Опыт применения антиагрегационной терапии при лечении клинического мастита у коров

При современных условиях ведения животноводства регистрируется довольно высокий уровень коров с заболеванием молочной железы. По данным ветеринарной отчетности за последние годы более 50 % растелившихся коров и нетелей в Вологодской области переболевает акушерско-гинекологическими болезнями, из них маститы составляют в среднем 44,7 % [1].

Мастит возникает в различные функциональные периоды молочной железы, но наибольшую опасность он представляет в период лактации. При воспалении молочной железы патологические изменения происходят не только местно в тканях и секрете железы, но и в системе гемостаза. Происходит активация гемостатических механизмов. Наблюдаются нарушения свертывающей и противосвертывающей систем крови в сторону повышенной склонности к тромбообразованию [2,3,4]. В связи с этим очень важно изучить роль антиагрегационных препаратов при применении их в схемах лечения маститов у коров.

Цель работы – обосновать использование антиагрегационной терапии у коров при лечении мастита.

Материал и методы исследования. Исследования проводили на коровах айр-ширской породы молочно-товарного комплекса «Майский» СХПК «Племзавод Майский» Вологодского района. Животные отбирались в группы по принципу пар-аналогов (с учетом возраста в отелах, стадии лактации, разового удоя по контрольной дойке при постановке на опыт, удоя за предыдущую лактацию). Было сформировано две группы: опытная группа 1 и опытная группа 2. В опытную группу 1 вошли клинически здоровые животные, на 4 месяце лактации со средней продуктивностью за предыдущую лактацию 6426 кг молока. В опытную группу 2 включили коров с воспалением молочной железы.

Диагноз ставили на основе клинического исследования молочной железы (осмотр, пальпация вымени, обращая внимание на размеры, консистенцию и симметричность четвертей вымени, болезненность, местную температуру) и результатам пробного сдаивания. Наличие воспаления в молочной железе устанавливали на основании наличия болезненности, повышения местной температуры, изменений консистенций и цвета секрета вымени. Для подтверждения диагноза проводили пробу отстаивания и лейкоцитарную пробу.

Для лечения животных опытной группы 2 применяли Мастисан А внутрици-стернально, гомеопатический препарат Фиториган (внутримышечно суточная доза 10 мл, в течение 5 дней) в сочетании с агапурином (пентоксифиллином) (внутримышечно в виде 2% раствора, через день 3 дня).

Для достижения поставленной цели у опытных животных брали кровь из яремной вены в пластиковые пробирки, содержащие в качестве стабилизатора 3,8% раствор цитрата натрия в соотношении 1:9. Все исследования крови проводили в первые два часа после ее забора.

Для оценки функционального состояния системы гемостаза в крови определяли количество тромбоцитов и их агрегационные свойства, активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ), протромбиновое время (ПВ), тромбиновое время (ТВ) и фибриноген.

Количество тромбоцитов и тромбоцитарные индексы определяли на гематологическом анализаторе ВС-3000 PLUS (Китай).

Изменение агрегационных свойств тромбоцитов определяли путем вычисления СИАТ и ИДТ по Howard M.A. на фотоэлектроколориметре КФК-2. В качестве индукторов агрегации использовали АДФ, коллаген и ристомицин.

Показатели плазменного гемостаза (АЧТВ, ПВ, ТВ и фибриноген) определяли на одноканальном коагулометре Trombostat.

Полученные в ходе исследования результаты обрабатывались с помощью программного пакета Microsoft Excel. Значения результатов представлены в виде средней величины и стандартной ошибки средней (M±m). Сравнение между собой данных проводилось с применением t-критерия Стьюдента.

Результаты исследования.

Показатели крови животных опытной группы 1 мы использовали в качестве контроля при оценке функционального состояния системы гемостаза у животных двух опытных групп.

Результаты проведенных исследований по большинству изученных тестов свидетельствуют о повышении коагуляционного потенциала крови у коров больных маститом (табл. 1, 2, 3).

Количество тромбоцитов в периферической крови у коров с воспалением молочной железы до лечения было ниже (299,8 ± 21,89 тыс/мкл), чем у животных опытной группы 1, что отразилось и на показателе тромбокрита. Однако средний объем тромбоцитов в крови животных больных маститом был достоверно выше, чем у здоровых животных. Это указывает на усиление тромпоэза и увеличение числа молодых форм тромбоцитов. Активность тромбоцитов (табл. 2) с коллагеном у животных опытной группы 2 была выше, чем в опытной группе 1 (22,29 ± 2,95 %, Р ≤ 0,05). Коллаген активирует тромбоциты, воздействуя непосредственно на тромбоцитарные рецепторы или опосредованно через фактор Виллебранда. Это влечет за собой изменение формы тромбоцитов, их адгезию и дегрануляцию. Индекс дезагрегации тромбоцитов (табл. 2) с коллагеном был выше, чем у опытной группы 1, т.е. образующие тромбоцитарные агрегаты непрочные.

