Оценка токсичности комплексного противоподагрического препарата для птицы, проводимая в остром эксперименте

В современных условиях развития сельскохозяйственного производства нашей страны именно птицеводство является наиболее привлекательной отраслью с точки зрения рентабельности и технологической оснащенности. Высокие темпы интенсификации производства продукции из мяса птицы позволяют в кратчайшие сроки решать проблему дефицита животных белков в рационе населения до уровня, предусмотренного «Доктриной продовольственной безопасности Российской Федерации». Для ее реализации крупные птицеводческие предприятия помимо производственных регламентов, предъявляемых к условиям кормления и содержания птицы, используют селекционные наработки, направленные на выведение высокопродуктивных пород и кроссов птицы мясного направления, обладающих такими характеристиками, как интенсивный прирост живой массы, низкие затраты корма, высокий процент сохранности и отличные мясные качества [3, 7].

При этом для обеспечения быстрого набора мышечной массы на птицефабриках при кормлении птицы используют рационы с высоким содержанием белка, что зачастую приводит к нарушению их физиологического состояния и возникновению на этом фоне заболеваний метаболического характера, одним из которых является мочекислый диатез.

Мочекислый диатез (подагра) – это заболевание, при котором отмечается повышение уровня мочевой кислоты в сыворотке крови, а также осаждение кристаллов моноурата натрия в синовиальной жидкости и других тканях, в результате чего возникает воспаление в вовлеченных органах и тканях, причем возрастной предрасположенности к данной патологии у птиц не отмечено [1, 2].

Несмотря на распространенность подагры, препараты, направленные на ликвидацию мочекислого диатеза и оказание профилактического эффекта у сельскохозяйственной птицы, на сегодняшний день отсутствуют. Лечение как правило носит консервативный характер, в тяжелых случаях птицу отправляют на убой.

В связи чем возникает необходимость в создании комплексного противоподагрического препарата, который помимо высокой эффективности должен отвечать требованиям безопасности для организма животных.

Токсическая оценка любого нового лекарственного средства на органы-мишени устанавливается по характеристикам его доклинического действия, при котором значение имеет не только доза препарата и его экспозиция, но и потенциальная обратимость проявляемых токсических эффектов, позволяющих определить безопасность лекарственного средства и ширину его терапевтической активности [4, 5, 6, 11]. И начальным этапом токсикометрических характеристик является его острая токсичность – возможное отрицательное воздействие препарата на организм при однократном или повторном введении в течении одних суток.

Материал и методы исследований.

Объектом исследования явился комплексный противоподагрический препарат, в состав которого вошли компоненты синтетического, растительного и минерального происхождения, способные не только оказывать влияние на концентрацию мочевой кислоты в крови птиц, но и обеспечивать терапевтическое действие при подагрическом артрите.

Испытание проведено в соответствии с методическими указаниями, изложенными в «Руководстве по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» под общей редакцией профессора Р.У. Хабриева (2005), «Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств» (часть первая) под редакцией А.Н. Миронова (2012) [8, 9] на базе вивария ФГБНУ КНЦЗВ на половозрелых белых лабораторных крысах обоего пола с массой тела 335-362 г, отобранных методом рандомизации и сформированных в 2 группы – опытную и контрольную (n=8). Основными критериями включения животных в эксперимент было отсутствие клинических признаков заболевания, беременность (у самок) и разброс по массе тела, составляющий не более 10 % от внутригрупповой выборки. Каждому животному был присвоен индивидуальный номер, помечаемый перманентным маркером и фиксируемый на карточке клетки.

После формирования групп грызуны были подвергнуты двухнедельной карантинизации для последующей оценки их физиологического состояния и адаптации.

Содержание животных осуществлялось в типовых пластиковых клетках с температурным режимом +18-22°С в условиях естественного светового цикла на стандартной диете, без ограничений к потреблению пищи и воды. В день проведения эксперимента, за 6 часов до введения образца препарата все крысы были выдержаны на голодной диете.

