам индолилалкиламинов (в частности мексамин) и индралина (Б-190). Основным недостатком мек-самина является его медленное действие, эффективная дозировка для перорального применения 250 мг/кг. Индралин (Б-190): препарат относится к группе прямых альфа-адреномиметиков, предназначен для экстренного применения, обеспечивает защиту от внешнего облучения в течение одного часа. Применение препарата позволяет сохранить жизнь в 90 % случаев при получении смертельной дозы облучения [13].

Куркумин как радиопротектор для мелкого рогатого скота рекомендуется внутримышечно в дозе 3,1–3,5 мг/кг. [12]. О.В. Колесник в опыте на бактериальной среде при воздействии трития применяла в качестве детоксифицирующих соединений гумат 80 в концентрации 10-3 г/л и фуллеренол Сбо,7оОу(ОН)х (х = 22 - 24, у = 2 - 4). В результате установлено, что влияние трития на светящиеся бактерии ослабляется, препараты снижают как негативное (ингибирующее), так и стимулирующее (активирующее) воздействие трития. Полученные результаты подчеркивают значимость этих препаратов как нейтрализаторов вредных веществ в окружающей среде, особенно в районах, подверженных радиоактивному загрязнению. [14]. Р. Юсупов и Е.Н. Черненков выявили положительное влияние препарата «Биогумитель» на продуктивность бычков и кроликов, что говорит о положительном влиянии гуматов на организм животных [15].

Отрицательное воздействие ионизирующего излучения на многоклеточный организм создает необходимость в поиске безопасного и эффективного радиопротектора для защиты организма животных. В настоящей работе оценены радио-протекторные свойства фуллеренола С бо,7о О у (ОН) х (х + у = 24-28) при тритиевом воздействии.

Цель исследования - оценить радиопро-текторные свойства фуллеренола при тритие-вом воздействии на организм кроликов.

Задачи: сформировать поглощенную дозу трития в 63 мГр у кроликов; при применении фуллеренола оценить изменение биохимических показателей, фагоцитарный индекс клеток периферической крови; определить эффективную дозу фуллеренола.

Объекты и методы. Исследование проведено в 2023-2024 гг. в лаборатории кафедры внутренних незаразных болезней, акушерства и физиологии сельскохозяйственных животных Института прикладной биотехнологии и ветеринарной медицины, в научно-исследовательском, испытательном центре ФГБОУ ВО Красноярский ГАУ.

Для исследования выбраны кролики калифорнийской породы (возраст (7,3 ± 0,31) лет), вес (4,3 ± 0,21) кг). Для исследования были сформированы две опытные группы (по 10 животных), интактный и токсический контроль (по 10 животных). Животные токсического контроля и 2 опытных групп получали НТО (300 мБк/л) в течение 10 дней, в результате у животных была сформирована доза 63 мГр. После формирования дозы кроликам 2 опытных групп в течение 12 дней задавали НТО сочетанно с фуллерено-лом C60,70Oy(OH)x(x + y = 24 - 28), первой опытной группе - в концентрации 1 • 10-9 г/л, второй опытной группе - 1 • 10-11 г/л. Группа токсического контроля после формирования дозы 63 мГр продолжала получать НТО (300 мБк/л). Расчет поглощенной дозы осуществляли в соответствии с методикой, разработанной на кафедре радиохимии химического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова. Интактная группа животных получала воду из централизованной системы водоснабжения. Для оценки эффективности фуллеренола у животных всех групп проводили отбор проб крови на 4-, 8- и 12-й день применения радиопротектора. Отбор проб крови осуществлялся в утренние часы, образцы отбирались из краевой ушной вены в вакуумные пробирки с натрий гепарином. Рацион кормления и система содержания кроликов всех групп идентичные.

