Острая и хроническая токсичность янтарной кислоты и пробиотика КПМ-2 при совместном их применении

Неблагополучная экологическая ситуация и одновременная химическая нагрузка на сельскохозяйственных животных приводит к их хронической интоксикации, нарушению обменных процессов и, как следствие, к накоплению небезопасных веществ в продукции животноводствах [2, 3, 7]. Перспективным является разработка и применение препаратов, которые позволят снижать токсикологическую нагрузку на организм животных и одновременно оказывать положительное влияние на их энергию роста и развитие [1, 4, 5, 6].

Материал и методы исследований. Исследования по определению острой и хронической токсичности янтарной кислоты и пробиотика КПМ-2 при совместном их применении, были проведены в виварном корпусе ФГБОУ ВО Казанская ГАВМ.

Для эксперимента были задействованы лабораторные мыши в количестве 42 штук. Животные подобраны по принципу аналогов самцы и самки массой 18-20 грамм и разделены на шесть групп. Седьмая служила контролем.

Расчет острой токсичности препаратов ЯК и пробиотика КПМ-2 при их совместном применении:

ЛД 50 = Д 100 - ^;

ЛД₅о = Л 50 - ³⁸⁰⁰⁰ = 14000 — 6,333 = 7747 мг/кг ^{г 1}                        6

При определении кумулятивных свойств, препараты применяли в виде водных растворов внутрижелудочно, используя иглу с оливой на конце. В первые 4 дня каждой крысе вводили 1/10 от ранее установленной ЛД 50 ЯК(700 мг) и пробиотика 2 мл., затем каждые последующие 4 дня дозу препаратов увеличивали в 1,5 раза от предыдущих вводимых доз.

ЯК 4000 мг/кг и 0,1 мл/кг пробиотика получала первая группа; ЯК 6000 мг/кг и 0,2 пробиотика получала вторая группа; ЯК 8000 мг/кг и 0,4 мл/кг пробиотика получала третья группа; ЯК 10000 мг/кг и 0,6 мл/кг пробиотика получала четвертая группа: ЯК 12000 мг/кг и 0,8 мл/кг пробиотика получала пятая группа; ЯК 14000 мг/кг и 1,0 мл/кг пробиотика шестая группа.

Также было задействовано в эксперименте 10 белых крыс. Массой 180200 гр., при изучении кумулятивных свойств ЯК и пробиотика КПМ-2. Период эксперимента составил 36 суток.

Коэффициент кумуляции рассчитывался по следующей формуле

К.кум

ЛД50 хроническая ЛД острая

17,0

Результат исследований. При определении острой токсичности было установлено, что при дозах 4000 мг/кг ЯК и 0,1 мл/кг пробиотика и дозе ЯК 6000 мг/кг и 0,2 мл/кг пробиотика общее состояние животных в данных группах не спадало. И за весь период исследований видимых признаков интоксикации не наблюдалось.

При введении препарата в дозе 8000 мг/кг и 0,4 мл/кг пробиотика, отмечали спустя 30-40 минут повышенную возбудимость, у некоторых мышей судорожные движения конечностей, одна мышка отказалась от приема корма и в дальнейшем погибла через 12 часов. Остальные животные этой группы остались живы и приходили в нормальное состояние через 8-12 часов.

При применении препаратов лабораторным животным в 4-й и 5-й группах признаки интоксикации наросли, что вызывало гибель трех и четырех мышей.

Животные погибали от остановки выживших животных отмечали проявление беспокойства. Мыши проявляли чрезмерную активность, также были отмечены судорожные сокращения конечностей. Спустя приблизительно два три часа возбуждение сменялось угнетенным состоянием, через 10-16 часов состояние животных приходило в норму. На вторые сутки подопытные мыши внешне не отличались от контрольных.

Гибель всех животных наблюдалось в группе с дозировкой ЯК 14000 мг/кг и 1 мл/кг пробиотика. При вскрытие погибших мышей легкие были полнокровны, отечные. Печень обычных размеров, полнокровна, паренхима рыхлая. Гибель животных при остром отравлении наступала в результате сердечно-легочной недостаточности.

Учитывая состояние оставшихся в живых животных, в опытных группах после введения препаратов ЯК и пробиотика КПМ-2 вычисляли (ЛД 50 ) согласно метода Кербера (таблица 1).

