Оценка сенсибилизирующих, раздражающих, резорбтивных свойств и кумулятивного эффекта комплексного препарата «Карнивит»

Введение. Принцип комплексности ветеринарной терапии подразумевает сочетанное воздействие на животное при проведении лечебных мероприятий этиотропных, патогенетических и симптоматических средств. Принцип профилактичности основывается на том, что как можно более раннее применение данных средств позволит предотвратить развитие болезни. На совершенной реализации данных принципов должно строиться проведение эффективных лечебно-профилактических мероприятий в промышленном свиноводстве. Вместе с тем в данной отрасли животноводства отмечается нехватка эффективных лекарственных средств, позволяющих комплексно воздействовать на механизм развития патологии при болезнях печени [1–3].

К комплексным средствам патогенетической терапии для свиноводства относится разработанный нами комплексный ветеринарный препарат «Карнивит». В его состав входят два компонента: компонент № 1, содержащий витамин Е, и компонент № 2, содержащий карнитина хлорид, цинк (в виде хелата цинка) и натрия цитрат. Действующие вещества препарата находятся в нем в физиологически обоснованных количествах и оказывают комплексное воздействие на различные составляющие патогенеза болезней печени.

Изучение его токсических свойств показало, что препарат относится к веществам малоопасным (ЛД 50 10800 мг/кг), не обладающим выраженной подострой и хронической токсичностью [4].

Вместе с тем изученные эффекты не позволяют в полной мере судить о токсических свойствах препарата, в частности о его влиянии на кожу, слизистые оболочки, а также о его возможной кумуляции в организме.

Цель исследования – определение безвредности препарата ветеринарного препарата «Карнивит».

Задачи : установление аллергического, местно-раздражающего и кумулятивного действия ветеринарного препарата «Карнивит».

Материалы и методы. Изучение аллергического, местно-раздражающего и кумулятивного действия препарата «Карнивит» проводилось в соответствии с «Методическими указаниями по токсикологической оценке химических веществ и фармакологических препаратов, применяемых в ветеринарии» [5].

Изучение аллергенных (сенсибилизирующих) свойств проводили на кроликах массой 2–3 кг методом накожных аппликаций. В опытах по изучению аллергенных свойств препарата «Карнивит» было использовано 10 клинически здоровых кроликов, 5 из которых были подопытными, оставшиеся 5 – контрольными. У кроликов в области крестца на участке 2×3 см удалялся волосяной покров. Кроликам подопытной группы на оголенный участок наносилось по 0,1 мл эмульсии препарата (концентрация 5 %). На кожу кроликов контрольной группы наносилась эмульсия, не содержащая препарат. Обработка кроликов обеих групп проводилась в течение 15 дней подряд при систематическом контроле состояния их здоровья.

Оценку кожно-резорбтивного действия проводили на беспородных белых мышах обоего пола массой 18–20 граммов. Для оценки кожнорезорбтивного действия были сформированы 2 группы белых мышей: 5 животных в опытной и 3 – в контрольной группе. Мышей обеих групп помещали в ящички с отверстием для хвоста. Хвосты мышей опытной группы опускали в 2%-ю эмульсию препарата «Карнивит» на 4 часа. Хвосты мышей контрольной группы помещали в эмульсию, содержащую дистиллированную воду.

Оценка местного раздражающего действия на кожу проводилась на кроликах. Для этого были сформированы опытная и контрольная группы, в каждую из которых входило по 3 кролика. В области крупа каждого животного был выстрижен участок размером 2×3 см, на который была сделана аппликация препарата «Кар-нивит» из расчета 20 мг/см2 (опытная группа). Животным контрольной группы был нанесен порошок глюкозы. Экспозиция составила 4 часа, после чего аппликацию удалили теплой водой с мылом. Наблюдение за животными обеих групп проводилось в течение 14 дней. Интенсивность покраснения оценивали визуально, степень отека – по нарастанию толщины кожной складки по сравнению с толщиной складки до нанесения аппликаций (при помощи кутиметра).

