Полиморфные варианты генов цитокинов, ассоциированные с факторами прогноза, у больных множественной миеломой



Павлова А. А., Бубнова Л. Н., Бессмелъцев С. С., Павлова И. Е.

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», Санкт-Петербург

ПОЛИМОРФНЫЕ ВАРИАНТЫ ГЕНОВ ЦИТОКИНОВ, АССОЦИИРОВАННЫЕ С ФАКТОРАМИ ПРОГНОЗА, У БОЛЬНЫХ МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМОЙ

Введение. В последнее время многие исследовательские группы изучают одиночные нуклеотидные полиморфные варианты генов цитокинов как генетические маркеры, ассоциированные с тем или иным заболеванием. Согласно данным литературы для некоторых генов цитокинов была установлена ассоциация с онкогематологически-ми заболеваниями. Учитывая, что в патогенезе множественной миеломы (ММ) задействован широкий спектр цитокинов, а исследования полиморфизма генов цитокинов при этом заболевании весьма немногочисленны, представлялось актуальным определить полиморфные варианты генов цитокинов, ассоциированные с развитием ММ и оценить их значимость в прогнозировании течения заболевания.

Материалы и методы. Нами были обследованы 80 пациентов с множественной миеломой; контрольную группу составили 100 здоровых индивидуумов. Все обследованные лица являлись жителями Северо-Западного региона России. Диагноз симптоматической ММ был верифицирован на основании критериев Международной рабочей группы по изучению миеломы ISS2005 г. Геномную ДНК выделяли из ядросодержащих клеток периферической крови. Определение одиночных нуклеотидных полиморфных вариантов генов IL-la, IL-ip, IL-1R, IL-IRA, IL-2, IL-4, IL4Ra, IL-6, IL-10, IL 12, TNF-a, IFN-y,

TGF-pi проводили с помощью PCR-SSP. Сравнение частот генотипов оценивали методом %2 с поправкой Йетса, при р < 0,05 различия считали достоверными.

Результаты. На основании анализа распределения частот генотипов цитокинов установлено, что у пациентов с ММ гомозиготы IL-la-889 ТТ и IL-ip +3962 ТТ (0,23 и 0,21 соответственно против 0,02 и 0,04 в контрольной группе), а также IL-6-174 GG и IL-6 nt565 GG (0,36 и 0,39 соответственно против 0,18 и 0,20 в контрольной группе) встречаются значительно чаще, чем у здоровых лиц (р<0,05). В тоже время в группе больных ММ, напротив, достоверно реже, чем у здоровых лиц выявлялись гомозиготы IL-4-33 СС (0,24 против 0,47) и TGF-b 1 codon 25 GG (0,65 против 0,84) (р<0,05). Таким образом, полученные данные позволили расценить гомозиготы IL-la -889 ТТ и IL-ip +3962 ТТ, как иммуноге-нетические факторы, предрасполагающие к развитию ММ, а гомозиготы IL-4-33 СС и TGF-b 1 codon 25 GG возможно, определяют устойчивость организма к развитию ММ. Для определения наличия или отсутствия взаимосвязи установленных «предрасполагающих» и «про-тективных» иммуногенетических факторов с показателями международной шкалы стадиро-вания ММ ISS2005 г. были проанализированы уровни альбумина и р2-микроглобулина, в груп- пах пациентов с наличием в генотипе выявленных иммуногенетических факторов и без таковых. Больные ММ были разделены на 4 группы: 1 гр. — с наличием IL-la -889 ТТ, IL-ip +3962 ТТ, IL-6-174 GG, IL-6 nt565 GG; 2 гр. — с IL-la -889 ТТ, IL-lp +3962 ТТ; 3 гр. — с IL-6-174 GG, IL-6 nt565 GG; 4 гр. — пациенты, у которых не были выявлены иммуногенетические факторы, ассоциированные с развитием ММ. Средние величины уровня альбумина в первых трех группах больных с различным сочетанием «негативных» генотипов были достоверно ниже, чем в 4-й гр (р<0,05). Самый низкий уровень альбумина был зафиксирован в 1 гр. пациентов (3,34 + 0,08 г/дл), тогда как самый высокий (3,87 + 0,09 г/ дл) — выявлялся в 4 группе, во 2-й и 3-ей группах этот показатель составлял 3,49 + 0,14 г/дл и 3,53 + 0,07 г/дл соответственно. Наиболее высокие уровни р2-микроглобулина определялись в 1 гр. больных ММ (5,54 + 0,56 мг/л), тогда как в 4 гр. пациентов уровень данного белка равнялся 4,88 + 0,3 мг/л (р<0,05). Для анализа уровня альбумина и р2-микроглобулина у пациентов в зависимости от наличия или отсутствия установленных нами «протективных» иммуногенетических факторов были выделены 3 группы больных: 1

гр. — с наличием только TGF-bl codon 25 GG; 2 гр. — с наличием IL-4-33 СС и TGF-bl codon 25 GG; 3 гр. — пациенты, у которых не были выявлены «протективные» в отношении развития ММ иммуногенетические факторы. Уровень альбумина у пациентов 1-й гр. был значимо ниже (3,4 г/дл) по сравнению с пациентами из 2 и 3 групп (3,6 + 0,28 и 3,87 + 0,09 г/дл; р<0,05). У пациентов с наличием двух «протективных» гомозигот в генотипе (2 гр.) уровень р2-микроглобулина был наиболее низким (2,7 + 0,14 мг/л) в сравнении с 1 и 3 гр. (5,17 + 0,18 мг/л и 4,88 + 0,30 мг/л, соответственно; р<0,05).

Выводы. Таким образом, на основании комплексного изучения полиморфизма генов цитокинов у больных ММ и проведения клинико-лабораторного анализа полученных результатов определены новые иммуногенетические факторы, предрасполагающие к развитию ММ (IL-la -889 ТТ, IL-lp +3962 ТТ, IL-6-174 GG, IL-6 П1565 GG). Сочетание этих факторов в генотипе ассоциировано с низким уровнем альбумина (<3,5 г/дл) и высоким уровнем Р2-микроглобулина (>5,5 мг/л), что позволяет отнести эти генотипы к дополнительным негативным прогностическим факторам развития ММ.