Биохимические исследования сыворотки крови проведены на базе научно-исследовательского, испытательного центра ФГБОУ ВО Красноярский ГАУ с использованием спектрофотометра ПЭ-5400 УФ и биохимического анализатора (DIRUI CS-T240). Количественное содержание глюкозы определяли фотометрическим методом при помощи «Ольвекс» диагно-стикума, содержание щелочной фосфатазы измеряли с помощью набора «Щелочная фосфа-таза-витал» на спектрофотометре ПЭ-5400УФ при длине волны 405 нм. Для подсчета количественного уровня ферментов аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ) использовали стандартный метод Райтмана – Френкеля на основе набора реагентов «АСТ-витал». Содержание мочевины определяли при применении набора реагентов «Мо-чевина-Витал». Количественная оценка креатинина исследовалась в цветной реакции на креатинин, концентрация кальция и фосфора определялась с применением набора реагентов «Кальций-витал», «Фосфор-витал». Для опре- деления концентрации общего белка использовали набор реагентов «Общий белок-витал». Фагоцитарную активность лейкоцитов крови оценивали после введения in vitro в пробы крови частиц латекса, опсонизированных белками пуловой сыворотки кроликов, при окраске 0,25 % раствором генцианвиолета, определяли активность фагоцитов микроскопией в камере Горяева на бинокулярном микроскопе «Микмед-м» при увеличении ×40, подсчитывали 100 клеток.

Статистическая обработка цифровых значений проведена методом вариационной статистики с применением t-критерия Стьюдента, различие данных признавали достоверными при условии Р ≤ 0,05.

Результаты и их обсуждение. В ходе исследования оценена фагоцитарная активность клеток периферической крови животных. Установлено, что при воздействии трития в дозе 63 мГр на организм кроликов ФИ (фагоцитарный индекс ) клеток периферической крови снижался в 1,19 раза (P ≤ 0,001), уменьшение ФИ является негативным фактором, отрицательно сказывающимся на гомеостазе организма животных (рис.). При действии трития в дозе 63 мГр возможно возникновение инфекционных патологий в различных системах организма, обусловленных развитием условно патогенной микрофлорой. Для нейтрализации тритиевого воздействия предлагается использование фуллеренола в концентрации 1 ∙ 10^–9 и 1 ∙ 10^–11 г/л.

ФИ,%

Фагоцитарный индекс лейкоцитов: ***P ≤ 0,001 относительно интактного контроля; ◊P ≤ 0,05, ◊◊P ≤ 0,01, ◊◊◊P ≤ 0,05 относительно токсического контроля Phagocytic index of leukocytes: ***P ≤ 0.001 relative to the intact control;

• ^◊P ≤ 0.05, ^◊◊P ≤ 0.01, ^◊◊◊P ≤ 0.05 relative to the toxic control

На 4-е сут применения фуллеренола в качестве радиопротектора фагоцитарный индекс увеличивался, при концентрации 1 ∙ 10-9 г/л ФИ повысился в 1,14 раза (P ≤ 0,05) относительно токсического контроля, при этом значение ФИ соответствовало диапазону значений интактного контроля. При использовании фуллеренола в концентрации 10–11 г/л на 4-е сут значение ФИ находилось в пределах токсического контроля, (рис. 1). На 8-е сут исследования значение ФИ у кроликов, получавших фуллеренол в дозе 10–9 г/л, находилось в пределах значений, зарегистрированных на 4-е сут, однако превышало значение токсического контроля в 1,17 раза (P ≤ 0,01). При использовании фуллеренола в концентрации 10–11 г/л на 8-е сут наблюдалось снижение ФИ в 1,27 раз (P ≤ 0,001) относительно токсического контроля, что является негативным фактором.

Таким образом, можно заключить, что фул-леренол в концентрации 10–9 г/л стабильно увеличивает фагоцитарную активность и возвращает значения ФИ в диапазон интактного контроля. Фуллеренол в концентрации 10–9 г/л рекомендован в качестве радиопротектора при тритиевом воздействии в субклинических дозах.

В работе определена динамика изменений биохимических показателей периферической крови при коррекции радиобиологического воздействия трития в дозе 63 мГр при помощи фуллеренола. При воздействии трития в дозе 63 мГр в сыворотке крови кроликов увеличивается концентрация фермента аланинаминот-ранферазы (АЛТ) в 2,9 раза (P ≤ 0,001), снижается количество аспартатаминотрансферазы (АСТ) в 2,12 раза (P ≤ 0,001) относительно интактного контроля. Уменьшается содержание глобулинов в 1,2 раза (P ≤ 0,01), общего белка – в 1,1 раза (P ≤ 0,05), концентрация фосфора – в 1,33 раза (P ≤ 0,01), коэффициент Де Ритиса – в 1,4 раза (P ≤ 0,05) относительно данных интактного контроля. Воздействие трития в субклинической дозе увеличивает Ca/Р отношение в 1,24 раза (P ≤ 0,05) относительно данных интактной группы (табл. 1). При действии НТО в сыворотке крови кроликов не изменялось содержание глюкозы, креатинина и мочевины, концентрация кальция, магния и железа.

