Особенности диагностики и патоморфологии эймериидозов норок в зверохозяйствах северо-западного региона Российской Федерации
Автор: Кузнецов Ю.Е., Белова Л.М., Гаврилова Н.А., Мкртчян М.Э., Сидоренко К.А., Муромцев А.Б.
Журнал: Сельскохозяйственная биология @agrobiology
Рубрика: Ветеринарная медицина
Статья в выпуске: 2 т.55, 2020 года.
Бесплатный доступ
Паразитарные болезни широко распространены у пушных зверей, особенно у норок. Кокцидиидозы занимают среди них особое место, поскольку часто протекают без выраженных симптомов и в ряде случаев несвоевременно диагностируются, причиняя при этом серьезный урон здоровью животных и нанося ощутимый экономический ущерб звероводческим хозяйствам. В представленной работе в звероводческих хозяйствах Северо-Западного региона РФ впервые была изучена паразитофауна, экстенсивность (ЭИ) и интенсивность инвазии (ИИ) норок, уточнен видовой состав эймериид молекулярно-генетическим методом, проведен анализ клинического и биохимического состава крови, а также патоморфологических изменений в кишечнике у больных эймериидозами животных. Впервые на территории Калининградской области был обнаружен вид Isospora еversmanni , а больных щенков норок удалось выявить с 13-суточного возраста. Даже при низкой ИИ у взрослых норок наблюдались патоморфологические изменения в тонком кишечнике. При высокой ИИ поражались все слои слизистой оболочки кишечника и отмечался выраженный диффузный, подострый лимфоплазмоцитарный энтерит. У больных норок были выявлены изменения в составе крови. Цель нашей работы заключалась в разработке комплексного подхода к диагностике эймериидозов норок, включающего изучение видового состава паразитирующих простейших, оценку экстенсивности и интенсивность инвазии, определение клинических и биохимических показателей крови здоровых и зараженных эймериидозами животных, а также установление патоморфологических изменений при эймериозе и изоспорозе, протекающих в хронической и бессимптомной форме. С 2013 по 2019 год в шести звероводческих хозяйствах Северо-Западного региона РФ (Ленинградская и Калининградская области) было обследовано 6118 зараженных эймериидами и интактных норок ( Mustela vison , M. lutreola Linnaeus, 1761, Neovison vison Schreber, 1777). Их них 294 норки были исследованы прижизненными (клиническое исследование животных, морфологическое и биохимическое исследование крови) и посмертными (патологоанатомическое вскрытие норок после эвтаназии, гистологическое и иммуногистохимическое исследования) методами. По результатам паразитологических исследований возбудители эймериидозов были выявлены у 2687 животных (ЭИ - 43,92 %). Преобладающими видами простейших оказались Eimeria vison , Е. furonis , Isospora laidlawi и I. eversmanni. Было проведено глубокое секвенирование региона V4 гена 18S рДНК и биоинформатический анализ, позволивший определить ОТЕ (операционные таксономические единицы) и установить их таксономическую принадлежность. Так нам удалось подтвердить результаты световой микроскопии. При этом последовательность выделенного фрагмента E. vison длиной в 383 п.н. имела наибольшее сходство (99,48 %) с последовательностью другого вида E. ictideа , которую мы взяли из GenBank. Чаще всего эймериидозы норок протекали в виде моноинвазий (37,20 %), микстинвазия двумя паразитами встречалась в 6,15 %, микстинвазия тремя простейшими - в 0,57 % случаев. Пик ЭИ в Северо-Западном регионе РФ у молодняка и взрослых норок приходился на лето. У животных в возрасте 1,5-6 мес эймериоз и изоспороз протекал преимущественно в острой и подострой форме, у норок старше 6 мес - в подострой, хронической и латентной. Содержание гемоглобина и эритроцитов в крови у больных эймериидозами норок было достоверно ниже, чем у здоровых, количество лейкоцитов, напротив, увеличивалось. У больных животных также наблюдалась эозинофилия, сегментоядерная нейтрофилия, количество базофилов увеличивалось в 2 раза, палочкоядерных нейтрофилов - в 1,6 раза. У больных животных отмечалась протеинемия, содержание общего билирубина и креатинина повышалось соответственно на 33,83 и 31,90 %, количество мочевины снижалось на 21,19 %. При проведении иммуногистохимических исследований антигены вируса чумы плотоядных, коронавируса и алеутской болезни норок не были выявлены. Был обнаружен легкий эозинофильный и лимфоплазмоцитарный энтерит, сопровождающийся редким некрозом крипт вследствие паразитирования эндогенных стадий кокцидий. Заражение кокцидиями как в виде моноинвазии, так и ассоциаций паразитов сопровождалось нарушением целостности слизистой оболочки кишечника. При высокой ИИ в процесс полиморфной клеточной инфильтрации вовлекались как собственная и мышечная пластины, так и подслизистая основа. При этом возникал «синдром повышенной проницаемости кишечника», что сопровождалось нарушением функции желудочно-кишечного тракта.
