Особенности миграции тучных клеток

Материалы и методы. Задачей настоящего исследования является изучение путей и способа миграции ТК из костного мозга. Исследование проведено на 20 зрелых беспородных крысах весом 200–220 г, содержавшихся в условиях вивария в клетках по 2–3 однополых особи ad libitum, на сбалансированном рационе и обычном световом режиме (день – ночь). Опыты проведены с соблюдением норм и правил гуманного обращения с животными, в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных», регламентированных в приложении к приказу МЗ СССР №755 от 12.09.77, и строгом соответствии с требованиями Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации 1964 г. с изменениями от 1975, 1983 и 1989 гг.

Материал для морфологического исследования забирали в 10%-ный раствор нейтрального формалина, затем подвергали общепринятым методам обезвоживания и заливки в парафин. Гистологические срезы окрашивали гематоксилином и эозином, для выявления ТК – толуидиновым синим при рh = 2,0.

С целью изучения прохождения ТК через гематоэнцефалический барьер последние предварительно метились метиленовым синим путем введения красителя в ткани шейной области, прилежащие к основанию черепа. Через 24 ч, после выведения животного из опыта, проводилось гистологическое исследование ТК в оболочках мозга, где выявляли окрашенные метиленовым синим клетки.

Микроскопическому исследованию были подвергнуты костный мозг, кровеносные сосуды задних конечностей, магистральные сосуды других областей вплоть до каротидных артерий, входящих в полость черепа, а также мягкая мозговая оболочка. Гистологическое исследование костного мозга проводилось и на срезах бедренной кости новорожденных крысят.

Результаты исследования. Гистологическое исследование костного мозга новорожденных крысят, окрашенного гематоксилин-эозином, позволяет различить практически все виды гемопоэтических клеток. ТК в общей массе клеток представлены весьма скудно. Точно такая же количест-

Проблемы здравоохранения

венная характеристика ТК получена при окраске косного мозга толуидиновым синим. Локализация этих клеток в основном характеризуется периферическим расположением по окружности среза бедренной кости. В костном мозге ТК располагались на внешней оболочке кровеносных сосудов или синусов (см. рисунок). При этом в окружающей бедренную кость мышечной ткани обнаруживается значительное количество ТК. Однако по сравнению с ТК взрослых крыс они имели меньшие размеры, небольшое количество гранул, были менее контрастными.

В то же самое время в брыжейке тонкого кишечника и коже новорожденных крысят определяется значительное количество зрелых ТК.

Гистологическое исследование брюшной и грудной аорты взрослых крыс показало наличие на их поверхностной оболочке зрелых ТК, которые контактировали с адвентицией сосуда и прилегающей к ней жировой тканью (периваскулярная жировая ткань).

В опытах на крысах, которым вводился краситель (метиленовая синька) в область шеи у основания черепа, через 24 ч после введения красителя ТК утрачивали свою обычную окраску толуидиновым синим, их гранулы становились более темными. Такие измененные по окраске ТК содержались в ткани мозга и мозговых оболочках. Кроме того, в области основания черепа отмечались скопления ТК, преимущественно в периваскулярном жире.

Обсуждение результатов. Представители тучноклеточной популяции по мере созревания направленно мигрируют во все ткани организма. Данный факт отмечают все исследователи, подчеркивая вездесущность ТК в организме [3, 10].

Однако до настоящего времени остается дискуссионным вопрос о форме доставки ТК на периферию. В настоящей статье обсуждаются две альтернативные точки зрения.

Поскольку в отличие от других форм гемопоэтических клеток (эритроидная, миелоидная и др.) ТК не определяются в периферической крови, было предположено следующее. В кровь из костного мозга попадают не зрелые ТК, а их предшественники, которые не обладают характерными морфологическими характеристиками, присущими ТК. Они, достигая периферических тканей, дифференцируются до зрелого состояния под действием локального микроокружения [4, 11]. Однако до сих пор факт миграции ТК через стенку капилляра не был зафиксирован. Тем не менее исследователи показывают, что во всех тканях ТК расположены в тесной связи со стенкой кровеносных сосудов. Особенно ярко это выражено в препаратах брыжейки тонкого кишечника, мозговых оболочках, костном мозге [2]. Это позволяет думать о роли ТК в регуляции тонуса сосудов [9, 12]. Реальность такого предположения основана на наличии огромного количества биологически активных веществ в гранулах ТК [9, 12].

Другой точкой зрения может быть предположение, что такая локализация ТК есть результат их миграции по внешней оболочке кровеносных сосудов. Поскольку кровеносное русло пронизывает все органы и ткани, снабжая их питательными веществами и кислородом, то одновременно предоставляет и путь для ТК. Этим объясняется отсутствие ТК в периферической крови и наличием во всех тканях организма.

Какие доказательства позволяют говорить о миграции ТК по адвентиции сосудов? Это, прежде

ТК на внешней оболочке кровеносного сосуда, окраска толуидиновый синий, ув. х1000

Смелова И.В., Голощапова Ж.А., Попов Г.К.

всего, исследования по биохимической и иммунологической фильности ТК к структуре адвентиции [8]. Однако более доказательными являются сведения морфологического плана. Так по нашим наблюдениям, при исследовании аорты, системы каротидной артерии наличие ТК всегда отмечается в пространстве между адвентицией и жировой прослойкой.

Заключение. Таким образом, возможно представить трехмерную модель миграции ТК. Филь-ность последних к адвентиции обусловливается рядом адгезивных молекул, которые через рецепторы функционально связывают ТК с соедини-тельно-тканным каркасом сосудистой стенки [8]. Периваскулярная жировая ткань синтезирует и секретирует биологически активные вещества, выполняющие роль хемоаттрактантов [5, 13]. Ряд исследований подтверждает наличие таких свойств у гистамина и трансформирующего-β-фактора (ТF β ) [6, 7]. На наличие рецепторов к ним у ТК указывает Б.Г. Юшков [1]. Из семейства гистаминовых рецепторов определенная роль отводится H4R [6]. При взаимодействии с гистамином активируется сигнализация в ТК, отвечающая за повышение внутриклеточного Са²⁺ и активацию системы ино-зитол-3-фосфата [6].

Таким образом, взаимодействие хемоаттрактантов с Н4R стимулирует способность к передвижению ТК в пространстве между адвентицией и периваскулярной тканью, обеспечивая оптимальные условия для миграции.