При отсутствии реакции кожи после однократного воздействия препарат наносили многократно на кожу 3 белых кроликов. Для этого на выстриженный участок тела (в области крупа)

наносили аппликации 2%-й эмульсии препарата. Аппликации делались ежедневно. Всего было сделано 20 аппликаций. Раздражающее действие оценивалось в баллах.

Оценка местного раздражающего действия на слизистые оболочки также проводилась на кроликах. Для этого была сформирована группа, в которую входило 3 кролика. Под верхнее веко правого глаза (опытный) каждому кролику была внесена капля 5%-й эмульсии препарата, левого глаза – эмульсия, содержащая дистиллированную воду. Реакцию оценивали дважды: через 5 минут после введения и через 24 часа. При этом визуально определяли наличие выделений, гиперемии конъюнктивы и роговицы, наличие отека век. Результаты оценивали в баллах.

Изучение кумулятивного эффекта проводили на беспородных белых мышах обоего пола массой 18–20 граммов методом ускоренного определения кумулятивного эффекта. Для изучения кумулятивного эффекта была сформирована группа белых мышей в количестве 8 животных. Препарат вводили белым мышам шприцем в желудок в виде эмульсии по 0,5 мл натощак. Первоначальная ежедневная доза составляла 1/10 от ЛД 50 (1080 мг/кг) и вводилась первые 4 дня. На 5-й день доза была увеличена в 1,5 раза и составила 1620 мг/кг, вводилась последующие 4 дня. На 9-й день доза была увеличена в 2 раза и составила 2160 мг/кг. В таком количестве препарат вводился 6 дней подряд. С 15-го дня препарат вводился в количестве 1/2 от ЛД 50 (5400 мг/кг). В таком количестве препарат вводился до 60-го дня опыта. Степень кумуляции оценивалась по Л.Н. Медведеву (1964).

Результаты и их обсуждение. Применение препаратов, даже разработанных на основе веществ, участвующих в физиологических процессах организма, без оценки их токсических свойств на лабораторных животных невозможно. Это касается и препарата «Карнивит», содержащего в своем составе ингридиенты, регулирующие разнообразные стороны обмена веществ через нормализацию функциональной активности печени. При некоторых условиях данные компоненты могут оказать сенсибилизирующее и раздражающее действие на организм.

В опытах по изучению аллергенных и местнораздражающих свойств препарата «Карнивит» исследования были проведены на кроликах.

При наблюдении за подопытными животными (оценка аллергических свойств препарата «Карнивит») не было отмечено отклонений в поведении и состоянии кожного покрова у кроликов подопытной группы по сравнению с животными контрольной группы. Также не было выявлено нарушений в состоянии дыхательной, пищеварительной и других систем животного организма.

После нанесения разрешающей дозы препарата по-прежнему не было обнаружено никаких изменений как со стороны кожи и шерстного по- крова, так и других органов и систем организма. Не отмечалось и изменений поведения кроликов.

При оценке местного раздражающего действия, вследствие отсутствия реакции кожи после однократного воздействия, препарат наносили многократно на кожу 3 белых кроликов. После 20 аппликаций случаев гибели кроликов, появления признаков интоксикации и раздражения кожи не установлено.

При балльной оценке были получены следующие результаты (табл. 1).

Таблица 1

Группа	Кожные изменения после окончания аппликации, через 1 час, 16 часов, баллов				Средняя суммарная балльная оценка по группе
	Количество животных	Интенсивность эритемы (визуально) (суммарно)*	Интенсивность отека (нарастание толщины кожной складки, мм) (суммарно)**	Сумма баллов
Контрольная	3	1	0	1	0,3
Опытная	3	1	1	2	1,3

* – отсутствие – 0 баллов, розовый тон – 1 балл; ** – отсутствие – 0 баллов, утолщение до 0,5 мм – 1 балл.

