Полиморфизм гена пролактина у коров татарстанского типа холмогорского скота

Пролактин относится к семейству белковых гормонов , участвующих в инициации и поддержании лактации у млекопитающих . Многие данные указывают на большое значение пролактина в регуляции синтеза и секреции разнообразных компонентов молока .

В настоящее время известно 2 аллеля пролактина (PRL). У большинства пород скота частота аллеля А превосходит над В . Такая картина характерна для голштинского скота , широко используемого для совершенствования отечественных пород и выведения новых типов . Присутствие В - варианта пролактина в молоке коров ( генотипы АВ и ВВ ) оказывает существенное влияние на молочную продуктивность . Целью данной работы было изучение полиморфизма гормона пролактина у коров татарстанского типа холмогорской породы и выявление взаимосвязи с молочной продуктивностью [1,2,3].

Материал и методика . Исследование проводили в течение 2010 г . на базе племрепродуктора имени Вахитова Кукморского района Республики Татарстан у коров - первотелок (n=161) татарстанского типа холмогорской породы . ДНК - диагностика проведена в ГНУ " Тат НИИСХ ". По полученным данным у них выявлены аллели А и В пролактина и три генотипа – АА , ВВ и АВ .

Для проведения ДНК - диагностики и оценки по гену пролактина у животных были отобраны пробы крови .

Кровь , полученную из яремной вены животных , вносили в пробирки с 100 мМ ЭДТА до конечной концентрации 10 мМ .

Фрагменты ДНК амплифицировали на программируемом термоциклере MyCycler (Bio-Rad, США ). Для ПЦР использовали Taq полимеразу (Fermentas, Латвия ) с поставляемым буфером . Все четыре нуклеотида (Fermentas) были добавлены в реакционную смесь в конечной концентрации 0,2 мМ . Для амплификации фрагмента гена пролактина использовали следующие праймеры PRL1: 5'-CGAGTCCTTATGAGCTTG ATTCTT-3', PRL2: 5'-GCCTTCCAGAAGTCGTTTGTTTTC-3', (Mitra et al, 1995).

Для определения полиморфизма гена пролактина по вариантам А и В 20 мкл ПЦР пробы обрабатывали 5 ед . эндонуклеазы рестрикции Rsa I ( СибЭнзим , Россия ) согласно рекомендациям производителя .

Молочную продуктивность определяли ежемесячно путём проведения контрольных доек (3 раза в месяц ). На основании контрольных доек рассчитывали общую молочную продуктивность за 305 дней лактации . Анализ качества молока производили на приборе « Лактан 1-4» в соответствии с инструкциями производителя . Для измерения использовали свежее молоко .

В работе наряду с экспериментальными материалами использовались данные зоотехнического и племенного учета хозяйств , то есть племенные карточки (2- МОЛ ).

Полученные результаты в ходе научных исследований обработаны биометрическим методом с использованием ЭВМ и программного приложения Microsoft Excel.

Результаты исследований . Анализ результатов ДНК - тестирования выявил следующее распределение животных по генотипам локуса пролактина : АА – 119 голов , АВ – 22 головы и ВВ – 7 голов ( табл . 1). Частота встречаемости аллеля А составила 0,88, аллеля В – 0,12. В данном хозяйстве преобладают животные с генотипом АА , которые составляют 80,4%, а желательный генотип ВВ имеют лишь 4,7% животных . Следовательно в хозяйстве были использованы быки - производители в геноме которых отсутствовал аллель В .

1. Полиморфизм животных по гену пролактина

Генотип	Число животных	Частота генотипа , %
АА	119	80,4
АВ	22	14,9
ВВ	7	4,7

В группах коров с генотипами по гену пролактина АА , АВ и ВВ выявлены отличия по молочной продуктивности ( табл . 2). Наивысший удой (6168 кг молока ) за 305 дней лактации имели животные с генотипом

АА , достоверно превосходили группу животных с генотипом ВВ ( на 437,2 кг , Р <0,05). Коровы - первотелки с генотипом АВ имели удой за 305 дней на 64 кг ниже группы с генотипом АА .

