Острая токсичность и кумуляция ультракаина Д-С Форте при разных путях введения

Множество случаев, когда лекарственные препараты, предназначенные для медицинских целей без основания начинают применять в ветеринарной медицине. В то же время множество препаратов в ветеринарную практику пришло из медицины [2, 3, 4]. Исходя из этого, было решено изучить влияние ультракаина Д-С Форте на организм лабораторных животных при разных путях введения и разработать методы и способы их применения в ветеринарии. В настоящее время в медицинской стоматологии активно применяется артикаин, содержаший препарат ультракаин Д-С Форте [1]. Однако в доступной литературе очень скудны сведения о его применении в ветеринарии. Исходя из этого, мы решили изучить ответную реакцию организма мышей на нагрузку ультракаином Д-С Форте при различных путях введения, и установить его максимально переносимую, среднесмертельную и абсолютно смертельную дозы и кумулятивные свойства.

Цель и задачи исследования: изучить острю токсичность ультракаина Д-С Форте при внутримышечном и внутрибрюшном введении, и установить его максимально переносимую, среднесмертельную и абсолютно смертельную дозы.

Материалы и методы исследования. В первой части экспериментов изучили острую токсичность ультракаина Д-С Форте при внутрибрюшном введении на 36 клинически здоровых белых беспородных мышах обоего пола живой массой 22,0–26,0 г. Животные были разделены на 6 групп по 6 особей в каждой. Животным каждой группы, начиная с первой по шестой групп, однократно вводили в брюшную полость ультракаин в виде 4 %-го раствора (ультракаина Д-С Форте 1/100000) в дозах от 240 до 290 мг/кг соответственно с разницей в дозах 10 мг/кг. Наблюдение за состоянием мышей, а также оценку клинической картины отравления и летальность определяли в течение 14 дней с момента введения препарата. На основании полученных результатов вычисляли среднесмертельную, абсолютно смертельную и максимально переносимую дозы ультракаина Д-С Форте. Результаты приведены в табл. 1. Всех павших мышей подвергали патологоанатомическому вскрытию.

Таблица 1

Число погибших и выживших мышей после введения ультракаина в брюшную полость

Доза (мг/кг)	240	250	260	270	280	290
Выжило	06	05	04	02	02	00
Пало	00	01	02	04	04	06
Z	00	0,5	1,5	3	4	5
D	10	10	10	10	10	10
Z.D	00	05	15	30	40	50
Σ(Z.D)	140

Вторая часть опытов посвящена изучению острой токсичности ультракаина при внутримышечном введении. Исследование проведено на 30 белых беспородных мышах обоего пола живой массой 22,0–26,0 г разделенных на 6 групп по 5 особей в каждой. Животным каждой группы с первой по шестой однократно вводили ультракаин внутримышечно в дозах от 150 до 400 мг/кг соответственно. Разница между вводимыми дозами составляла 50 мг/кг. Наблюдение за животным вели аналогично предыдущему эксперименту. Результаты исследование внесены в табл. 2.

Таблица 2

Количество павших и выживших мышей после внутримышечного введения ультракаина

Доза (мг/кг)	150	200	250	300	350	400
Выжило	05	03	02	02	01	00
Пало	00	02	03	03	04	05
Z	00	01	2,5	3	3,5	4,5
D	50	50	50	50	50	50
Z.D	0	50	125	150	175	225
Σ(Z.D)	725

В третей части экспериментов изучили кумулятивные свойства ультракаина Д-С Форте при внутрибрюшном введении на 20 клинически здоровых белых беспородных мышах обоего пола со средней живой массой тела 22,0 г по методу Лим и соавт (1961). Животных фиксировали в положении вниз головой и инъекционной иглой вводили в брюшную полость расчетный объем препарата. Первоначальная доза, вводимая в течение первых 4 дней, составляла 0,1 часть от ЛД50 при внутрибрюшинном введении (27 мг/кг). В последующие каждые 4 дня вводимую дозу увеличивали в 1,5 раза. Наблюдали за подопытными животными каждый день в течение всего опыта и при этом обращали внимание на клиническую картину интоксикации, учитывали количество павших мышей и ряд других показателей. Коэффициент кумуляции определяли по отношению ЛД50 при многократном введении (ЛД50n) к ЛД50 при однократном внутрибрюшном введении. Результаты эксперимента представлены в табл. 3 и 4.