Норки, эймерии, изоспоры, простейшие, патогенез, патоморфология, гистология, иммуногистохимия
Короткий адрес: https://sciup.org/142226339
IDR: 142226339 | DOI: 10.15389/agrobiology.2020.2.378rus
Список литературы Особенности диагностики и патоморфологии эймериидозов норок в зверохозяйствах северо-западного региона Российской Федерации
- Кузнецов Ю.Е. Эймериидозы норок. Современная наука: актуальные проблемы и пути их решения, 2015, 1(14): 48-50.
- Кузнецов Ю.Е. Кишечные паразитозы пушных зверей в хозяйствах Ленинградской области. Канд. дис. СПб, 2012.
- Сафиуллин Р.Т. Эймериоз и изоспороз пушных зверей и меры борьбы с ними. Российский паразитологический журнал, 2008, 2: 84-99.
- Кузнецов Ю.Е. Клинические признаки и патологоанатомические изменения при микстинвазиях у песцов и лисиц. Международный вестник ветеринарии, 2019, 4: 43-50.
- Hasnain S.Z., Gallagher A.L., Grencis R.K., Thornton D.J. A new role for mucins in immunity: insights from gastrointestinal nematode infection. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2013, 45(2): 364-374 ( ). DOI: 10.1016/j.biocel.2012.10.011
- Turner J.E., Stockinger B., Helmby H. IL-22 mediates goblet cell hyperplasia and worm expulsion in intestinal helminth infection. PLoS Pathogens, 2013, 9(10): e1003698 ( ).
- DOI: 10.1371/journal.ppat.1003698
- Chen T.-L., Chen S., Wu H.-W., Lee T.C., Lu Y.-Z., Wu L-.L., Ni Y.-H., Sun C.-H., Yu W.-H., Buret A.G., Yu L.C.-H. Persistent gut barrier damage and commensal bacterial influx following eradication of Giardia infection in mice. Gut Pathogens, 2013, 5(1): 26 ( ).
- DOI: 10.1186/1757-4749-5-26
- Kuznetsov Y.E., Engashev S.V., Engasheva E.S., Nikonov I.N., Kuznetsova N.V. Microbial community studying of the dogs' gastrointestinal tract by the T-RFLP molecular genetic method and assessing the natural resistance of animals. Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences, 2018, 9(5): 1652-1660.
- Broadhurst M.J., Leung J.M., Kashyap V., McCune J.M., Mahadevan U., McKerrow J.H., Loke P. IL-22+ CD4+ T cells are associated with therapeutic Trichuris trichiura infection in an ulcerative colitis patient. Science Translational Medicine, 2010, 2(60): 60ra88 ( ).
- DOI: 10.1126/scitranslmed.3001500
- Tsubokawa D., Ishiwata K., Goso Y., Yokoyama T., Kanuka H., Ishihara K., Nakamura T., Tsuji N. Induction of Sda-sialomucin and sulfated H-sulfomucin in mouse small intestinal mucosa by infection with parasitic helminth. Experimental Parasitology, 2015, 153: 165-173 ( ).
- DOI: 10.1016/j.exppara.2015.03.008
- Полоз С.В. Ассоциативные паразитозы пушных зверей в Республике Беларусь. Актуальные проблемы патологии сельскохозяйственных животных, 2000, 2: 403-405.
- Jensen H.C. Coccidiose hos mink. Dansk Pelsdyravl, 1989, 8(52): 493.
- Klopfer U., Neuman M. A note оn coccidiosis in minks. Refuah Veterinath, 1970, 3(27): 122-124.