дыхания при судорожном сокращении. У

Таблица 1 – Количество животных после введения препарата

Доза Мг/кг и мл/кг	ЯК 4000 мг/кг и 0,1 мл/кг пробиотика	ЯК 6000 мг/кг и 0,2 мл/кг пробиотика	ЯК 8000 мг/кг и 0,4 мл/кг пробиотика	ЯК 10000 мг/кг и 0,6 мл/кг пробиотика	ЯК 12000 мг/кг и 0,8 мл/кг пробиотика	ЯК 14000мг/кг и 1,0 мл/кг пробиотика
Выжило жив-х	6	6	5	3	2	0
Пало жив-х	0	0	1	3	4	6
z	1	1	3	4	5	6
d	2000	2000	2000	2000	2000	2000
zd	2000	4000	6000	8000	10000	12000

Первые клинические признаки отравления после применения препаратов, проявлялись в виде угнетенного состояния, которое отмечалось на 17-19 день. По прошествии 1,5-2 часов указанные признаки отсутствовали, а через 3-5 часов крысы внешне не отличались от интактных.

На 20-й день после введения препарата у белых крыс наблюдали выраженное угнетение, взъерошенность шерстного покрова, снижение аппетита.

По истечении 7-8 часов эти признаки исчезали.

Начиная с 23-го дня и до конца опыта, у животных отмечали повышенную возбудимость, судорожные движения конечностей. Отмечали, что на 22-ой день от применения препаратов погибла одна крыса, которая получала суммарную дозу 35480 мг/кг ЯК и 117,3 мл/кг пробиотика, это более 5-ти раз превышает ЛД 50 этих препаратов при однократном их применении. Остальные крысы приходили в нормальное состояние через 10-12 часов.

Кратность препарата напрямую влияла на гибель крыс. Впоследствии на 23-й, 28-ой, 32-ой день пало по две крысы. Гибель животных вызывала доза препаратов превышающей ЛД50 более чем в 16-19 раз при однократном применение. Последняя крыса пала на 36-ой день от начала опыта от дозы, препаратов превышенной ЛД50 в 30 раз.

При вскрытии павших крыс отмечали выраженное полнокровие селезенки, печени, почек, асфиксическое состояние сердца (Таблица 2).

Таблица 2 – Данные по субхронической токсичности и кумулятивными свойствами ЯК и пробиотика КПМ-2 при совместном их применении.

Суммарная доза препаратов мг/кг и мл	28000 мг/кг и 8 мл	35480 мг/кг и 117,3мл	42550 мг/кг и 120,5 мл	133000 мг/кг и 130 мл	133000 мг/кг и 150 мл	210000 мг/кг и 200 мл
Всего животных	10	10	10	10	10	10
Выжило животных	10	9	8	8	7	0
Пало животных	0	1	2	2	3	2
z	0	0,5	1,5	2,0	2,5	2,5
d	0	3,2	39	78	133	170
zd	0	1,6	58,5	156	332,5	425,0

Заключение. Таким образом, при исследовании острой токсичности у животных, получавшихся ЯК и пробиотик КПМ-2 при совместном применении, отмечалось, что они не обладают кумулятивными свойствами и по классификации Ходжа и Стернера относятся к 4 классу опасности.

При   совместном   применении препаратов   коэффициент кумуляции составил 17,0. Согласно методике, Liamm c соавт. (1961), коэффициенты кумуляции больше пяти – свидетельствуют о развитии повышенной резистентности организма к изученным веществам.

Ветеринарный врач. – 2010. – №1. – С. 11.

В статье рассматриваются вопросы, касающиеся определения острой и хронической токсичности янтарной кислоты и пробиоика КПМ-2 при их совместном применении в эксперименте на белых мышах. Исследование показателей острой токсичности показало, что у опытных мышей отмечали сильное возбуждение, судороги, гибель наступила от остановки дыхания в период судорог. При вскрытие погибших мышей наблюдали гиперемию легких, полнокровие печени, селезенки, почек, асфиксическое состояние сердца.

ЯК и пробиотик КПМ-2 при совместном их применении не обладают кумулятивными свойствами и по классификации Ходжа и Стернера и относятся к 4 классу опасности.

Chubynina N.V. Summary

The article discusses issues related to the determination of acute and chronic toxicity of succinic acid and probioic KPM-2 when used together in an experiment on white mice. A study of the indicators of acute toxicity showed that the experimental mice were marked by strong excitement, convulsions, death occurred from respiratory arrest during the period of convulsions. Autopsy of the dead mice observed hyperemia of the lungs, plethora of the liver, spleen, kidneys, and asphyxiation of the heart.

Yak and probiotic KPM-2, when used together, do not possess cumulative properties according to the classification of Hodge and Sterner and belong to the 4th hazard class.