Получение и применение антиплацентарной крови при акушерско-гинекологических заболеваниях коров

На сегодняшний день основным фактором понижения воспроизводительной функции маточного поголовья служат акушерско-гинекологические заболевания, что приводит к массовому распространению бесплодия у коров. В настоящее время наиболее перспективным путем повышения продуктивности животноводства является внедрение современных технологий, позволяющих с высокой эффективностью применить новые методы лечения и профилактики при акушерско-гинекологических заболеваниях коров, сохраняя и повышая качество и безопасность продукции.

В ветеринарной практики используется множество различных методов лечения гинекологических заболеваний у коров, но они не всегда являются эффективными, даже при оптимальных условиях содержания. Применение новых эффективных методов лечения и профилактики акушерско-гинекологических заболеваний является одним из основных критериев увеличения поголовья скота и повышения его продуктивности [5, 6].

Препараты из тканей плаценты в последние годы чаще применяют для профилактики и лечения послеродовой патологии. В некоторых литературных источниках встречаются примеры влияния препаратов из плаценты на скорость инволюции матки, так как в плаценте содержится множество биологически активных веществ, в том числе эстрадиол и его производные – эстрон и эстриол, которые ускоряют пролиферативные процессы в эндометрии и повышают тонус мускулатуры матки коровы [2, 3].

Актуальным направлением в лечении и профилактике акушерско-гинекологических заболеваний у коров является применение антиплацентарной крови (С.Р. Юсупов, Ф.А. Сунагатуллин «Методы получения антипла-центарной крови, ее применение для профилактики и лечения, послеродовых акушерско-гинекологических заболеваний у коров». Патент на изобретение № 2537026. «31» октября

2014 г.).

Лечебно-профилактические свойства антиплацентарной крови, полученной после двукратного подкожного введения лошадям плацентолизата коров, основаны на содержании в ней биологических активных веществ, в том числе гипериммунной сыворотки (специфических антител), которые направленно воздействуют на ускорение выведения лохий и инволюции матки у новотельных коров.

Материалы и методы исследования. Исследования проводились на кафедре акушерства и патологии мелких животных имени А.П.Студенцова ФГБОУ ВО Казанская Государственная академия ветеринарной медицины, в ООО «Колос» Тетюшского района Республики Татарстан и ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности».

Методика получения антиплацентарной крови (АПК) заключалась в том, что лошади двукратно с интервалом 14 дней подкожно вводили плацентолизат в дозе по 20 мл, содержащий части котиледонов и карункулов матки коров, а через 14 дней после повторного введения брали кровь из яремной вены.

На первом этапе исследований для получения плацентолизата, содержащего части котиледонов и карункулов, использовали матку с содержимым после забоя 3-х здоровых коров с 3, 4 и 5 месячной беременностью.

Матки коров отделяли от жировой ткани и вскрывали (рис. 1).

Для получения карункулов и котиледонов было проведено полное вскрытие матки и удаление плода с околоплодной жидкостью.

Получение материала из матки коровы в 3 месяца беременности: плод (3 мес.) – его длина составляла 15 см, массой 145 г, полости тела плода закрыты, все органы сформированы и имели четкие очертания, живот незначительно увеличен. Получены кусочки карунку-лов и котиледонов общей массой 120 г.

Получение материала из матки коровы в 4 месяца беременности: плод (4 мес.) – его длина составляла 24 см, массой 170 г. Полос- ти тела плода закрыты, волосяной покров отсутствует. Кусочки карункулов и котилединов общей массой 350 г.

Получение материала из матки коровы в 5 месяца беременности: плод (5 мес.) – его длина составляла 39 см, массой 320 г. Полос- ти тела плода закрыты. Кусочки карункулов и котилединов общей массой 850 г.

Карункулы матки коров имели выпуклые полукруглые формы, а каждый котиледон содержал главную ветвь, состоящую из пупочных кровеносных сосудов (рис.1 б, в, г).

Рисунок 1 - Подготовка материала для получения плацентолизата а – отделение от жировой ткани и вскрытие матки; б – карункулы в матке коров (беременность 3 месяца); в – котиледоны в хорионе (беременность 4 месяца); г – котиледоны в хорионе (беременность 5 месяцев).

Для получения плацентолизата брали 50 г кусочков карункулов и котиледонов и тщательно растирали в чашке пестиком, растворяя их в 20 мл теплого (+200С) физиологического раствора натрия хлорида. Затем фильтровали в течение 1 часа.

Полученный путем фильтрации плацен-толизат вводили лошадям опытной группы (N=3) подкожно в области шеи двукратно с интервалом 14 дней в дозе по 20 мл и сравнивали с состоянием животных контрольной группы (N=3), которым подкожно в области шеи двукратно с интервалом 14 дней вводили физиологический раствор в дозе по 20 мл.

До и после введения плацентолизата и физиологического раствора у опытной и контрольной групп животных брали кровь для гематологического исследования. После второго введения плацентолизата у лошади с хо- рошими показателями иммунологического ответа (с высокими показателями антител класса IgM, IgA, IgG) из яремной вены брали антиплацентарную кровь, которую консервировали раствором натрия цитрата. Для этого в стерильную посуду наливали 10%-ный раствор натрия цитрата из расчета 10 мл на 100 мл крови. Перед введением антиплацентар-ную кровь подогревали в водяной бане.

При лечении коров (N=5) с послеродовыми акушерско-гинекологическими заболеваниями АПК вводили подкожно в области шеи в дозе 10 мл, двукратно с интервалом 6 дней.

С профилактической целью послеродовых заболеваний новотельным коровам (N=5), вводили подкожно однократно в дозе 10 мл.

