Опыт борьбы и современные методы контроля оздоровления хозяйств от лейкоза крупного рогатого скота

Лейкоз крупного рогатого скота распространен в большинстве регионов с развитым молочным животноводством и занимает лидирующее положение среди инфекционных патологий этого вида животных. На долю лейкоза крупного рогатого скота приходится более 50 % от других нозологий. Болезнь поражает в первую очередь высокопродуктивных коров, что представляет серьёзную угрозу генофонду крупного рогатого скота не только в России, но и в других странах мира. Такая широкая распространённость, a также отсутствие средств профилактики и терапии определяют актуальность научных исследований в борьбе с лейкозом крупного рогатого скота [1].

На современном этапе борьбы с лейкозом животных, основой профилактических и оздоровительных мероприятий является своевременная и точная диагностика этой инфекции. Основу диагностики лейкоза крупного рогатого скота составляют серологические методы, которые основаны на обнаружении в сыворотке крови животных специфических антител к антигенам ВЛКРС.

Однако механизм развития эпизоотии лейкоза крупного рогатого скота имеет свои закономерности и научно обоснованный путь борьбы, который сводится к разрыву эпизоотической цепи между источником возбудителя инфекции и восприимчивым организмом [2, 3]. На основе разделения стада на серонегативные и серопозитивные группы, ГУВ КМ РТ предложен комплекс профилактических мероприятий по обеспечению стойкого благополучия стад по лейкозу. В зависимости от степени инфицирования скота разработаны схемы оздоровительных мероприятий для хозяйств с инфицированностью крупного рогатого скота: до 6 % (Cхема 1); до 30 % (Cхема 2) и более 30 % (Cхема 3). Согласно схемам оздоровительных мероприятий, хозяйства считаются оздоровленными после изолирования всех серопозитивных животных и получения 2-х подряд негативных результатов серологического исследования [4].

Целью настоящей работы являлось изучение эффективности оздоровительных мероприятий по схеме № 2 и разработке систем мероприятий по дальнейшему контролю за эпизоотическим состоянием по лейкозу коров в хозяйствах.

Материал и методы исследований.

Исследования проводились на базе ООО «Аксу-Агро» в период с 2018 по 2021 гг., где инфицированность стада с ВЛКРС была около 30 %. Использовали схему оздоровления № 2 утвержденный ГУВ КМ РТ.

РИД исследования проводили с использованием набора для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота (ТУ 10-19-442-87).

Для постановки ПЦР использовали тест-систему «ЛЕЙКОЗ» для выявления ДНК провируса лейкоза крупного рогатого скота в биологическом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Тест-система «ЛЕЙКОЗ» предназначена для выявления ДНК провируса лейкоза крупного рогатого скота в цельной крови крупного рогатого скота у животных старше 14-дневного возраста. Исследования проводились в Республиканской ветеринарной лаборатории.

Иммуноферментный анализ проб сывороток крови и молока проводили в непрямом твердофазном варианте с использованием коммерческих наборов реактивов производства Курской биофабрики.

Результат исследований. С начала оздоровительных мероприятий с 2018 по 2021 годы проведены серологические исследования более 15 тыс. проб сывороток крови от различных групп крупного рогатого скота

В таблице 1 представлены сравнительный анализ результатов РИД за эти годы.

Таблица 1 – Сравнительный анализ результатов РИД

Показатель	2018			2019			2020			2021
	о О СО	+ к Рн	хО	о СО	+ S Рц	х°	о о О аз	+ S &			+ ч S рц	\О
Всего	3165	881	28	3473	1116	32	2699	379	14	3253	0	0
Коровы	1595	762	48	1668	934	56	1130	375	33	1392	0	0
Нетели	188	18	9	130	6	5	922	0	0	108	0	0
Телки 12-20	544	78	14	803	120	15	374	0	0	403	0	0
Телки 8-11	372	23	6	606	56	9	0			0

По результатам исследований, к началу оздоровительных мероприятий инфицированность всего поголовья составила 28 %. Последовательное проведение всех мероприятий, предусмотренных «схемой оздоровления №2», позволили свести показателей РИД положительных проб к нулю.

Согласно «Правилам по профилактике и борьбе с лейкозом крупного рогатого скота, утвержденные приказом Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации № 359 от 11.05.1999г.» особое внимание в оздоровленных хозяйствах должно уделяться мерам профилактики и контроля за эпизоотическим состоянием по лейкозу.

В настоящее время, наряду с серологическими методами исследования, в диагностике лейкоза крупного рогатого скота и в качестве индикатора инфицированности животных ВЛКРС при проведении противолейкозных мероприятий регламентировано применение полимеразной цепной реакции (ПЦР) [6, 8].