Таблица 3

Продолжительность и вводимые дозы ультракаина

Вводимая доза	Дни введения
	1–4	5–8	9–12	13–16	17–20	21–24	25–26
Ежедневная, в частях от ЛД50 острого	0,1	0,15	0,225	0,33	0,50	0,75	1,14
Вводимая доза (мг/кг)	27	40	58,74	90,25	133,5	202,92	304,32
Суммарная доза за 4 дня, и 2 последние дни мг/кг	108	160	234,96	361	534	811,68	608,64
Суммарная доза по периодам введения (мг/кг)	108	268	502,96	863,96	1397,96	2209,64	2818,28

Таблица 4

Расчет суммарной летальной дозы ультракаина Д-С Форте при введении в брюшную полость

День опыта	Суммарная доза мг/кг	Количество животных		Z	d	Z.d
		всего	павших
1-й	27,00	20	0	-	-	-
2-й	54,00	20	1	0,5	27,00	13,50
3-й	81,00	20	2	1,5	27,00	40,50
10-й	385,48	20	3	2,5	304,48	761,20
12-й	502,96	20	4	3,5	117,48	411,18
13-й	593,21	20	5	4,5	90,25	406,13
18-й	1130,96	20	6	5,5	537,75	2957,63
21-й	1600,88	20	10	8,0	469,92	3759,36
22-й	1803,80	20	11	10,5	202,92	2130,66
23-й	2006,72	20	14	12,5	202,92	2536,50
24-й	2209,64	20	15	14,5	202,92	2942,34
25-й	2513,96	20	19	17,0	304,32	5173,44
26-й	2818,28	20	20	19,5	304,32	5934,24
Σ( Z . d)=					27066,67

Результаты исследования. Клиническая картина отравления у всех животных была одинаковой. В первые минуты после введения раствора ультракаина наблюдались: нарушение дыхания, интенсивные и беспорядочные движения с подпрыгиванием, потеря равновесия, опрокидывание головы назад. Отмечались тетанические сокращения мышц разгибателей и сгибателей тазовых конечностей. Смерть наступила от остановки дыхания.

В среднем через 5мин после однократного внутрибрюшинного введения ультракаина в дозе 290 мг/кг наступила гибель всех животных группы. После введения препарата в дозах 280 и 270 мг/кг гибель 2 особей из каждой из этих групп наступала через 5–6 мин. От доз 260 и 250 мг/кг отмечена гибель двух и одной мыши соответственно. Препарат в дозе 240 мг/кг оказался не смертельной для всех 6-ти подопытных мышей. В условиях нашего эксперимента восстановление общего состояния у выживших мышей наблюдалось через 30 мин. Установлено, что максимально переносимая доза ультракаина Д-С Форте для мышей при внутрибрюшинном введении составляет 240 мг/кг, ЛД16 = 253,24 мг/кг; ЛД50 = 266,67 ± 2,76 мг/кг, а абсолютно летальная доза – 290 мг/кг.

На вскрытии обнаружено – в брюшной полости – остаточный объем введенного препарата, кровенаполнение брыжеечных сосудов, легкие воздушные, у большинства животных желудочки сердца пустые.

После внутримышечного введения препарата в дозе 150 мг/кг наблюдалось выживание всех животных, а при дозе 200 мг/кг погибли 2 особы через 1–5 мин. Через 5–12 мин после введения ультракаина в дозе 250 мг/кг наступила гибель 3-х мышей. После введения ультракаина в дозе 300 мг/кг погибли три мыши в течение 3–30 мин. Число павших мышей при дозе 350 мг/кг составило 4. Доза 400 мг/кг оказалась летальной для всех животных этой группы, и их гибель наступила через 1–9 мин. Результаты представлены в табл. 2.

Внутримышечное введение ультракаина мышам сопровождается следующими признаками: активное возбуждение, которое выражается сильными прыжками, не координированными движениями, затем животные падают набок с тетаническим сокращением дорсальных мышц шеи, дыхание учащенное. Гибель животных наступает в основном на 3–10-й минуте с полной релаксацией скелетных мышц. Постепенное восстановление общего состояния выживших мышей происходит в течение 30–50 мин. Установлено, что ЛД50 и ЛД100 ультракаина при внутримышечном введении для мышей составляют 255 ± 21,71 мг/кг и 400 мг/кг соответственно. ЛД16 составляет 203,55 мг/кг, а ЛД84 – 346,46 мг/кг.

Сведения об изучении кумулятивных свойствах ультракаина представлены в табл. 3 и 4.

На 26 день введения ультракаина пали все мыши от общей дозы 2818,28 мг/кг массы тела. ЛД50n = ЛД100n – Σ (Z∙d)/n; n – количество животных, d – разница между дозами. ЛД50n = 2818,28–1353,33 = 1464,95.

Таким образом, ЛД50 при многократном внутрибрюшном введении ультракаина Д-С Форте для мышей составляет 1464,95 мг/кг, коэффициент кумуляции (Кк) – 5,48 .

Заключение. 1. Установлено, что максимально переносимая доза ультракаина Д-С Форте для мышей при внутрибрюшном введении составляет 240 мг/кг, ЛД16 = 253,24 мг/кг; средняя смертельная доза ЛД50 = 266,67 ± 2,76 мг/кг, абсолютно летальная доза – 290 мг/кг, а коэффициент кумуляции Кк = 5,48.

• 2.    Максимально переносимая доза ультракаина Д-С Форте при однократном внутримышечном введении для мышей составляет 150 мг/кг, ЛД16 = 203,55 мг/кг; ЛД50 = 255 ± 21,71 мг/кг; абсолютно летальная доза – 400 мг/кг.