Особенности нейроиммунорегуляции у лиц с опиоидной зависимостью

патологического процесса. Показано влияние цитокинов на исследовательскую активность, моторные реакции, депрессию, агрессивное поведение посредством нейроиммунных взаимодействий, установлено изменение их продукции при многих психических расстройствах [3, 4].

Ранее при обследовании пациентов с психическими и поведенческими расстройствами, вызванными употреблением психоактивных веществ (ПАВ), нами было показано, что цито-киновая система вовлекается в патогенетические механизмы формирования аддикции [5]. Изменение цитокинового баланса у наркозави-симых лиц на фоне абстинентного синдрома сопровождается сдвигами вегетативной реактивности, повышением агрессии, тревожности, что может быть результатом перестройки метаболизма нейромедиаторных систем и оказывать влияние на характер течения болезни. Собственными предварительными исследованиями установлено, что поисковая активность у наркологических пациентов сочетается с определенными сенсорными, иммунологическими и нейрофизиологическими сдвигами, которые могут быть вовлечены в патогенез расстройств, вызванных употреблением ПАВ.

Целью данного исследования было изучить особенности продукции цитокинов и синтеза антител к нейромедиаторам и их взаимосвязь с уровнями тревожности, агрессии и поисковой активности у лиц с опиоидной зависимостью.

Материалы и методы. О бследовано 76 человек в возрасте от 16 до 28 лет. В основную группу (49 человек) вошли лица с клиническим диагнозом «Психические и поведенческие расстройства вследствие употребления опиоидов» (шифр F11.2). Контрольную группу составили здоровые добровольцы (27 человек) соответствующего возраста. Все испытуемые дали добровольное согласие на участие в эксперименте, исследование было одобрено Локальным Этическим Комитетом при ФГБУ «НИИПЗ» СО РАМН.

Определение митоген-стимулированной продукции интерлейкина-1β (ИЛ-1β), интерлейкина-6 (ИЛ-6), фактора некроза опухолей альфа (ФНО-α) проводили в культуральных жидкостях. С этой целью цельную гепаринизированную кровь (0,6 мл) смешивали с 2,4 мл среды RPMI-1640 («Вектор-Бест», Новосибирск), дополненной 0,3 мг/мл L-глютамина, 5 мМ HEPES-буфера и 80 мг/мл гентамицина. Подготовленные таким образом образцы крови культивировали в иммунологических планшетах в присутствии липополисахарида (ЛПС, Sigma) в конечной концентрации 10 мкг/мл. Культивирование осуществляли в СО 2 -инкубаторе, после чего осторожно отбирали супернатанты и хранили при -80^oС до исследования [6]. Супернатанты

ЛПС-индуцированных культур исследовали на наличие ИЛ-1, ИЛ-6, ФНО-α иммунофермент- ным методом с использованием наборов реагентов производства ООО «Протеиновый контур» (Санкт-Петербург). В сыворотке крови определяли аутоантитела к серотонину, дофамину и норадреналину. Аутоантитела определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа на полистироловых планшетах, активированных тест-антигеном. В качестве тест-антигена использовали конъюгат нейромедиатора с бычьим сывороточным альбумином, синтезированный по ранее описанной методике. В качестве вторичных антител использовали антитела к иммуноглобулинам человека, меченные пероксидазой хрена (МЕДГАМАЛ).

Психологическое тестирование включало оценку показателей и форм агрессии с вычислением индекса агрессивности (ИА), индекса враждебности (ИВ) по A. Buss, A. Durkee, ситуативной (СТ) и личностной тревожности (ЛТ) [7], уровня потребности в ощущениях (ШПО) [8].

Статистическую обработку результатов проводили с помощью программы STATISTICA версия 6.0 для Windows с применением параметрических и непараметрических методов.

Результаты исследования и обсуждение. Исследование митоген-стимулированной продукции цитокинов выявило значимые различия в содержании ИЛ-6 и ФНО-α между лицами с опиоидной зависимостью и здоровыми лицами: у наркологических пациентов уровень продукции ИЛ-6 был более высоким, чем в контрольной группе, при меньшем уровне продукции ФНО-α (табл. 1).