По плану оздоровительных мероприятиях ПЦР исследования используются для телят от 14-30-дневного возраста в целях экономии средств и не допущения на выращивание инфицированного ремонтного молодняка до 6 мес. возраста.

Совместно с Республиканской ветеринарной лабораторией за 2020-21 годы всего исследованы методом ПЦР 1873 пробы крови от телок разных возрастов. Результаты исследований представлены в таблице 2.

Если в 2020 году и в первой половине 2021 года в группе телят до 30-дневного возраста выявляются ПЦР положительные животные, то, как видно из табличных данных, во второй половине 2021 года таких животных нет.

Причиной положительных ПЦР тестов у телят являлось не выявленные РИД исследованиями инфицированные коровы – матери. M.J. Vander Maatan и др. еще с 1978 года [9] доказывают, что телята заражаются вирусом лейкоза крупного рогатого скота в основном в первые часы жизни после рождения, если их кормить молозивом от больных коров-матерей.

Таблица 2 – Результаты ПЦР исследований проб крови за 2020 и 2021 г.

Показатель	2020г.		2021 (январь-июль)		2021 (сентябрь-декабрь)
	всего проб	ПЦР +	всего проб	ПЦР +	всего проб	ПЦР +
Телки 4-7 мес.	487	0	306	0	30	0
Телята до 30 днев. возраста	539	44	453	12	58	0
Всего	1026	44	759	12	88	0

Общеизвестно, что чувствительность РИД недостаточно высокая и намного уступает методам ИФА. Исходя из этого принципа и для дополнительного контроля эффективности оздоровительных мероприятий, пробы сывороток крови от всего взрослого поголовья крупного рогатого скота исследовали в ИФА. Всего исследовано 1300 проб. Будучи все РИД отрицательными 17 проб в ИФА показали положительные результаты.

В целях выбора критерия оценки эффективности         оздоровительных мероприятий и для дальнейшего контроля за эпизоотическим состоянием проводили сравнительные исследования по ИФА сыворотки крови и молока у выявленных инфицированных коров. Об эффективности ИФА молока в диагностике лейкоза крупного рогатого скота отмечается и другими исследователями [5,7, 10].

Результаты          исследований представлены в таблице 3.

исследования сыворотки крови и молока

Таблица 3 – Результаты сравнительного инфицированных коров

№ проб	Титр антител
	ИФА сыворотки крови	ИФА молока
1.	1:216	1:8
2.	1:72	1:8
3.	1:72	-
4.	1:648	1:4
5.	1:216	-
6.	1:216	1:8
7.	1:72	1:16
8.	1:648	1:16
9.	1:648	1:8
10	1:216	-
11	1:72	1:16
12	1:216	1:8
13	1:648	1:8
14	1:216	1:4
15	1:72	1:8
16	1:72	-
17	1:216	1:8
18	-	-
19	-	-

Полученные результаты свидетельствуют о более низкой эффективности ИФА молока в диагностике лейкоза крупного рогатого скота по сравнению с ИФА сывороток крови. Так, 4 пробы (№ 3, № 5, № 10, № 16) в иммуноферментном анализе молока были отрицательные. Однако, если учесть то, что все пробы были отрицательные в РИД, то ИФА для выявления специфических антител в молоке по чувствительности не уступает РИД исследованиям. Поэтому данный метод как способ контроля за эпизоотической ситуацией по лейкозу в хозяйстве вполне может быть использован.

Заключение. Работа по введению здорового поголовья и изолированное содержание РИД положительных животных, согласно комплексному плану профилактических мероприятий по обеспечению стойкого благополучия стад по лейкозу дает существенное снижения вновь выявленных вирусоносителей и больных животных. Однако разработка и совершенствование мероприятий по контролю за эпизоотической ситуацией и эффективности оздоровления хозяйства от лейкоза крупного рогатого скота остается актуальной проблемой в животноводстве.

Если учесть доступность и простоту выполнения данного метода, а также трудности, связанные с взятием крови и созданием стрессовых ситуаций для животных, то исследования проб молока и сборного молока являются привлекательными для оценки благополучия хозяйств (мониторинга) по лейкозу крупного рогатого скота.

Резюме

В статье представлены методы диагностики и результаты изучения эффективности оздоровительных мероприятий и разработки систем мероприятий по дальнейшему контролю за эпизоотическим состоянием по лейкозу коров. Описана необходимость использования ИФА тестов, как более чувствительных, так как причиной положительных ПЦР тестов у телят являлось не выявленные РИД исследованиями инфицированные с ВЛКРС коровы–матери. Как один из критериев оценки эффективности оздоровительных мероприятий и для дальнейшего контроля за эпизоотическим состоянием рекомендуется ИФА молока.