На 4-е сут применения фуллеренола в концентрации 1 ∙ 10-9 г/л в сыворотке крови кроликов снижалось количество АЛТ в 1,32 раза (P ≤ 0,05), при концентрации радиопротектора 1 ∙ 10–11 г/л – в 1,58 раза (P ≤ 0,01) относительно токсического контроля (см. табл. 1). Наибольший радиопротекторный эффект проявлялся при концентрации 1 ∙ 10–11 г/л.

Таблица 1

Биохимические показатели на 4-е сут применения фуллеренола как радиопротектора Biochemical parameters on the 4th day of using fullerenol as a radioprotector

Показатель	Интактный контроль	Токсический контроль (63мГр)	Опытные группы
			№ 1 (1 ∙ 10-9)	№ 2 (1 ∙ 10-11)
АЛТ, Ммоль/(л·ч)	1,21±0,02	3,52±0,17***	2,67±0,35◊	2,22±0,33◊◊
АСТ, Ммоль/(л·ч)	2,18±0,01	1,03±0,13***	2,38±0,32◊◊	2,05±0,21◊◊◊
Коэфф. Де Ритиса	0,84±0,08	0,60±0,06*	0,88±0,01◊◊◊	1,02±0,10◊◊
Щелоч. фосфатаза, Ед/л	232,16±26,5	244,5±11,04	208,58±12,48	213,90±10,81
Альбумин, г/л	40,29±1,06	40,67±1,01	41,7±0,9	41,33±1,56
Глобулины г/л	23,83±1,23	18,65±1,16**	26,20±3,00◊	30,57±2,80◊◊◊
Альбумин/глобулин	1,79±0,09	2,26±0,18*	1,93±0,63	1,40±0,08◊◊◊
Глюкоза, ммоль/л	7,01±0,48	6,50±0,27	5,89±2,97	8,24±0,62◊
Общий, белок г/л	64,12±1,80	59,32±1,17*	70,9±2,8◊◊	72,9±4,26◊◊
Креатинин, мкмоль/л	78,96±3,47	82,7±12,24	73,00±4,00	81,67±2,19
Мочевина, ммоль/л	7,52±0,42	8,36±0,98	8,73±1,14	8,56±0,39
Кальций, ммоль/л	3,66±0,11	3,61±0,11	3,7±0,06	3,67±0,10
Фосфор, ммоль/л	1,78±0,13	1,34±0,08**	1,88±0,03◊◊◊	1,61±0,02◊◊
Магний, ммоль/л	1,40±0,04	1,25±0,08	1,39±0,08	1,31±0,06
Железо, мкмоль/л	25,74±1,16	25,08±2,34	35,85±9,15	26,63±1,77
Натрий, мкмоль/л	133,68±12,76	166,02±17,48	206,60±12,60	198,47±15,10
Калий, мкмоль/л	4,15±0,23	5,15±0,58	6,05±0,05	5,57±0,17
Соотношение Са : Р	2,22±1,13	2,76±0,20*	2,03±0,36	2,28±0,09◊

Примечание: *P ≤ 0,05, **P ≤ 0,01; ***P ≤ 0,001 относительно интактного контроля; ◊P ≤ 0,05, ◊◊P ≤ 0,01; ◊◊◊P ≤ 0,001 относительно токсического контроля.

Содержание АСТ на 4-е сут применения фул-леренола увеличивалось (восстанавливалось). При концентрации фуллеренола 1 ∙ 10–11 г/л концентрация АСТ возрастала в 1,99 раза (P ≤ 0,001), при концентрации 1 ∙ 10–9 г/л – в 2,31 раза (P ≤ 0,01). Коэффициент Де Ритиса на 4-е сут применения радиопротектора повышается: при концентрации 1 ∙ 10-11 г/л – в 1,7 раза (P ≤ 0,01), при концентрации 1 ∙ 10-9 г/л – в 1,46 раза (P ≤ 0,001).