Результаты изучения местного кожного раздражающего действия препарата «Карнивит» на кроликах

Как следует из данных таблицы 1, суммарная балльная оценка раздражающего действия препарата «Карнивит» на кожу составила 1,3 балла.

Результаты оценки раздражающего действия препарата «Карнивит» на слизистые оболочки (в баллах) приведены в таблице 2.

Таблица 2

Количество животных	Изменения конъюнктивы и роговицы после внесения эмульсии через 5 минут, 24 часа, баллов				Средняя суммарная балльная оценка по группе
	Наличие выделений (слезотечения) (суммарно)*	Гиперемия конъюнктивы и роговицы (суммарно)**	Отек век***	Сумма баллов
П		равый глаз (опытный)
3	1	2	0	0	1,0
Левый глаз (контрольный)					Л 2
3	0	1	0	1	0,3

– отсутствие – 0 баллов, минимальное – 1 балл; ** – отсутствие – 0 баллов, слабовыраженная – 1

балл; *** – отсутствие – 0 баллов.

Результаты изучения раздражающего действия препарата «Карнивит» на слизистые оболочки кроликов

Как следует из данных таблицы 2, суммарная балльная оценка раздражающего действия препарата «Карнивит» на слизистые оболочки (правый глаз) составила 1,0 балла.

Оценка резорбтивного эффекта проводилась через 1 и 16 часов после окончания воздействия на мышей. Изменений состояния кожи (отечности, гиперемии, повышения местной температу- ры) у мышей опытной группы не установлено. Наблюдение за мышами проводилось в течение 14 дней после окончания опыта. Случаев гибели животных, появления признаков интоксикации и раздражения кожи хвостов не установлено.

Результаты оценки кумулятивных свойств препарата «Карнивит» приведены в таблице 3.

Таблица 3

Показатель	День введения
	1–4	5–8	9–14	15–60
Ежедневно вводимая доза	1080	1620	2160	5400
Суммарная доза за дни введения	4320	6480	12960	248400
Суммарная доза по периодам введения	4320	10800	23760	272160

Результаты оценки кумулятивного эффекта препарата «Карнивит» на белых мышах, мг/кг

Случаев гибели лабораторных животных при изучении кумулятивных свойств установлено не было. Поэтому расчет коэффициента кумуляции проводили по формуле суммарная доза к    ЛД 50 острое , где Кк – коэффициент кумуляции;

суммарная доза – количество вещества, поступившего в организм в результате введения в течение 60 дней, мг/кг массы;

ЛД 50 острое – ЛД 50 , полученная при определении острой токсичности.

При расчете было установлено, что

К к = (4320+10800+39960+288360)/10800 = 28,8.

Коэффициент кумуляции для препарата «Карнивит» составил 28,8.

При оценке аллергических свойств препарата «Карнивит» и его кожно-резорбтивного действия не было обнаружено отклонений в поведении и состоянии кожного покрова у кроликов и белых мышей подопытных групп, а также нарушений в дыхательной, пищеварительной и других системах животного организма. Это указывает на отсутствие у препарата «Карнивит» сенсибилизирующего и резорбтивного действия.

Поскольку суммарная балльная оценка раздражающего действия препарата «Карнивит» на кожу составила 1,3 балла, то раздражающий эффект был оценен как слабый. Как слабое раздражение было оценено действие препарата «Карнивит» на слизистые оболочки (суммарная балльная оценка – 1,0 балла).

Рассчитанное значение коэффициента кумуляции оказалась выше 5. Поэтому, согласно классификации химических веществ по степени кумуляции (Медведев Л.Н.,  1964), препарат

«Карнивит» относится к веществам четвертой группы – веществам со слабовыраженной кумуляцией.

Заключение . Исходя из проведенных исследований и полученных результатов, можно заключить, что препарат «Карнивит» оказывает слабое раздражающее действие на кожу и слизистые оболочки, не обладает сенсибилизирующим и кожно-резорбтивным действием, имеет слабовыраженную кумуляцию.