Таблица 1

Продукция цитокинов, содержание кортизола и уровень потребности в ощущениях у лиц с синдромом зависимости от опиоидов и здоровых лиц

Примечание. * - p<0,05 при сравнении с контролем по критерию Манна-Уитни.

Межгрупповых различий в продукции ИЛ-1β не было обнаружено. Исследование поисковой активности выявило различия в значениях ШПО между наркологическими пациентами и контрольной группой: у лиц с синдромом зависимости от опиоидов был отмечен более высокий уровень потребности в ощущениях.

Изучение психологических особенностей выявило значимое повышение уровней тревож- ности и агрессивности у наркозависимых лиц по сравнению с лицами групп сравнения (табл. 2). Полученные нами данные указывают на то, что существует прямая зависимость между уровнями СТ (R=0,27, p<0,05), ЛТ (R=0,27, p<0,05) и продукцией ИЛ-6, а также между уровнем ЛТ и продукцией ИЛ-1β (R=0,30, p<0,05).

Таблица 2

Психологические параметры в обследуемых группах (M±m)

Примечание. * - p<0,05 при сравнении с контролем по критерию Манна-Уитни.

Экспериментальными исследованиями установлено, что иммунологические параметры, в частности уровень некоторых цитокинов, могут быть связаны со степенью агрессии [9]. Наблюдаемая у наркозависимых лиц повышенная тревожность, наряду с тенденцией к повышенной продукции интерлейкинов, может являться этапом протекания абстинентного синдрома, при котором именно последние определяют механизмы психонейроиммуномодуляции. Возможно, что в зависимости от того, каким образом будет изменяться цитокиновый баланс при отмене ПАВ, будут изменяться психический и иммунный статусы наркозависимых лиц.

Аутоантитела к исследуемым нейромедиаторам в невысоком титре выявлялись практически у всех здоровых лиц. Титр аутоантител к серотонину, дофамину и норадреналину у лиц контрольной группы составил в среднем 1:518 ±64,2, 1:407±47,6 и 1:435±30,9 соответственно. У больных наркоманией аутоантитела к нейромедиаторам выявлялись в более высоких титрах по сравнению с группой контроля. Так, титр аутоантител к серотонину в среднем по группе составил 1:1160±110,0, к дофамину – 1:736±54,2 и к норадреналину – 1:1000±90. Однако по титру выявляемых аутоантител группа больных разделилась на 2 подгруппы: с высокими (1:1200-1:2500) и низкими (на уровне контроля) титрами. Высокие титры аутоантител к серотонину и норадреналину были выявлены у половины больных (51,0 и 52,1 %). Аутоантитела к дофамину в высоких титрах обнаружены лишь у 28,6 %. Частота выявления и уровень аутоантител к нейромедиаторам зависит от периода заболевания: ремиссии, подострой и острой абстиненции. Период ремиссии характеризуется высокими титрами аутоантител к серотонину и норадреналину у большинства больных (61,5 и 69,2 %). Такая же тенденция характерна и для периода подострой абстиненции. Высокие титры аутоантител к серотонину и норадреналину (1:1600 и 1:1500) обнаружены у 75,0 и 62,5 % больных. Период острой абстиненции характеризуется существенным снижением (до контрольного уровня) титра аутоантител к серотонину и норадреналину у большинства больных (78,9 и 66,7 %). В то же время существенных изменений частоты выявления и титра аутоантител к дофамину в зависимости от периода заболевания не обнаружено. Таким образом, полученные предварительные данные показывают, что уровень аутоантител к серотонину и норадреналину является наиболее информативным критерием, а снижение их титра предшествует развитию периода абстиненции. Можно предположить, что аутоантитела к серотонину и норадреналину могут служить биологическими маркерами течения заболеваний.

В целом проведенное исследование показало, что для лиц с опиоидной зависимостью характерны изменения цитокинового профиля и синтеза аутоантител к нейромедиаторам на разных стадиях заболевания, сочетающиеся с повышением уровней тревожности, агрессии и поисковой активности, что может свидетельствовать о вовлеченности цитокиного и нейромедиаторного звеньев в механизмы аддиктив-ных расстройств.