Опытной группе крыс энтерально через атравматичный зонд однократно вводилась 20 % взвесь препарата в максимальном объеме – 5 мл. При перерасчете в объемный эквивалент количество сухого вещества, содержащегося во взвеси, составило 1,5 г препарата/животное, что соответствовало 6800 мг на килограмм массы тела. Группе контрольных животных внутрижелудочно вводилась дистиллированная вода в максимальном объеме (5 мл).

Оценка критериев острой токсичности проводилась по таким показателям как клиническое состояние, поведенческая активность, возможная количественная гибель крыс и сроки ее наступления. Контроль за животными и наблюдение для выявления признаков токсикоза продолжались в течение 14 суток от момента введения образца взвеси препарата. В первые сутки учет физиологического состояния проводился каждый час; следующие трое суток – каждые 8 часов; в оставшиеся дни оценка состояния крыс осуществлялась каждые 24 часа.

Результат исследований. По результатам проведенных исследований признаков интоксикации и случаев гибели при однократном введении 20 %-ной взвеси образца препарата в разовой дозе 5,0 мл выявлено не было. В первый час от момента введения образца у крыс наблюдалось снижение двигательной активности и нахохленность с отсутствием заинтересованности к потреблению корма и воды, при этом видимые слизистые оболочки были слегка цианотичны, а дыхание незначительно учащено (Рисунок 1).

В контрольной группе через 4555 минут от момента введения отмечался еще и повышенный диурез, обусловленный большим количеством введенной дистиллированной воды.

Полная нормализация клинического и физиологического состояния грызунов произошла в течение часа, сохраняясь в течение 14 дней эксперимента, при этом межгрупповые различия по массе тела были незначительными и не превышали 3 граммов, что может служить подтверждением отсутствия у препарата токсических свойств (Таблица 1).

Аналогичные результаты были установлены и по температуре тела животных (Рисунок 2).

Рисунок 1 – Динамика частоты дыхательных движений крыс за период опыта

Таблица 1 – Динамика массы тела крыс при внутрижелудочном введении 20 %-ной водной взвеси противоподагрического препарата (М±m; n=8)

Группа	День наблюдения	Масса тела, г и пол животного
		M (самцы)	F (самки)
Опытная	1	342,0±6,12	353,1±4,23
	7	344,3±5,18	356,9±3,46
	14	345,8±5,60	359,2±5,34
	Прирост массы (%)	1,11	1,72
Контрольная	1	344,2±3,66	352,6±4,27
	7	347,1±4,82	355,0±6,13
	14	349,5±5,16	358,5±5,34
	Прирост массы (%)	1,53	1,67

Рисунок 2 – Динамика температуры тела крыс за период опыта

Как следует из рисунка 2, в течение первых 12 часов после затравки, температура тела крыс опытной группы сохранялась в пределах верхних границ референсных значений, превышая показатели контрольных аналогов в среднем на 0,7 оС, однако, со вторых суток наблюдения межгрупповые различия нивелировались и в последующий период температура тела опытных крыс соответствовала видовой норме и существенно не отличалась от показателей контрольной группы (38,0-38,4 оС).

Заключение. Таким образом, данные токсикометрии при внутрижелудочном введении образца препарата, а также наблюдения за лабораторными крысами на протяжении 14 суток в постинтоксикационном периоде острого отравления, позволили по ГОСТу 32644-2014 «Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Острая пероральная токсичность – метод определения класса острой токсичности» отнести противопадагрический препарат к 5 классу опасности, а по ГОСТу 12.1.007-76 «Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности» – к 4 классу опасности (вещества малоопасные).

Резюме

В статье представлены результаты изучения острой токсичности нового комплексного противоподагрического препарата на лабораторных белых крысах. Установлено, что однократное внутрижелудочное введение максимальных доз препарата не вызывает клинической картины токсикоза и гибели животных, на основании чего по ГОСТу 12.1.007-76 «Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности» препарат отнесен к 4 классу опасности (вещества малоопасные).