- Heimesaat M.M., Bereswill S., Fischer A., Fuchs D., Struck D., Niebergall J., Jahn H.-K., Dunay I.R., Moter A., Gescher D.M., Schumann R.R., Göbel U.B., Liesenfeld O. Gram-negative bacteria aggravate murine small intestinal Th1-type immunopathology following oral infection with Toxoplasma gondii. The Journal of Immunology, 2006, 177(12): 8785-8795 ( ).
- DOI: 10.4049/jimmunol.177.12.8785
- ГОСТ 25383-82 (СТ СЭВ 2547-80). Животные сельскохозяйственные. Методы лабораторной диагностики кокцидиоза. М., 1982.
- МУК 4.2.3145-13. Лабораторная диагностика гельминтозов и протозоозов. М., 2013.
- Белова Л.М., Гаврилова Н.А., Пудовкин Д.Н., Токарев А.Н., Кузнецов Ю.Е. Жидкость для диагностики ооцист кокцидий, цист балантидий и жиардий, яиц гельминтов разных классов, клещей, насекомых, их отдельных стадий развития. Пат. RU 2472154 C2 (РФ) МПК G01N33/48 A61D99/00. ФГБОУ ВО "СПБГАВМ" (РФ). № 2010153464/13. Заявл. 27.12.10. Опубл. 01.10.13. Бюл. № 1.
- Carreno R.A., Schnitzler B.E., Jeffries A.C., Tenter A.M., Johnson A.M., Barta J.R. Phylogenetic analysis of coccidia based on 18s rDNA sequence comparison indicates that Isospora is most closely related to Toxoplasma and Neospora. Journal of Eukaryotic Microbiology, 1998, 45(2): 184-188 ( ).
- DOI: 10.1111/j.1550-7408.1998.tb04523.x
- Wilcox J.J.S. Something for everyone: a review of "The biology and identification of the Coccidia (Apicomplexa) of carnivores of the world". The American Midland Naturalist, 2019, 181(1): 143-145 ( ).
- DOI: 10.1674/0003-0031-181.1.143
- Matsubayashi M., Takami K., Abe N., Kimata I., Tani H., Sasai K., Baba E. Molecular characterization of crane coccidia, Eimeria gruis and E. reichenowi, found in feces of migratory cranes. Parasitology Research, 2005, 97(1): 80-83 ( ).
- DOI: 10.1007/s00436-005-1404-9
- Ogedengbe J.D., Hanner R.H., Barta J.R. DNA barcoding identifies Eimeria species and contributes to the phylogenetics of coccidian parasites (Eimeriorina, Apicomplexa, Alveolata). International Journal for Parasitology, 2011, 41(8): 843-850 ( ).
- DOI: 10.1016/j.ijpara.2011.03.007
- Pastor A.R. Investigating enteric coccidiosis in the black-footed (Mustela nigripes) and domestic ferret (Mustela putorius furo). PhD. University of Guelph, 2017.
- Иммуногистохимические методы /Под ред. Г.А. Франка, П.Г. Малькова. М., 2011.
- Кузнецов Ю.Е., Белова Л.М., Гаврилова Н.А., Кузнецова Н.В., Ширяева В.А., Логинова О.А., Роберман М.Г. Дифференциальная диагностика эймериидозов норок от болезней вирусной этиологии иммуногистохимическим методом. Мат. III Межд. паразитологического симпозиума "Современные проблемы общей и частной паразитологии". СПб, 2019: 164-168.
- Герасимчик В.А. Кишечные паразитозы пушных зверей (этиология, эпизоотология, патогенез, диагностика, терапия и профилактика). Автореф. докт. дис. Минск, 2008.
- Duszynski D.W. Kvičerová J., Seville R.S. The biology and identification of the Coccidia (Apicomplexa) of Carnivores of the world. Academic Press, 2018.
- Petersen H.H., Yang R., Chriél M., Hansen M.S., Ryan U.M. Morphological and molecular characterisation of Eimeria vison-like oocysts (Apicomplexa:Eimeriidae) in farmed mink (Neovison vison) in Denmark. Parasitol. Res., 2018, 117(9): 2933-2939 ( ).
- DOI: 10.1007/s00436-018-5989-1