Результаты исследования. За состоянием животных опытной и контрольной групп вели постоянное наблюдение. У этих групп, физиологические показатели животных (общее состояние, аппетит, пульс, дыхание, температура тела) не отличались и были в пределах нормы.

Результаты гематологического исследования крови лошадей опытной и контрольной групп до и после введения плацентолизата и физиологического раствора отражены в таблице 1.

Таблица 1- Гематологические показатели крови лошадей в опытной и контрольной группах

Показатели	Границы нормы	Опытная группа (введение плацентолизата)				Контрольная группа (введение физраствора)
		До введения	После 1-го введения	После 2-го введения		До введения	После 1-го введения	После 2-го введения
1	2	3	4	5		6	7	8
Лейкоциты	6,0 12,0	9,7±1,21	10,4±0,36	9,9±0,55		9,13±0,46	9,37±0,11	6,50±0,42
Лимфоциты	3,0-8,6	4,27±0,70	2,93±0,47	2,33±0,29*		4,30±0,04	3,50±0,14	1,47±0,11
Моноциты	0,2-1,3	0,13±0,04	0,17±0,04*	0,17±0,04		0,17±0,08	0,13±0,04	0,13±0,04
Гранулоциты	1,0-4,3	5,33±0,63	7,07±0,36	7,40±0,80		4,70±0,07	5,57±0,11*	4,93±0,60
Эритроциты	6,0 12,0	6,93±0,35*	7,90±0,72	7,68±0,67		9,70±0,42	8,99±0,05	9,65±0,06
Гемоглобина	100180	136,0±8,60	146,0±13,8	142,7±10,35		173,3±1,08 *	170,3±2,16	178,3±2,16
Тромбоциты	100600	151,0±37,5 3	272,7±36,58	234,3±31,81		122±2,12	122,7±2,48*	197,0±5,66
Лейкоформула
1	2	3	4		5	6	7	8
Лимфоциты	25-60	43,8±3,29	28,6±3,24		23,5±0,37	46,33±0,82	39,37±1,31*	22,50±0,37
Моноциты	4-11	1,20±0,57*	1,60±0,25		1,50±0,25	1,40±0,07	1,27±0,04	1,43±0,18
Гранулоциты	16-36	55,0±3,03	69,83±3,36*		74,6±4,01	50,3±0,83	58,43±0,68	76,13±0,74

Примечание: * – Р < 0,05.

Из данных таблицы видно, что у лошадей опытной группы после первого введения плацентолиза наблюдалось увеличение лейкоцитов на 7,2% (с 9,7±1,21 до 10,4±0,36), а после повторного введения – на 2,6% (с 9,7±1,21 до 9,9±0,55). В контрольной группе животных после первого введения физиологического раствора количество показателя лейкоцитов увеличилось на 2,6% (с 9,13±0,46 до 9,37±0,11), а после повторного введения снизилось на –28,8% (с 9,13±0,46 до 6,50±0,42). Лейкоциты вырабатывают антитела – белковые частицы, поражающие любые чужеродные микроорганизмы, попавшие в кровь организма лошадей. Количество моноцитов у животных опытной группы после первого введения плацентолизата увеличилось на 30,7% (с 0,13±0,04 до 0,17±0,04), а после повторного введения оставалось без изменений. У животных контрольной группы уровень моноцитов снизился на 23,5% (с 0,17±0,08 до 0,13±0,04), а после повторного введения не изменился. У животных опытной группы после первого введения плацентоли-зата количество гранулоцитов увеличилось на 33,4% (с 5,33±0,63 до 7,07±0,36), а после повторного введения – на 39,6% (с 5,33±0,63 до

7,40±0,80). В контрольной группе количество гранулоцитов после первого введения физиологического раствора повысилось на 18,5% (с 4,70±0,07 до 5,57±0,11), а после повторного введения – на 4,9% (с 4,70±0,07 – до 4,93±0,60).

Среднее содержание гемоглобина, эритроцитов и тромбоцитов в период опытов оставалось в пределах физиологической нормы. Однако после повторного введения пла-центолизата в опытной группе животных отмечалось увеличение в лейкоцитарной формуле показателя гранулоцитов на 35,6% (с 55,00±3,03 до 74,57±4,01), моноцитов – на 25% (с 1,20±0,57 до 1,50±0,25). Это свидетельствует о специфическом взаимодействии антител с антигенами в организме у опытных животных (повышение гранулоцитов сопровождалось увеличением количества лейкоцитов).

При изучении терапевтической эффективности было установлено, что использование подкожного введения антиплацентарной крови в дозе 10 мл двукратно с интервалом 6 дней при комплексном лечении коров с послеродовыми эндометритами сроки выздоровления в опытной группе (N=5) сокраща- лись на 1-2 дня, чем при лечении коров в контрольной группе (N=5) без применения АПК.

При однократном подкожном введении АПК новотельным коровам в опытной группе (N=5) в дозе 10 мл у животных наблюдалось 100%-ное отделение последа в течение 4-5 часов, а в контрольной группе коров (N=5), где АПК не вводились, самостоятельное отделение последа наблюдалось только у 80% животных. Проявления послеродовых заболеваний (эндометриты, субинволюция матки) у коров опытной и контрольной групп не отмечались.

Заключение. Применение антиплацен-тарной крови при лечении коров с послеродовыми эндометритами позволило сократить сроки лечения и снизить экономические затраты. Использование АПК сразу после выведения плода привело отделению последа у всех опытных коров.

Результаты исследования свидетельст- вуют об эффективности применения АПК при лечении и профилактике акушерско-гинекологических заболеваний у коров.

Резюме

В статье описываются метод получения антиплацентарной крови (АПК), результаты лечения и профилактики акушерско-гинекологических заболеваний коров с применением антиплацентарной крови.