Изучение динамики содержания жира в молоке коров за 305 дней лактации показало , что в молоке коров с генотипом пролактина ВВ данный показатель имел наивысшее значение (4,25%). У коров с генотипом пролактина АА содержание жира оказалось наименьшим – 3,87%, промежуточное положение занимали коровы с генотипом пролактина АВ – 3,93%.

2. Молочная продуктивность коров - первотелок с различными генотипами по гену пролактина

Показатели	Генотипы
	АА	АВ	ВВ
Удой за 305 дней лактации , кг	6168,0±70,7*	6104,8±173,3	5730,8±160,4
Содержание жира , %	3,87±0,07	3,93±0,16	4,25±0,31
Количество молочного жира , кг	238,6±4,8	239,5±10,9	243,7±18,9
Содержание белка , %	3,10±0,02	3,11±0,03	3,13±0,02
Количество молочного белка , кг	191,2±2,9	190,9±5,9	179,4±4,8

Выход молочного жира у коров , имеющих в геноме аллель А пролактина в составе гомозиготного генотипа , был выше по сравнению с группой животных с генотипом ВВ на 4,2 и 5,1 кг соответственно .

Содержание белка в молоке животных с генотипом пролактина ВВ за 305 дней лактации было выше по сравнению с животными , имеющими АА аллельный вариант в своем геноме на 0,03% и 5,1 кг .

Заключение . В результате исследований коров - первотелок татарстанского типа холмогорской породы , методом ДНК - диагностики , выявлены три генотипа по локусу PRL ( АА , АВ , ВВ ). При этом частота встречаемости генотипа АА составила 80,4 %. Частота аллеля " А " пролактина составило 0,88, аллеля " В " – 0,12. Животные , гомозиготные по локусу PRL ( ВВ ), имели преимущество по сравнению с генотипами АА и АВ по содержанию и выходу жира , белка в молоке . По удою за 305 дней лактации животные , имеющие в геноме аллель А пролактина в составе гомо - и гетерозиготного генотипа , превосходили коров с генотипом ВВ .

ЛИТЕРАТУРА: 1. Алипанах М. Хозяйственно-полезные признаки коров с различными генотипами каппа-казеина и пролактина : дисс.канд.с.-х.наук : 06.02.01, 06.02.04 / Алипанах Массуд. – Москва. – 2006. – 125 с. 2. Калашникова, Л.А. ДНК–технологии оценки сельскохозяйственных животных/ Л.А. Калашникова, И.М. Дунин, В.И. Глазко [и др]. – М.: ВНИИплем, Лесные поляны.-1999.- 148 с. 3. Хабибрахманова, Я. М. Полиморфизм молочных белков и гормонов крупного рогатого скота : автореф. дисс.канд.биол.наук : 06.02.01 / Хабибрахманова Язиля Аминовна. – Лесные Поляны. – 2009. – 23 с.

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА ПРОЛАКТИНА У КОРОВ ТАТАРСТАНСКОГО ТИПА ХОЛМОГОРСКОГО СКОТА

Закирова Г . М ., Султанов Р . Р ., Зиннатова Ф . Ф .

Резюме

Определены генотипы у коров татарстанского типа холмогорской породы по локусу гена пролактина в племрепродукторе имени Вахитова Кукморского района Республики Татарстан . При анализе образцов крови , методом ПЦР - ПДРФ , установлено три генотипа АА , АВ , ВВ с процентным соотношением 80,4 : 14,9: 4,7 соответственно . Распределение частот аллелей было следующим : А аллель составил 0,88, В аллель – 0,12. Установлено влияние генотипа пролактина на молочную продуктивность коров .

POLYMORPHISM OF PROLACTIN IN TATARSTAN TYPE KHOLMOGOR BREED COWS

Zakirova G.M., Sultanov R.R., Zinnatova F.F.