Острая токсичность препарата «Нормотрофин» при однократном внутрижелудочном введении

С целью повышения продуктивности сельскохозяйственных животных , увеличения темпов роста , сохранности поголовья , профилактики и лечения их заболеваний широкое распространение получили кормовые добавки , а также лекарственные и химические препараты , особое место среди которых занимают антибиотики .

Антибиотики способны переходить в мясо , молоко животных , яйца птиц и ряд других продуктов животного происхождения и оказывать токсическое действие на организм человека [1]. В связи с этим , актуальной задачей ветеринарии остаётся поиск эффективных и безопасных источников сырья для разработки лекарственных препаратов .

Нами для парентерального применения разработан препарат в жидкой лекарственной форме , включающий в себе компоненты исключительно растительного происхождения и способствующих ускорению темпов роста животных [2].

Одним из обязательных требований , предъявляемых к вновь созданным препаратам , является доклинические исследования безопасности лекарственных средств . Общепринятым является разделение токсикологических исследований на изучение общетоксического действия (« острой » и « хронической » токсичности ) и исследование специфических видов токсичности . Следует отметить , что у мелких лабораторных животных токсичность фармакологического вещества обычно исследуют при нескольких путях введения , причём обязательно используют тот путь , при котором была показана терапевтическая активность фармакологического вещества , и путь , который предполагается для клинического изучения . Фармакологические вещества , предназначенные для системного введения , вводят внутрь ( через зонд ) и парентерально ( внутрибрюшинно , если они не растворимы в воде , внутривенно и подкожно , если они растворимы ) [3].

Целью настоящего исследования было изучение параметров острой токсичности разработанного нами препарата « Нормотрофин ».

Материалы и методы . ЛД 50 определяли по методу Кербера [4]. Для изучения острой токсичности были использованы 16 самок и 12 самцов половозрелых белых мышей массой 19 – 23 г ., и 14 самок и 18 самцов белых крыс массой 166 – 180 г . В опыте использованы клинически здоровые животные , находившиеся в одинаковых условиях содержания и кормления .

Группы самок и самцов подопытных животных , формировали отдельно , придерживаясь принципа аналогов . Определение параметров токсичности препарата в остром опыте проводили при однократном внутрижелудочном введении . Изучаемый препарат вводили через рот в желудок животным , металлическим зондом с оливой на конце . Объем вводимой жидкости внутрижелудочно составлял для мышей – 0,5 и крыс – 3,0 мл . на животное , что является максимально допустимой для данных видов лабораторных животных , в зависимости от массы тела и пути введения . Животным контрольных групп вводили дистиллированную воду в аналогичных объемах . Наблюдения вели в течение 14 суток с момента введения препарата , причём в течение первых суток после введения препарата животные находились под непрерывным наблюдением .

Для регистрации картины интоксикации фиксировали количество павших и выживших животных. Учитывали общее состояние, особенности поведения, интенсивность и характер двигательной активности, наличие и характер судорог, координации движений, реакции на звуковые и болевые раздражители, частоту и глубину дыхательных движений, состояние волосяного и кожного покрова, окраску слизистых оболочек, динамику изменения массы тела, устанавливали время восстановления функций организма. В конце эксперимента, отдельных животных подвергали эвтаназии с помощью эфира диэтилового, проводили диагностическое вскрытие с целью макроскопического исследования внутренних органов.

Цифровой материал обрабатывали методом вариационной статистики с определением среднего арифметического ( М ), ошибки средней ( м ) и критерия достоверности по Стьюденту ( Р ).

Результаты исследований . При введении препарата внутрь гибели животных не наблюдалось , однако , в течение первых суток отмечали изменение поведенческой реакции . У мышей и крыс опытных групп наблюдали общее угнетение , они сбивались в кучу , отказывались от приема корма и воды , становились вялыми . Спустя 3 часа с момента введения испытуемого средства , у животных получивших препарат , в отличие от контрольных , отмечали снижение числа дыхательных движений ( табл .1).

• 1.    Показатели дыхания лабораторных животных в динамике после однократного внутрижелудочного введения препарата « Нормотрофин »

• 2.    Динамика изменения массы тела лабораторных животных при однократном введении внутрижелудочно препарата « Нормотрофин »

  Вид и пол животных	и	Масса тела ( г )		Разница от первоначальной массы
  		На начало опыта	В конце опыта	( г )	(%)
  мыши ( самки )	8	19,8±0,34	23,1±0,37	+ 3,38±0,35	+16,7
  контроль	8	20,0±0,45	23,4±0,49	+3,38±0,20	+17,0
  мыши ( самцы )	6	20,6±0,54	23,5±0,79	+2,83±0,44	+14,1
  контроль	6	20,7±0,54	23,5±0,37	+2,83±0,72	+13,5
  крысы ( самки )	7	173,1±2,58	196,3±2,47	+22,0±1,15	+13,4
  контроль	7	173,4±1,75	197,4±2,30	+24,0±0,94	+13,8
  крысы ( самцы )	9	175,9±1,30	196,2±2,22	+20,4±1,36	+11,5
  контроль	9	173,6±1,69	196,8±1,95	+23,2±0,96	+13,4