Таблица 1. Тромбоцитарные показатели крови коров айрширской породы

Показатели	Норма	Опытная группа №1 (n=10)	Опытная группа №2 (n=10)
			До лечения	После лечения
Тромбоциты, тыс/мкл	200-730	363,40±13,0	299,8 ± 21,89*	351,7 ± 18,44
Средний объем тромбоцитов, фл	4,5-6,7	7,40±0,2	8,4 ± 0,27**	8,19 ± 0,22*
Тромбокрит, %	-	0,27±0,01	0,255±0,026	0,287 ± 0,02

Примечание: *Р ≤ 0,05 в сравнении с опытной группой 1; * Р ≤ 0,01 в сравнении с опытной группой 1.

АДФ-индуцированная агрегация тромбоцитов была недостоверно ниже у животных опытной группы № 2 по сравнению с опытной группой 1. Коллаген-индуци-рованная агрегация тромбоцитов в опытной группе 2 была выше, чем в контрольной.

Индекс дезагрегации был ниже при индукции с ристомицином у больных животных.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о склонности тромбоцитов к обратимой гиперагрегации при маститах.

После применения лечения все тромбоцитарные показатели (количество тромбоцитов, их средний объем и тромбокрит) увеличились и стали приближены к показателям контрольной группы.

Мы получили, что у животных группы №2 после применения антиагрегантов СИАТ под воздействием АДФ и коллагена уменьшился (11,32 ± 2,69% (на 29,9%) и 19,56 ± 1,93% (на 12,25%) соответственно), ИДТ уменьшился при воздействии коллагеном и ристомицином.

Таблица 2. Агрегационная активность тромбоцитов крови коров айрширской породы

Индукторы агрегации	Опытная группа № 1 (n=10)	Опытная группа №2 (n=10)
		До лечения	После лечения
Суммирующий индекс агрегации тромбоцитов (СИАТ), %
АДФ	20,03±1,59	16,14±2,18	11,32±2,69*
Коллаген	13,36±0,93	22,29±2,95*	19,56±1,93*
Ристомицин	9,43±0,71	11,98±0,61*	12,52±1,73
Индекс дезагрегации тромбоцитов (ИДТ), %
АДФ	11,9±1,45	7,94±1,01*	8,84±2,04
Коллаген	2,43±0,29	9,6±2,72*	7,47±1,52**
Ристомицин	2,49±0,32	1,85±0,08	1,19±0,37*

Примечание: *Р≤0,05 по сравнению с опытной группой №1, **Р≤0,01 по сравнению с опытной группой №1.

Гемостазиологические изменения вторичного гемостаза у коров больных маститом представлены в таблице 3.

Таблица 3. Гемостазиологические показатели вторичного гемостаза у коров айрширской породы.

Показатели	Опытная группа №1 (n=10)	Опытная группа №2(n=10)
		До лечения	После лечения
АЧТВ, сек	59,99±2,8	31,45±1,63*	36,86±4,19*
ПВ, сек	20,88±0,25	26,35±1,12*	30,39±0,68•
ТВ, сек	18,66±1,16	18,89±0,55	20,62±0,91
Фибриноген, г/л	4,2±0,3	4,29±0,28	4,03±0,21

Примечание: *Р≤0,001 в сравнении с опытной группой №1; • Р≤0,01 в сравнении с началом опыта.

Активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ) характеризует первую фазу свертывания крови (внутренний путь). Протромбиновое время (ПВ) характеризует первую (внешний путь) и вторую фазы свертывания крови. Тромбиновое время (ТВ) и фибриноген характеризуют третью фазу свертывания крови. Фибриноген также является белком острой фазы.

У коров опытной группы 2 активность внутреннего пути свертывания крови была ниже, чем у коров контрольной группы. Такое сочетание как укорочение АЧТВ, удлинение ПВ (табл. 3) на фоне уменьшения числа тромбоцитов может свидетельствовать о наличии ДВС-синдрома при маститах.

После лечения АЧТВ у коров опытной группы №2 увеличилось на 17,2%, но не превышало значения контрольной группы. ПВ у коров опытной группы №2 после лечения достоверно (Р ≤ 0,01) увеличилось на 15,3 %.

ТВ у коров опытной группы 2 до лечения было незначительно выше, чем у животных контрольной группы. После лечения у больных животных наблюдали его заметное недостоверное увеличение – с 18,89±0,55сек до 20,62±0,91сек.

Фибриноген у больных маститом коров незначительно превышал показатели контрольной группы, что также свидетельствует о наличии воспаления. После лечения фибриноген снизился. Таким образом, укорочение ТВ на фоне снижения фибриногена дает основание предполагать об усилении антикоагулянтной активности крови.

Выводы:

У коров с клинической формой мастита отмечены особенности агрегации тромбоцитов, стимулированной различными индукторами.

Изменения в системе сосудисто-тромбоцитарного гемостаза у коров с клинической формой мастита характеризуются обратимой гиперагрегацией тромбоцитов.

Анализ плазменного гемостаза свидетельствует о наличии признаков ДВС-синдрома при маститах у коров, что обуславливает желательное применение анти-агрегантов и антикоагулянтов.

Использование антиагреганта «Агапурин» в патогенетической терапии маститов у коров снижает активность плазменных факторов крови, что оптимизирует процессы микроциркуляции в воспаленном органе и сокращает сроки лечения больного животного.