Овоцидное действия химиопрепаратов на яйца нематод подотряда Strongylata

Наиболее распространенными гельминтозами жвачных животных в условиях экосистемы Среднего Поволжья, являются стронгилятозы желудочнокишечного тракта. Пораженные ими животные отстают в росте, резко снижается их продуктивность (удой молока, настриг шерсти, прирост живой массы, выход приплода) и в некоторых случаях в отарах молодняка овец при острой форме заболеваний отмечаются случаи гибели животных. Инвазии часто встречаются в ассоциативной форме [1].

В работе была поставлена задача – изучить сравнительную эффективность овоцидного действия некоторых химиопрепаратов на яйца нематод рода Nematodirus .

Материалы и методы исследований. В опыте использовали старые рекомендованные средства дезинвазии: едкий натр (NaOH), формалин, из новых средств готовый препарат Теко М (алкилдиметилбензиламмония хлорид (ЧАС) – 6,0 ± 0,6%, функциональные добавки), препараты ДП-2Т и Лизоформин а также препараты Дюльбак (смесь 4,5% дидецилметиламмоний хлорида, 6% поверхностно-активных веществ, 6% щелочных солей), Самаровка (ДН – смесь 4,8% алкилдиметилбензиламмоний хлорида и 4,8% алкилдиметил (этилбензил)-аммоний хлорида), готовый препарат Сайдекс (ДН – 0,55% орто-фталевый альдегид).

В ходе опыта из фекалий естественно зараженных нематодирозом жвачных животных выделяли яйца гельминтов. Затем после действия на яйца химиопрепаратами их отмывали путем центрифугирования с физиологическим раствором, культивировали яйца нематодирусов до инвазионной стадии, после чего ими заражали белых мышей. Работа проводилась по описанным методикам [2].

В опытах использовали: 1) рабочие растворы химиопрепаратов; 2) взвеси яиц нематодирусов (род Nematodirus ) с содержанием 300 ± 30 экз. в 1 мл физиологического раствора (0,86% NaCl); 3) белых мышей со средней живой массой 20 г.

Исследования проводили с взвесью яиц нематодирусов в физиологическом растворе. Для этого в центрифужные пробирки емкостью 20 мл вносили по 5 мл рабочих растворов исследуемых препаратов и 1 мл взвеси, в которой содержалось 300 + 30 жизнеспособных яиц нематод в физиологическом растворе. Смеси тщательно перемешивали и выдерживали в течение 30, 60, 120, 240 мин, 1 и 2 суток. В качестве контроля использовали взвесь яиц нематодирусов в физиологическом растворе, которые культивировали при комнатной температуре. Эксперименты проводили в трехкратной повторности.

После экспозиции при комнатной температуре в течение 30, 60, 120, 240 мин, 1 и 2 суток, взвесь яиц нематодирусов освобождали от воздействия использованных химиопрепаратов 3-кратным промыванием физиологическим раствором путем центрифугирования при 1500 об. / мин в течение 5 минут. Отмытые взвеси яиц в объеме 1 мл помещали в стерильные пенициллиновые флаконы, после чего добавляли еще 3 мл физиологического раствора и закрывали марлевыми пробками.

Флаконы с отмытыми от препаратов яйцами нематодирусов инкубировали при комнатной температуре. Жизнеспособность яиц после воздействия препаратов определяли по наличию или отсутствию деления зародышевых клеток яйца. Наблюдение за развитием яиц проводили каждые 2 суток путем микроскопирования взвеси яиц в чашках Петри. Окончательный подсчет живых и неживых личинок выполняли на 21 день.

Эффективность овоцидного действия (Эод) определяли по разнице между числом жизнеспособных (развивающихся) яиц гельминтов в контроле и опыте, отнесенной к их числу в контроле и выраженной в процентах:

Эод = Як – Яо / Як × 100, где Эод – эффективность овоцидного действия, Пк – число живых яиц в контроле, Яо – число живых яиц в опыте.

Результаты исследований. При воздействии на культуру яиц нематодирусов препаратом ДП-2Т (0,2%-ной концентрации) и – Лизоформин (10%- ной концентрации) гибель наблюдалась у 100% яиц уже после 30 минутной экспозиции. Эффективность препарата Сайдекс при воздействии его на культуру яиц нематод составила от 87 до 97%. Эффективность овоцидного действия препарата Самаровка (10%- ная концентрация) колебалась от 64 до 89%. Менее эффективными оказались 10%-ные растворы едкого натра (до 45% – через 2 суток) и формалина (до 27% – через 2 суток), а также препарат Теко М (до 11% – через 2 суток). Эффективность препарата Дюльбак составила 0%.

В контроле через 21 день после инкубирования в яйцах нематодирусов сформировались инвазионные личинки.

Во втором этапе опыта после предварительного 4-хчасового воздействия препаратами на яйца нематодирусов последние отмывали физиологическим раствором путем 3-кратного центрифугирования при 1500 об. / мин в течение 5 минут. Отмытые взвеси яиц нематодирусов в объеме 1 мл помещали в стерильные пенициллиновые флаконы, после чего добавляли еще 3 мл физиологического раствора. Флаконы закрывали марлевыми пробками, после чего инкубировали при комнатной температуре. Через 21 день в яйцах сформировались инвазионные личинки. Яйцами нематодирусов, содержащими инвазионных личинок, заражали 8 групп (по 3 животных в каждой) белых мышей.

Животным контрольной группы вводили чистую культуру инвазионного начала нематод, полученную без предварительной обработки химиопрепаратами.

На 7-й день после заражения белых мышей опытной и контрольной групп убивали, вскрывали и определяли наличие и степень пораженности слизистой оболочки тонкого отдела кишечника узелками.

Заражение опытных белых мышей произошло после алиментарного введения инвазионных яиц нематодирусов, которые предварительно до культивирования были обработаны химиопрепаратами. Отмечали наличие сильного, умеренного и слабого поражения слизистой оболочки тонкого отдела кишечника у опытных животных.

Сильная степень поражения слизистой кишечника отмечалась у животных следующих 5 групп: едкий натр (1 животное), формалин (2 животных), Теко М (3 животных), Дюльбак (3 животных), контроль (3 животных). Умеренное поражение слизистой кишечника отмечали в следующих 2-х группах: едкий натр (2 животных), формалин (1 животное). Слабую степень поражения слизистой также отмечали в 2-х группах: Самаровка (3 животных), Сайдекс (1 животное). Отсутствие поражения слизистой кишечника у 3-х групп животных: препарат ДП-2Т (3 животных), препарат Лизоформин (3 животных) и Сайдекс (2 животных), связано с высоким процентом овоцидного действия, которым обладают, данные препараты. Заражение животных яйцами, предварительно обработанными этими препаратами не произошло, так как вводимая животным взвесь, не содержала инвазионных яиц. Данные препараты обладают 100% овоцидным действием по отношению к стронгилятам.

Заключение. Таким образом, результаты изучения овоцидного действия 8 химиопрепаратов показали, что 3 из них обладают высокой овоцидной активностью по отношению к яйцам стронгилят. Препарат Сайдекс, обладая 92% овоцидным действием, значительно снижает вероятность заражения животных нематодирусами.

Резюме

Изучено овоцидное действие 8 химиопрепаратов, из которых 3 (ДП-2Т, Лизоформин и Сайдекс) обладают высокой овоцидной активностью по отношению к яйцам стронгилят. Препарат Сайдекс, обладая 92% овоцидным действием, значительно снижает вероятность заражения животных нематодирусами.