R X К щ О И и к к m к	св в О & 5 И св со О «	§ х	Количество дыхательных движений ( в мин )
			До введения	После введения , через ( час )
				3	12	24
мыши ( самки )	0,5	8	195,0±5,65	180,0±3,39*	194,0±5,54	195,0±3,69
контроль		8	196,0±6,04	210,0±2,40	209,2±2,64	198,0±5,21
мыши ( самцы )	0,5	6	178,3±3,62	156,8±3,08*	175,5±2,91*	182,3±2,69
контроль		6	185,3±5,06	194,3±3,62	186,8±3,52	183,0±4,84
крысы ( самки )	3,0	7	149,4±5,07	87,4±5,26*	89,1±11,2	129,1±4,11
контроль		7	152,0±2,45	143,14±3,85	144,9±6,70	141,4±5,07
крысы ( самцы )	3,0	9	131,3±1,97	88,7±2,55*	90,0±1,84*	130,0±3,52
контроль		9	134,0±2,12	132,0±2,37	132,7±2,89	134,7±2,15

Примечание : * - Р <0,05

Клинические признаки интоксикации с изменением глубины и частоты дыхательных движений исчезали в среднем у мышей через 12 часов , а у крыс к концу первых суток . По истечении 12 часов у мышей и крыс происходило постепенное восстановление двигательной активности . Реакции на звуковой раздражитель проверяли хлопком в ладоши , при этом отмечали резкое подергивание животных .

Данная реакция была сохранена на всём протяжении эксперимента. Болевое раздражение вызывали фиксацией хвоста гемостатическим пинцетом. При фиксации хвоста пинцетом, животные издавали писк и пытались освободиться от зажима. Со стороны волосяного и кожного покрова, а также слизистых оболочек видимых изменений не наблюдали. К концу первых суток животные активно двигались, охотно принимали корм и воду, осуществляли груминг.

Результаты исследований , связанных с контролем изменения массы тела животных в динамике , представлены в таблице 2.

Как видно из таблицы , прибавление в весе у животных всех испытуемых групп было равномерным . Достоверной разницы в изменении массы тела у животных опытных групп , в сравнении с контрольными группами , не обнаружено .

На 14 сутки опыта , при патологоанатомическом вскрытии специально умерщвленных мышей и крыс , контрольных и опытных групп обоего пола , видимых изменений со стороны внутренних органов не выявлено .

Заключение . Таким образом , результатами проведённых исследований установлено , что испытуемый препарат не обладает токсическим эффектом и руководствуясь классификацией Л . И . Медведь , Ю . С . Кагана , Е . И . Спыну (1968), принятой в настоящее время ВОЗ , исследуемый препарат можно отнести к группе малотоксичных веществ , и в соответствии с ГОСТом 12.1.007-76 по степени токсичности к IV классу опасности – вещества малоопасные .

ЛИТЕРАТУРА : 1. Гофман , В . Р . Экологические и социальные аспекты безопасности продовольственного сырья и продуктов питания

/В.Р.Гофман. – Челябинск, 2004. – 551с. 2. Медетханов, Ф.А. Влияние препарата растительного происхождения на темпы роста белых крыс /Ф.А. Медетханов, З.Ф. Медетханова //Международная научно-практическая конференция посвященная 50-летию ФЦТРБ. Биотехнология: токсикологическая, радиационная и биологическая безопасность. – Казань. – 2010. – С. 104 – 106. 3.Хабриев, Р.У. Руководство по экспериментальному     (доклиническому)     изучению новых фармакологических веществ/Р.У.Хабриев. – М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. – 832 с.: ил. 4. Беленький, М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта /М.Л. Беленький. – Л.: Медицина, 1963. – 262 с. 5. Медведь, Л.И. Пестициды и проблема здравоохранения /Ю.С.Каган, Е.И.Спыну    //Журнал Всесоюзного химического общества. – 1968. – Т.8 - №3. – С.263-271.

ОСТРАЯ ТОКСИЧНОСТЬ ПРЕПАРАТА « НОРМОТРОФИН » ПРИ ОДНОКРАТНОМ ВНУТРИЖЕЛУДОЧНОМ ВВЕДЕНИИ

Медетханов Ф . А ., Корчемкин А . А ., Ильин Г . Л .

Резюме

Исследованиями по определению параметров острой токсичности препарата « Нормотрофин », при однократном внутрижелудочном введении лабораторным животным , установлено , что испытуемый препарат в соответствии с ГОСТом 12.1.007-76 по степени токсичности относится к IV классу опасности – вещества малоопасные .

“NORMOTHROPHIN” PREPARATION ACUTE TOXICITY AT SINGLE INTRAGASTRIC INTRODUCTION

Medetkhanov F.A., Korchemkin A.A., Ilyin G.L. Summary

The investigations on defining the parameters of “ Normothrophin” preparation acute toxicity at single intragastric introduction to test animals showed that this preparation belongs to the IV th class of danger- little dangerous preparations according to the state standard 12.1.007-76.