Определение стабильности и срока годности растительного средства Нормотрофин

Процессы, происходящие при хранении лекарственных веществ, могут привести к изменению их химического состава или физических свойств. Это приводит к постепенной потере фармакологической активности и накоплению посторонних примесей [1]. Поэтому определение стабильности и срока годности лекарственных средств имеет первостепенное значение.

С использованием растительного сырья нами было разработано новое лечебное средство Нормотрофин, изучены его фармако-токсикологические свойства и проведены комплексные испытания на сельскохозяйственных животных [2,3,4,5].

Исходя из вышеизложенного, целью настоящих исследований явилось определение стабильности и срока годности Нормотрофина.

Материалы и методы исследования. Для установления срока годности изучаемого средства были отобраны 3 флакона, выдержанные с соблюдением температурных режимов в течение 12 и 24 месяцев.

Для оценки стабильности Нормотрофина проводили качественные реакции на наличие дубильных веществ, алкалоидов, флавоноидов и кумаринов. Учитывали концентрацию водородных ионов.

Наличие дубильных веществ в Нормотрофине определяли титрометрическим методом с помощью 1,0 % водного раствора квасцов железоаммонийных [6]. Для обнаружения алкалоидов использовали осадочную реакцию с 1,0 % раствором пикриновой кислоты, а также масс-детектор (квадруполь) после экстракции гексаном. Для выявления флавоноидов проводили цианидиновую пробу, а кумарины определяли по Г.А. Кузнецовой [6]. Концентрацию водородных ионов определяли с помощью универсального иономера – ЭВ-74.

После проведения качественного анализа определяли его активность путем внутримышечного введения белым крысам.

В опыте использованы 24 белые крысы с исходной массой тела 65,0–75,0 г обоего пола, содержащиеся в стандартных условиях вивария. Животные были распределены в 4 группы по принципу аналогов, по 6 животных в каждой.

Животные первой группы служили контролем, и им трехкратно, один раз в сутки, через каждые 48 часов, внутримышечно вводили воду для инъекций в объеме 0,2 мл. Крысам второй опытной группы аналогично вводили свежеприготовленное растительное средство Нормотрофин в дозе 0,5 мл/кг массы тела, третья группа получала разработанное средство после года хранения и четвертая – после двух лет хранения.

Критериями активности Нормотрофина служили гематологические показатели и динамика массы тела. Продолжительность эксперимента составила 42 сутки.

Результаты исследований. При определении стабильности и срока годности Нормотрофина установлено, что по цвету, прозрачности и запаху, все испытуемые образцы не имеют различий. Проведенные качественные реакции с использование 1,0 % водного раствора железоаммонийных квасцов позволили выявить наличие дубильных веществ во всех тестируемых образцах. В отличие от этого при идентификации в них алкалоидов, флавоноидов и кумаринов отмечено, что в первом (свежий) и во втором (изготовленный годом раньше) образцах имеются все перечисленные выше биологически активные вещества. В содержимом третьего флакона, который хранился в течение двух лет, ни одним из проведенных качественных реакций, не удалось обнаружить наличие определяемых биологически активных веществ. Концентрация водородных ионов во всех образцах составила 4,5–5,0.

• 1.    Динамика массы тела белых крыс при применении Нормотрофина различных сроков изготовления

• 2.    Гематологические показатели белых крыс при использовании Нормотрофина различных сроков изготовления

  Показатель	Группа
  	контрольная	1 - опытная	2 - опытная	3 - опытная
  	Исходные данные
  Эритроциты, 1012/л	6,1±2,13	6,08±0,17	6,02±0,25	6,02±0,19
  Лейкоциты, 109/л	8,76±0,46	8,86±0,38	8,24±0,44	8,4±0,3
  Гемоглобин, г/л	80,8±2,07	81,2±2,07	80,8±2,07	81,6±2,17
  	21 сут
  Эритроциты, 1012/л	6,0±0,14	6,31±0,11	6,34±0,04*	6,0±0,14
  Лейкоциты, 109/л	9,6±0,73	9,8±0,76	9,6±0,65	9,3±0,97
  Гемоглобин, г/л	82,8±1,52	84,8±2,3	84,8±2,41	80,0±1,41
  	42 сут
  Эритроциты, 1012/л	6,3±0,25	6,58±0,25	6,37±0,14	6,1±0,1
  Лейкоциты, 109/л	9,24±0,76	9,58±0,78	9,5±0,75	9,3±0,6
  Гемоглобин, г/л	83,2±1,67	84,0±2,45	82,8±1,95	84,0±1,87