Концентрация глобулинов при воздействии трития в дозе 63 мГр снижалось в 1,28 раза (P ≤ 0,01) относительно интактного контроля. На 4-е сут применения фуллеренола содержание глобулинов в сыворотке крови кроликов увеличивалось (восстанавливалось до значений интактного контроля). Уровень глобулинов на 4-е сут возрастал при концентрации радиопротектора 1 ∙ 10–9 г/л в 1,4 раза (P ≤ 0,05), при концентрации 1 ∙ 10–11 г/л – в 1,64 раза (P ≤ 0,001) относительно токсического контроля. Наибольший радиопротекторный эффект восстановления уровня глобулинов проявлялся при концентрации фуллеренола 1 ∙ 10–9 г/л. При токсическом воздействии трития на организм возрастало отношение альбумин/глобулин относительно интактного контроля в 1,26 раз (P ≤ 0,05). На 4 сутки отношение альбу-мин/глобулин при применении фуллеренола в концентрации 1 ∙ 10-11 г/л снижалось в 1,61 раза (P ≤ 0,001) относительно токсического контроля. Количество общего белка при воздействии трития в дозе 63 мГр снижалось в 1,08 раза (P ≤ 0,05) относительно интактного контроля, что являлось негативным фактором. На 4-е сут применения фуллеренола в концентрации 1 ∙ 10–9 и 1 ∙ 10–11 г/л увеличивалось (восстанавливалось) содержание общего белка в сыворотке крови кроликов в 1,2 раза (P ≤ 0,01) относительно данных токсического контроля. При концентрации радиопротектора 1 ∙ 10-9 г/л уровень общего белка находился в диапазоне интактного контроля, что свидетельствовало о радио-протекторном действии.

Содержание фосфора при действии НТО в дозе 63 мГр снижалось в 1,33 раза (P ≤ 0,01) относительно интактного контроля, что расценивалось как негативный фактор. Уровень фосфора на 4-е сут применения фуллеренола в концентрации 1 ∙ 10–11 г/л увеличивался (восстанавливался до значений интактного контроля) в 1,2 раза (P ≤ 0,01), при концентрации 1 ∙ 10–9 г/л – в 1,4 раза (P ≤ 0,001) относительно данных токсического контроля. Воздействие трития на организм кроликов приводило к повышению Ca/P отношения относительно интактного контроля в 1,24 раза (P ≤ 0,05). На 4-е сут применения фуллеренола в концентрации 1 ∙ 10-11 г/л Ca/P отношение снижалось в 1,21 раза (P ≤ 0,05).

Таким образом, на 4-е сут применения фул-леренола восстанавливались следующие биохимические показатели сыворотки крови кроликов: концентрация АЛТ, АСТ, коэффициент Де Ритиса, содержание глобулинов, альбуминов, общего белка, фосфора, соотношение Са/Р. При этом наибольшую эффективность демонстрировал фуллеренол в концентрации 1 ∙ 10–9 г/л.

На 8-е сут применения фуллеренола содержание АСТ увеличилось: при концентрации радиопротектора 1 ∙ 10–11 г/л – в 2,91 раза (P ≤ 0,001), при концентрации 1 ∙ 10-9 г/л – в 3,13 раз (P ≤ 0,001) относительно данных токсического контроля (табл. 2). Повышение (восстановление) концентрации АСТ при применении фуллеренола до значений интактного контроля нами расценивалось как положительный фактор, доказывающий радиопротекторные свойства фуллеренола. Наибольший радиопротектор-ный эффект восстановления АСТ проявлялся при концентрации фуллеренола 1 ∙ 10–11 г/л. Коэффициент Де Ритиса на 8-е сут применения фуллеренола возрастал при концентрации 1 ∙ 10–9 г/л – в 1,8 раза (P ≤ 0,05), при концентрации 1 ∙ 10–11 г/л – в 1,73 раза (P ≤ 0,01). Наибольший радиопротекторный эффект восстановления коэффициента де Ритиса проявлялся при концентрации фуллеренола 1 ∙ 10–11 г/л. Содержание фосфора на 8-е сут применения фуллеренола находилось в диапазоне данных интактного контроля, при этом превышало значения токсического контроля при концентрации радиопротектора 1 ∙ 10–9 г/л в 1,19 раза (P ≤ 0,05). На 8-е сут сохранялась динамика снижения Ca/P отношения относительно токсического контроля. Наибольший радиопротекторный эффект восстановления отношения Ca/P проявлялся при концентрации фуллеренола 1 ∙ 10–9 г/л.

