Оценка статуса аберрантного метилирования у больных миелодиспластическим синдромом и острым миелоидным лейкозом методом метилспецифической полимеразной цепной реакции

Эпигенетические нарушения, ассоциированные с развитием лейкемического фенотипа, в настоящее время стали предметом пристального внимания. Одним из фундаментальных процессов эпигенетических изменений является метилирование ДНК, и даже незначительные изменения в степени метилирования могут оказывать существенное влияние на дифференцировку и пролиферацию клеток. В этой связи, представляется актуальным анализ метилирования ДНК при онкогематологических заболеваниях для оценки широты распространения аберрантного метилирования генов-супрессоров опухоли и прогнозирования течения заболеваний.

Цель и задачи. Оценить частоту встречаемости аберрантного метилирования генов pl5^INK4B и SOX7 при различных вариантах миелодиспла-стического синдрома (МДС) и острого миело-бластного лейкоза (ОМЛ).

Материалы и методы. В качестве материала исследования использовали образцы геномной ДНК больных МДС и ОМЛ, заготовленных до начала специальной терапии. Для анализа метилирования ДНК использовали метод метилспецифической ПЦР — MSP (methylation-specific PCR), позволяющий оценить статус метилирования группы близкорасположенных CpG динуклеотидов в составе CpG-островков в промотор-ных областях генов.

Результаты. Для анализа были отобраны 20 больных МДС и 17 больных ОМЛ. Метилирование генов чаще обнаруживалось у больных МДС — 80% против 47,1% у больных ОМЛ. В группе пациентов с МДС метилирование генов было обнаружено у 16 из 20 (80%) человек.

Аберрантный статус генов pl5INK4B и SOX7 имел место у 5 (25,0%) и 16 (80,0%) больных, соответственно. У 11 больных выявлено метилирование только гена SOX7, метилирование гена pl5INK4B всегда сопровождалось аберрантным статусом гена SOX7. При вариантах без избытка бластных клеток метилирование генов SOX7 и pl5INR4B составило 63,6% и 18,2%, соответственно; р = 0,030. У больных с избытком бластов от 5% до 19% частота обнаружения аберрантного статуса соответствующих генов возрастала — 100% для гена SOX7 и 33,3% для гена pl5INK4B; р=0,002. Установлена тенденция сопряженности метилирования гена SOX7 с избыточным количеством бластов в костном мозге; г=0,452, р=0,045. В группе пациентов с ОМЛ метилирование генов pl5INK4B и SOX7 обнаружено у 8 из 17 (47,1 %) человек. Так же, как и среди больных МДС, частота выявления аберрантного статуса гена SOX7 была выше, чем гена pl5INK4B (47,1 % и 11,8%, соответственно); во всех случаях метилирование гена pl5INK4B сопровождалось метилированием гена SOX7.

Метилирование гена SOX7 с большей частотой выявлялось у больных миелоидными Ml и М2 (по классификации FAB) вариантами: 60% против 28,6% больных другими морфологическими вариантами; р =0,019. Из 10 больных, у которых была достигнута полная ремиссия (период наблюдения 1-19 месяцев, медиана 4 месяца), рецидив развился у 5, включая 1 из 4 (25,0 %) больных с отсутствием метилирования генов и 4 из 6 (66,7 %) больных с метилированием генов.

Выводы. Анализ аберрантного метилирования генов pl5^INK4B и SOX7 у 37 больных МДС

Санкт-Петербург 27-28 марта 2014 г.

ВСЕРОССИЙСКАЯ на учно-практическая конференция «КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА В ГЕМАТОЛОГИИ И СЛУЖБЕ КРОВИ»

и ОМЛ позволяет сделать предварительное заключение о различиях в статусе метилирования ДНК в зависимости от клинических и лабораторных характеристик МДС и ОМЛ. Не исключено негативное влияние аберрантного метилирования генов на характер течения миелоидных неоплазий. Данное пилотное исследование показало актуальность исследования статуса метилирования генов у больных МДС и ОМЛ.