Показатель	Группа
	контрольная	1 - опытная	2 - опытная	3 - опытная
	Исходные данные
Масса тела, г	56,4±2,68	56,8±2,88	56,0±3,54	56,8±1,62
	21 сут
Масса тела, г	97,2±3,78	111,6±2,05*	112,0±1,87**	100,8±3,51
Среднесуточный прирост, г	1,94±0,08	2,64±0,1**	2,7±0,12**	2,1±0,09
Относительный прирост за период, %	55,8±4,03	65,3±3,44	67,1±4,26	55,8±1,02
	42 сут
Масса тела, г	137,2±2,7	150±1,58**	148,8±2,07**	135,2±2,88
Среднесуточный прирост, г	1,96±0,03	2,22±0,04**	2,2±0,06**	1.86±0,04
Относительный прирост за период, %	83,7±2,43	92,3±1,61*	90,4±4,42	81,7±2,18

Примечание: *, ** - уровни достоверности различия, с соответственно р≤0,05; ≤0,01.

Учет результатов взвешиваний в      групп обладали не одинаковой энергией динамике показал, что животные разных      роста (табл. 1). В частности, на 21 сутки эксперимента, наибольшая масса тела, среднесуточный и относительный прирост был зарегистрирован у крысят первой опытной группы, которым применяли свежеприготовленный препарат и второй опытной группы, которые получали Нормотрофин изготовленный и расфасованный во флаконы годом раньше. Абсолютная масса тела при этом по сравнению с контролем в первой и второй опытных группах была выше от 14,8 до 15,2 % соответственно, при р≤0,05.

Среднесуточный прирост в первой и второй опытных группах составил 2,64 – 2,7 г., при 1,94 в контроле (р≤0,01). Относительный прирост массы тела в рассматриваемых опытных группах, превышал аналогичный показатель контрольных крысят от 17 до 20,2 %, но уровни достоверности были неразличимы.

В третьей опытной группе, которым применяли Нормотрофин двухлетней давности, все изучаемые показатели находились на уровне показателей контрольной группы.

На 42 сутки опытного периода масса тела и среднесуточный прирост крыс первой и второй опытных групп были также достоверно выше, чем у контрольных аналогов.

На данный срок исследования, в третьей опытной группе, так и не было установлено увеличения прироста массы тела, по отношению к контрольным значениям.

При анализе результатов гематологических исследований установлено, что исходные уровни содержания эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина во всех исследуемых группах были равнозначными и статистически не различимыми (табл. 2).

Примечание: * - уровень достоверности различия р ≤0,05

К 21 суткам было отмечено некоторое увеличение числа эритроцитов в первой и второй опытных группах, по сравнению с контрольными значениями, причем, только во второй опытной группе данный показатель был статистически достоверным. Количество лейкоцитов увеличилось во всех исследуемых группах и различий между группами по их содержанию не установлено. Уровень гемоглобина в первой и второй опытных группах повысился не значительно.

На 42 сутки опыта различия между группами по изучаемым показателям были не существенными, статистически не достоверными.

Заключение. При определении стабильности и срока годности Нормотрофина установлено, что изучаемое средство сохраняет свои свойства в течение одного года.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Соколов, В .Д. Ветеринарная фармация / В.Д. Соколов, Н.Л. Андреева, Г.А. Ноздрин и [др.]. // М.: КолосС, 2003. – 496с. 2. Медетханов Ф.А. Острая токсичность препарата «Нормотрофин» при подкожном введении /Ф.А. Медетханов // Вестник ветеринарии, 2011. – № 4(59). – С. 140-141. 3. Медетханов Ф.А. Определение хронической токсичности препарата «Нормотрофин» / Ф.А. Медетханов, Р.Р. Хисамов // Ветеринарный врач, 2012. – №3. – С. 31-33. 4. Медетханов, Ф.А. Воспроизводительная способность свиноматок и качество приплода при применении фитобиотика «Нормотрофин» / Ф.А. Медетханов // Ученые записки КГАВМ, 2012. – Т.212. – С. 333-337. 5. Папуниди, Э.К. Влияние «Нормотрофина» на биохимические показатели крови и качество мяса цыплят-бройлеров / Э.К. Папуниди, К.Х. Папуниди, Ф.А. Медетханов // Ученые записки КГАВМ, 2013. – Т.216. – С. 263-268.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СТАБИЛЬНОСТИ И СРОКА ГОДНОСТИ РАСТИТЕЛЬНОГО СРЕДСТВА НОРМОТРОФИН

Медетханов Ф.А. Резюме

В статье приведены результаты по выявлению стабильности и срока годности нового лечебного средства Нормотрофин. Качественными реакциями установлено, что химический состав и фармакологическая активность Нормотрофина не изменяется в течение одного года.

DETERMINATION OF THE STABILITY AND SHELF-LIFE OF VEGETABLE PEST NORMOTROFIN

Medetkhanov F.A.