Таблица 2

Биохимические показатели на 8-е сут применения фуллеренола как радиопротектора Biochemical parameters on the 8th day of using fullerenol as a radioprotector

Показатель	Интактный контроль	Токсический контроль (63 мГр)	Опытная группа
			№ 1 (1 · 10-9)	№ 2 (1 · 10-11)
АЛТ, Ммоль/(л·ч)	1,21±0,02	3,52±0,17***	3,12±0,23	2,98±0,27
АСТ, Ммоль/(л·ч)	2,18±0,01	1,03±0,13***	3,22±0,28◊◊◊	3,00±0,45◊◊◊
Коэфф. Де Ритиса	0,84±0,08	0,60±0,06*	1,08±0,17◊	1,04±0,11◊◊
Щелоч. фосфатаза, Ед/л	232,16±26,5	244,5±11,04	217,02±10,25	226,14±15,37
Альбумин, г/л	40,29±1,06	40,67±1,01	40,86±0,75	40,66±0,78
Глобулины г/л	23,83±1,23	18,65±1,16**	19,12±1,56	15,90±0,74
Альбумин/глобулин	1,79±0,09	2,26±0,18*	2,35±0,19	2,65±0,16
Глюкоза, ммоль/л	7,01±0,48	6,50±0,27	7,02±0,49	7,79±0,39
Общий, белок г/л	64,12±1,80	59,32±1,17*	62,98±1,82	57,56±0,78
Креатинин, мкмоль/л	78,96±3,47	82,7±12,24	111,20±24,07	104,00±16,36
Мочевина, ммоль/л	7,52±0,42	8,36±0,98	8,22±0,46	8,01±0,63
Кальций, ммоль/л	3,66±0,11	3,61±0,11	3,76±0,07	3,54±0,14
Фосфор, ммоль/л	1,78±0,13	1,34±0,08**	1,59±0,04◊	1,45±0,06
Магний, ммоль/л	1,40±0,04	1,25±0,08	1,40±0,05	1,39±0,04
Железо, мкмоль/л	25,74±1,16	25,08±2,34	30,58±2,34	24,94±1,95
Натрий, мкмоль/л	133,68±12,76	166,02±17,48	190,04±2,07	185,16±5,13
Калий, мкмоль/л	4,15±0,23	5,15±0,58	5,54±0,43	4,96±0,15
Соотношение Са : Р	2,22±1,13	2,76±0,20*	2,42±0,16	2,44±0,11

Примечание : *P ≤ 0,05, **P ≤ 0,01; ***P ≤ 0,001 относительно интактного контроля; ^◊P ≤ 0,05, ^◊◊P ≤ 0,01; ^◊◊◊P ≤ 0,001 относительно токсического контроля .

Таким образом, на 8-е сут применения радиопротектора восстанавливалось содержание АСТ, фосфора, значение коэффициента Де Ритиса, наибольшая эффективность наблюдалась при концентрации 1 ∙ 10–11 г/л. На основании установленной динамики биохимических показателей сыворотки крови кроликов при воздействии трития в дозе 63 мГр рекомендовано применение фулле-ренола в концентрации 1 ∙ 10–9 и 1 ∙ 10–11 г/л.

Заключение. При воздействии трития в дозе 63 мГр на организм кроликов снижется фагоцитарный индекс, в сыворотке крови увеличивается концентрация АЛТ и Ca/Р отношение. При воздействии трития в субклинической дозе снижается содержание АСТ глобулинов, общего белка, фосфора и коэффициент Де Ритиса. Установленные биохимические изменения свидетельствуют о токсическом воздействии трития на печень и почки. Уменьшение фагоцитарной активности клеток периферической крови является неблагоприятным фактором, свидетельствующим о снижении неспецифической резистентности организма. Воздействие трития в дозе 63 мГр на организм кроликов провоцирует патологические процессы в печени, почках и снижает устойчивость организма к неблагоприятным факторам. При применении радиопротектора фуллеренола в концентрации 10–9 г/л стабильно увеличивается фагоцитарная активность и ее значения возвращаются в диапазон интактного контроля. Применение фулле-ренола восстанавливает до значений интактного контроля концентрацию АЛТ, АСТ, коэффициент Де Ритиса, содержание глобулинов, альбуминов, общего белка, фосфора, соотношение Са/Р. Фуллеренол в концентрации 10–9 г/л рекомендован в качестве радиопротектора при три-тиевом воздействии в субклинических дозах.